Zell- und Gewebekultur: Einführung in die Grundlagen sowie ausgewählte Methoden und Anwendungen
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Heidelberg [u.a.]
Spektrum, Akad. Verl.
2000
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| Ausgabe: | 4., überarb. und erw. Aufl. |
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| adam_text | HHInhalt Vorwort V
1 Räumliche und apparative Voraussetzungen, Sicherheitsvorschriften 1
1.1 Der Reinigungsbereich 1
1.2 Der Vorbereitungs und Verarbeitungsbereich 2
1.3 Der Sterilbereich 3
1.4 Sicherheitsvorschriften und Entsorgung 15
1.5 Literatur 18
2 Kulturgefäße und ihre Behandlung 20
2.1 Züchtung von Zellen auf Glas 20
2.2 Züchtung von Zellen auf Plastikmaterial 21
2.3 Züchtung von Zellen auf anderen Materialien 25
2.4 Spezielle Kulturgefäße 25
2.5 Reinigung und Vorbehandlung von Glaswaren 29
2.6 Vorbehandlung von Kulturgefäßen mit Substanzen zur Modifizierung der
Oberflächeneigenschaften 33
3 Steriltechnik Kontaminationen 36
3.1 Der Sterilbereich 37
3.2 Laborreinigung 38
3.3 Hygiene 38
3.4 Aseptische Arbeitstechnik 38
3.5 Sterilisationsverfahren 42
3.6 Antibiotika 54
3.7 Mycoplasmen 56
3.8 Kreuzkontaminationen 67
3.9 Literatur 68
4 Zellkulturmedien 69
4.1 Herstellung gebrauchsfertiger Medien 69
4.2 Anmerkungen zu einigen Rezepturen 73
4.3 Serumfreie Medien 77
4.4 Zusätze zu Medien 81
4.5 Wasser zur Herstellung von Lösungen und für die Reinigung 88
4.6 Literatur 92
5 Routinemethoden zur allgemeinen Handhabung und Subkultivierung von
Zellen 94
5.1 Mediumwechsel 94
5.2 Subkultivierung von Monolayerkulturen 97
5.3 Subkultivierung von Suspensionskulturen 102
5.4 Zellzahlbestimmung 102
5.5 Langzeitlagerung und Kryokonservierung von Zellen 108
5.6 Literatur 111
HU Inhalt 6 Primärkulturen 114
6.1 Kultivierung von Herzmuskelzellen des Hühnchens 115
6.2 Kultivierung von Herzmuskelzellen aus neonatalen Rattenherzen 117
6.3 Primärkulturen aus frischen Hautproben (Biopsien) menschlichen Ursprungs 118
6.4 Isolierung von Lymphocyten aus Vollblut mittels Dichtegradienten
zentrifugation 119
6.5 Primärkulturen aus Mäusecerebellum (Kleinhirn) 121
6.6 Gewinnung einer Zellkultur aus soliden Humantumoren 122
6.7 Literatur 125
7 Organkulturen 126
7.1 Präparation eines Säugerdünndarms als Beispiel für eine Organpräparation in der
Pharmakologie 129
7.2 Präparation eines peripheren Nerven (oberes Halsganglion) zur Messung der neu¬
ronalen Übertragung (Neurotransmission) 131
7.3 Leberschnitte in vitro 133
7.4 Literatur 136
8 Kultur spezieller Zelltypen 137
8.1 Hybridomzellen 137
8.2 Hepatocyten 147
8.3 Phäochromocytomzellen PC 12 151
8.4 Endothelzellen 152
8.5 Dreidimensionale Zellkultur 157
8.6 Kultur spezieller Zelltypen 159
8.7 Literatur 165
9 Die Massenkultur 167
9.1 Monolayer Kulturen für große Zellmengen 168
9.2 Suspensionskultur für große Zellmengen 173
9.3 Literatur 182
10 Zellkulturen aus Geweben von Invertebraten und kaltblütigen
Vertebraten 176
10.1 Invertebraten 176
10.2 Kaltblütige Vertebraten 180
10.3 Literatur 181
11 Pflanzenzellkulturen 183
11.1 Lösungen und Medien 183
11.2 Kalluskultur aus teilungsfähigem Pflanzengewebe 187
11.3 Pflanzenzellkulturen als Suspensionskulturen 191
11.4 Isolierung von Einzelzellen und Protoplasten aus Pflanzenzellkulturen 192
11.5 Elektrofusion von Pflanzenpro toplasten 194
11.6 Fusion von Protoplasten mittels Polyethylenglycol 194
11.7 Antherenkultur 197
11.8 Embryonenkultur 200
11.9 Einfrieren von Pflanzenzellsuspensionen 201
11.10 Literatur 203
12 Spezielle Methoden der Zellbiologie 204
12.1 Versuche zur in vitro Toxizität 204
12.2 Methoden zur In vitro Toxizitätsprüfung 210
12.3 Transfektion 218
Inhalt m
12.4 Klonierung 223
12.5 3H Thymidineinbau als Proliferationskontrolle 226
12.6 Inhibition des Zellwachstums (quantitative Neutralrotmethode) 228
12.7 Ermittlung der Anheftungseffizienz („plating efficiency ) 229
12.8 Virusvermehrung und Transformation mit Epstein Barr Viren (EBV) 230
12.9 Populationsverdopplungszeit 232
12.10 Zellsynchronisation 233
12.11 Cytometrie 236
12.12 Chromosomenpräparation 244
12.13 Literatur 245
13 Kleines Zeil und Gewebekulturlexikon 247
13.1 Literatur 260
14 Lieferfirmen und Hersteller 261
15 Anhang 268
15.1 Was kann die Ursache von schlechtem Zellwachstum sein? 268
15.2 Berechnungen in der Zellkultur 269
15.3 Nachschlagewerke und Handbücher der Zeil und Gewebekultur 272
15.4 Zeitschriften 273
15.5 Literaturdienst 274
15.6 Institutionen und Firmen, die Zellkulturkurse durchführen 274
15.7 Wissenschaftliche Gesellschaften für Zellkultur 274
15.8 Übersichtswerke zur Beschaffung von Geräten, Labormaterial und
Reagenzien 275
Index 276
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