Molekulare und funktionelle Charakterisierung aktiver Insulin-like growth factor-I- und Insulin-like growth factor-II Rezeptoren auf klonalen Glukagon-produzierenden Zellen:
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1998
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE:
1
EINLEITUNG
1.1
ENDOKRINES
PANKREAS
1
1.1.1
ENTWICKLUNG
1
1.1.2
TOPOGRAPHIE
UND
ANATOMIE
DER
LANGERHANS'
SEHEN
INSEL
1
1.1.3
WECHSELWIRKUNGEN
ZWISCHEN
DEN
A-,
B
UND
D
ZELLEN
3
1.2
GLUKAGON
4
1.2.1
LOKALISATION
DER
GLUKAGON
PRODUZIERENDEN
ZELLEN
4
1.2.2
STOFFWECHSELFUNKTION
VON
GLUKAGON
4
1.2
3
GLUKAGONBIOSYNTHESE
5
1.2.4
GHIKAGONSEKRETION
10
1.3
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR-1
UND
-
II
11
1.3.1
IGF-1
BIOSYNTHESE
11
1.3.2
IGF
II
-
BIOSYNTHESE
13
1.3.3
VERTEILUNG
VON
IGF-1
UND
IGF
II
IM
ENDOKRINEN
PANKREAS
14
1.3.4
EXPRESSION
VON
IGF-1
UND
IGF
II
IM
ENDOKRINEN
PANKREAS
14
1.3.5
SEKRETION
VON
IGF-1
UND
IGF
II
IM
ENDOKRINEN
PANKREAS
16
1.3.6
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR-1
REZEPTOR
18
1.3.7
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR
II/MANNOSE-6-PHOSPHAT
REZEPTOR
20
1.3.8
BEDEUTUNG
VON
IGF-1
UND
IGF
II
IM
KOHLENHYDRATSTOFFWECHSEL
21
A.
WIRKUNG
VON
IGF-1
UND
-
II
AUF
DIE
ENDOKRINE
PANKREASFIMKTION
-
EXPERIMENTELLE
STUDIEN
-
22
B.
WIRKUNG
VON
IGF-1
UND
-
II
AUF
DIE
ENDOKRINE
PANKREASFUNKTION
-
KLINISCHE
STUDIEN
-
24
1.4
BEDEUTUNG
DER
IGFS
UND
GLUKAGON
FUER
DIE
PATHOGENESE
DES
DIABETES
MELLITUS
25
1.5
FRAGESTELLUNG
28
2
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1
ZELLINIE
29
2.1.1
GLUKAGON
PRODUZIERENDE
INR1-G9
ZELLEN
29
2.1.2
KULTIVIERUNG
DER
INR1-G9
ZELLEN
31
2.1.3
LOESUNGEN
UND
SUBSTANZEN
31
2.2
BINDUNGSSTUDIEN
MIT
INTAKTEN
ZELLEN
32
2.2.1
VERSUCHSDURCHFUHRUNG
32
2.2.2
AUSWERTUNG
DER
BINDUNGSSTUDIEN
33
2.2.3
LOESUNGEN
UND
SUBSTANZEN
34
2.3
PROGLUKAGON
GEN
TRANSKRIPTION
(
"CAT
ASSAY"
)
35
2.3.1
TRANSFEKTION
VON
INR1-G9
ZELLEN
36
2.3.2
STIMULATION
DER
TRANSFIZIERTEN
INR1-G9
ZELLEN
38
2.3.3
"CAT
-
ASSAY"
ZUR
MESSUNG
DER
REPORTER-
GEN
AKTIVITAET
38
2.3.4
AUSWERTUNG
DES
"CAT
ASSAY"
39
2
3.5
LOESUNGEN
UND
SUBSTANZEN
39
2.3.6
NORMALISIERUNG
DER
DATEN
UND
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
40
2.4
METHODE
ZUM
NACHWEIS
UND
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
DER
PROGIUKAGON
MRNS
(
"NORTHERN
BLOT"
)
40
2.4.1
ISOLIERUNG
DER
GESAMT-RNS
AUS
DEN
INR1-G9
ZELLEN
41
2.4.2
QUANTIFIZIEREN
DER
RNS
UND
BEURTEILUNG
DER
RNS
QUALITAET
42
2.4.3
ELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
IM
AGAROSEGEL
43
2.4.4
TRANSFER
DER
RNS
AUF
EINE
NYLONMEMBRAN
(
"BLOTTEN"
)
44
2.4.5
FIXIERUNG
DER
RNS
MIT
UV-LICHT
(
"CROSS-LINKING"
)
45
2.4.6
ANFAERBUNG
DER
RNS-BANDEN
MIT
METHYLENBLAU
45
2.4.7
PROGLUKAGON
CDNS
SONDE
45
2.4.8
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
DER
PROGLUKAGON
CDNS
(
"LABELING"
)
46
2.4.9
HYBRIDISIERUNG
47
2.4.10
WASCHEN
DER
MEMBRAN
MIT
ANSTEIGENDER
STRINGENZ
47
2.4.11
INDIREKTE
AUTORADIOGRAPHIE
UND
DENSITOMETRIE
48
2.4.12
WIEDERHOLTE
HYBRIDISIERUNG
48
2.4.13
28S
RRNS
LABELING
48
2.4.14
LOESUNGEN
UND
SUBSTANZEN
49
2.S
RADIOIMMUNOLOGISCHE
MESSUNG
DER
GLUKAGON
FREISETZUNG
(
"RIA."
)
51
2.5.1
PROBENVORBEREITUNG
51
2.5.2
VERSUCHSDURCHFUHRUNG
52
2.5.3
AUSWERTUNG
DES
GLUKAGON
RIA
53
2.5.4
LOESUNGEN
UND
SUBSTANZEN
54
2.6
3
H
THYMIDINEINBAU
55
2
6.1
VERSUCHSDURCHFUHRUNG
55
2.6.2
LOESUNGEN
UND
SUBSTANZEN
55
2.6.3
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
55
3
ERGEBNISSE
3.1
EXPRESSION
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
IGF-1
-
UND
IGF
II
REZEPTOREN
AUF
KLONALEN
GLUKAGON
SEZEMIERENDEN
ZELLEN
56
3.1.1
REZEPTOR-
BINDUNGSSTUDIEN
56
A.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR-1
56
B.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR
II
*
59
3.1.2
ANZAHL
DER
REZEPTORBINDUNGSSTELLEN
PRO
ZELLE
61
3.2
NACHWEIS
DER
FUNKTIONELLEN
BEDEUTUNG
VON
IGF-1
UND
IGF
H
AUF
DIE
INSELZELLFUNKTION
DES
ENDOKRINEN
PANKREAS
62
3.2.1
REGULATION
DER
PROGLUKAGON
GEN
TRANSKRIPTION
(
"CAT
ASSAY"
)
62
A.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR-1
62
B.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR
II
65
3.2.2
REGULATION
DER
GLUKAGON
GEN
EXPRESSION
AUF
DER
EBENE
DER
PROGLUKAGON
THRNS
(
"NORTHERN
BLOT"
)
67
A.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR-1
69
B.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR
II
72
3.2.3
EINFLUSS
VON
IGF-1
UND
IGF
II
AUF
DIE
GLUKAGONSEKRETION
(
"RIA"
)
A.
INSULIN
LIKE
GROWTH FACTOR-1
B.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR
II
73
73
75
3.3
REGULATION
DER
DNS
SYNTHESE
DER
INR1-G9
ZELLEN
DURCH
IGF-1
UND
IGF
D
76
3.3.1
3
H
THYMIDINEINBAU
A.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR-1
B.
INSULIN
LIKE
GROWTH
FACTOR
II
76
76
77
4
DISKUSSION
4.1
NACHWEIS
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
IGF-1
UND
IGF
II
REZEPTOREN
4.2
PROGLUKAGON
GEN
EXPRESSION
4.3
GLUKAGONSEKRETION
4.4
MITOGENE
EIGENSCHAFTEN
VON
IGF-1
UND
IGF
II
AN
DEN
INR1-G9
ZELLEN
4.5
BEDEUTUNG
DER
ERGEBNISSE
FIIR
DEN
DIABETES
MELLITUS
78
82
85
87
88
5
ZUSAMMENFASSUNG
90
6
LITERATURVERZEICHNIS
92
ABBILDUNGS
UND
TABELLENVERZEICHNIS
LEBENSLAUF
PUBLIKATIONEN
ERKLAERUNG
VERZEICHNIS
DER
HOCHSCHULLEHRER
DANKSAGUNG |
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