Expressionskartierung des menschlichen Chromosoms 11p13:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1999
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| Beschreibung: | Zsfassung in engl. Sprache. - Würzburg, Univ., Diss., 1999. - Auch als CD-Rom-Ausg. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
1 ZUSAMMENFASSUNG.3
SUMMARY.4
2 EINLEITUNG.5
2.1 DAS YYHUMAN GENOME PROJECT*.5
2.2 ERSTELLEN VON KARTEN.5
2.3 CHROMOSOM 11- EIN KURZER UEBERBLICK.6
2.4 DIE REGION 11P1 3.7
2.4.1 BISHERIGE KARTEN.7
2.4.2 KARTIERTE GENE.7
2.4.3 CHROMOSOMALE ABERRATIONEN.;.
11
2.5 ZIEL DER ARBEIT.12
3 MATERIAL.13
3.1 OLIGONUKLEOTIDE.13
3.2 VEKTOREN.13
3.3 EST-MARKER, GENOMISCHE MARKER, ANONYME CDNA-PROBEN.14
3.4 KLON-BANKEN.15
3.5 ENZYME, KITS.15
3.6 CHEMIKALIEN.15
3.7 MEMBRANEN UND FILME.VI.16
3.8 SOFTWARE.16
4 METHODEN.17
4.1 ISOLIERUNG VON DNA.17
4.1.1 ISOLIERUNG VON PLASMID-DNA NACH DER YYRAPID-BOILING-METHODE".17
4.1.2 ISOLIERUNG VON DNA AUS PAC-KLONEN.17
4.1.3 ISOLIERUNG VON PLASMID-DNA DURCH YYALKALISCHE LYSE".17
4.1.4 ISOLIERUNG VON DNA UEBER SAEULEN.18
4.1.5 ISOLIERUNG VON YAC-DNA AUS HEFEZELLEN.18
4.1.6 ISOLIERUNG GENOMISCHER DNA AUS PLAZENTA.19
4.1.7 AUFREINIGUNG VON DNA AUS AGAROSEGELEN.19
4.2 ISOLIERUNG VON RNA .19
4.2.1 PRAEPARATION VON GESAMT-RNA AUS GEWEBEN.19
4.2.2 PRAEPARATION VON GESAMT-RNA AUS ZELLEN.20
4.3 KONZENTRATIONSBESTIMMUNG VON NUKLEINSAEUREN.20
4.4 PCR-TECHNIKEN.20
4.4.1 KONVENTIONELLE PCR.I.20
4.4.2 ALU-PCR.21
4.4.3 ISOLIERUNG VON ENDPROBEN.21
4.5. GELELEKTROPHORESEN.23
4.5.1 DNA-AGAROSEGELELEKTROPHORESE.23
4.5.2 RNA-AGAROSEGELELEKTROPHORESE.24
4.6 TRANSFER VON NUKLEINSAEUREN AUF NYLONMEMBRANEN.24
4.6.1 SOUTHERN BLOTTING.24
4.6.2 NORTHERN BLOTTING.24
4.6.3 HERSTELLUNG VON KOLONIEFILTEM.25
4.7 RADIOAKTIVE MARKIERUNG VON DNA.25
4.8 HYBRIDISIERUNG.25
4.8.1 FILTERHYBRIDISIERUNG.25
4.8.2 HYBRIDISIERUNG VON AGAROSEGELEN .26
4.9 KLONIERUNGSTECHNIKEN.26
4.9.1 RESTRIKTIONSVERDAU.26
4.9.2 LIGATION.26
4.9.3. TRANSFORMATION.27
4.9.4 HERSTELLUNG KOMPETENTER ZELLEN.27
4.10 ZELLKULTURTECHNIKEN.27
4.10.1 KULTIVIERUNG.27
4.10.2 TRANSFEKTION.27
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/958677433
INHALTSVERZEICHNIS
2
4.11
EXONTRAPPING.
4.12
SEQUENZIERUNG.
4.13
SEQUENZANALYSEN.
4.14
IN SITU HYBRIDISIERUNG.
4.14.1 HERSTELLUNG DER RNA-PROBE.
4.14.2 IN SITU HYBRIDISIERUNG AUF SCHNITTE.
4.14.3 WHOLE MOUNT IN SITU HYBRIDISIERUNG.
4.14.4 GELATINE/ALBUMIN-EINBETTUNG VON EMBRYONEN UND VIBRATOMSCHNITTE.
28
29
29
29
29
30
32
33
5 ERGEBNISSE
. 34
5.1
ERGEBNISSE AUS DEM PAC-KLONBANKEN SCREENING
.34
5.2
ERSTELLUNG DES PAC-CONTIGS
.36
5.2.1 HYBRIDISIERUNGEN AUF KOLONIEFILTER.'.36
5.2.2 HYBRIDISIERUNGEN AUF SOUTHERN BLOTS.37
5.2.3 IDENTIFIZIERUNG NEUER PAC-KLONE MIT PAC-ENDPROBEN.39
5.2.4 BESTIMMUNG DER INSERTGROESSE DER PAC-KLONE.40
5.2.5 ERSTELLUNG DES SEQUENZIERFERTIGEN 4,5 MB PAC-CONTIGS.41
5.2.6 GENAUE LOKALISATION BEKANNTER GENE MIT HILFE DES PAC-CONTIGS.43
5.3
ERGEBNISSE AUS DEM EXONTRAPPING
.43
5.3.1 PRINZIP DES EXONTRAPPINGS.43
5.3.2 ANALYSE DER KLONE AUS DEM EXONTRAPPING.44
5.3.3 BESCHREIBUNG DER IDENTIFIZIERTEN EXONS.45
5.3.4 NORTHERN BLOT ANALYSEN.;.49
5.3.5 CHARAKTERISIERUNG DURCH IN SITU HYBRIDISIERUNGEN.51
5.4
ERGEBNISSE AUS DEN SEQUENZANALYSEN
.53
5.4.1 DATENBANKVERGLEICHE.53
5.4.2 NORTHERN BLOT ANALYSEN.60
5.4.3 CHARAKTERISIERUNG DURCH IN SITU HYBRIDISIERUNGEN.61
6 DISKUSSION.62
7 LITERATURVERZEICHNIS
69
8. ANHANG.79
8.1
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.79
8.2 INTERNETADRESSEN.80 |
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