Analyse von Drift- und Diffusionsbewegungen einzelner Moleküle in Lösung mittels laserinduzierter Fluoreszenz:
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Veröffentlicht: |
1999
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INHALT SVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
2 THEORIE DER MESSUNGEN 5
2.1 SPEKTROSKOPISCHE GRUNDLAGEN.
5
2.1.1 PHOTOPHYSIKALISCHE UND -CHEMISCHE PROZESSE. 7
2.2 FLUORESZENZMESSUNG AN BIOPOLYMEREN. 9
2.2.1 GRUNDLEGENDE ASPEKTE.
9
2.2.2 INTERKALATION IN NUKLEINSAEUREN. 10
2.2.3 MARKIERUNG. 11
2.2.4 EINZELMOLEKUELNACHWEIS IN VERMEHRUNGSREAKTIONEN. 11
2.3 STREULICHT UND HINTERGRUND. 14
2.3.1 RAYLEIGH- UND RAMANSTREUUNG. 14
2.3.2 AUTOFLUORESZENZ. 15
2.3.3 SIGNAL-ZU-HINT ERGRUEND-VERHAELTNIS R
S/H
. 15
2.4 DIFFUSIONS- UND DRIFTBEWEGUNGEN . 15
2.4.1 DIFFUSION.
15
2.4.2 MESSUNG VON DIFFUSIONSKONSTANTEN. 17
2.4.3 FLUORESZENZ-KORRELATIONS-SPEKTROSKOPIE. 17
2.4.4 STROEMUNGEN VON FLUESSIGKEITEN. 19
2.4.5 HAGEN-POISEUILLESCHES GESETZ. 20
3 MATERIAL UND METHODEN 21
3.1 FLUOROPHORE UND LOESUNGSMITTEL. 21
3.2 GRENZEN DER NULLDIMENSIONALEN KONFOKALEN MIKROSKOPIE. 25
3.3 MOEGLICHKEITEN DES RAEUMLICH AUFGELOESTEN EINZELMOLEKUELNACHWEISES. 26
3.3.1 VIDEOMIKROSKOPIE. 27
L
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.3.2 WEITERE RAEUMLICH AUFGELOESTE NACHWEISMETHODEN
28
4 EXPERIMENTELLER AUFBAU 30
4.1 LASERSYSTEM. 32
4.1.1 PULSBETRIEB DES ARGON-IONEN-LASERSSYSTEM. 32
4.2 LASERMIKROSKOP UND OPTIKEN. 33
4.2.1 KONFOKALE MIKROSKOPIE. 33
4.2.2 LICHTSAMMLUNGSEFFIZIENZ. 34
4.2.3 SCHAERFENTIEFE UND NACHWEISVOLUMEN. 35
4.2.4 OPTIK ZWISCHEN STRAHLTEILER UND DETEKTOR. 37
4.2.5 ABSCHAETZUNG DER OPTIMALEN ANREGUNGSLEISTUNG. 38
4.3 PROBENBEHAELTER UND MIKROSTRUKTUREN.~. 38
4.4 MODULIERBARER BILDVERSTAERKER. 40
4.4.1 AUFBAU DES BILDVERSTAERKERN. 40
4.4.2 MODULATION DES BILDVERSTAERKERS. 44
4.4.3 MESSUNGEN VON EIGENSCHAFTEN DES BILDVERSTAERKERS. 46
4.5 DETEKTOREN. 48
4.5.1 DETEKTOREN FUER NULLDIMENSIONALE MESSUNGEN . 48
4.5.2 DETEKTOREN FUER VIDEOMIKROSKOPIE. 49
4.5.3 SILIZIUM-MIKROSTREIFENDETEKTOR. 49
4.5.3.1 SIGNALAUFBEREITUNG. 52
4.6 KONFIGURIERBARER PARALLELER HARDWARE-ANALYSATOR (KPHA). 52
4.6.1 HARDWARE-UEBERBLICK . 52
4.6.2 DAS XILINX FPGA XC4000 . 54
4.6.3 SCHEMATISCHER SCHALTUNGSENTWURF. 54
4.6.4 HARDWAREARCHITEKTUR UND DATENFLUSS. 55
4.6.5 SCHALTUNGSENTWICKLUNG. 55
4.6.5.1 SCHEMATISCHER UEBERBLICK. 55
4.6.5.2 MULTI-KANAL-ANALYSATOR-SCHALTUNG (MKA-SCHALTUNG) . 58
4.6.5.3 SIMULATIONSSCHALTUNG. 59
4.6.5.4 RAUM-ZEIT-FILTER UEBER 128X128 KANAELE. 60
4.6.6 SOFTWAREBESCHREIBUNG. 61
U
5 SIMULATIONEN 62
5.1 NULLDIMENSIONALES MODELL . 62
5.1.1 ERGEBNISSE AUS DEM NULLDIMENSIONALEN MODELL. 66
5.2 ZWEIDIMENSIONALE SIMULATIONEN MIT
HARDWARE-SCHALTUNG . 70
5.2.1 VORAUSSETZUNGEN FUER ZWEIDIMENSIONALE SIMUELATIONEN. 70
5.2.2 ERGEBNISSE DER ZWEIDIMENSIONALEN SIMULATIONEN. 71
6 ERGEBNISSE 74
6.1 MESSUNGEN MIT NULLDIMENSIONALEN AUFBAU . 74
6.2 VIDEOMIKROSKOPIE. 80
6.2.1 DIFFUSIONSMESSUNG .
. . 81
6.2.2 FLUSSMESSUNG . 83
6.3 MESSUNGEN MIT ENTWICKELTEM ZWEIDIMENSIONALEN
DETEKTORSYSTEM. 89
7 ZUSAMMENFASSUNG UND DISKUSSION 96
7.1 KRITIK, VERBESSERUNGEN UND AUSBLICK. 98
8 ANHANG XI
III |
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