Endothelialisierung biologischer Herzklappenprothesen:
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1999
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1
INHALT
1
INHALT
.
3
2
EINLEITUNG
.
6
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
9
3.1
ENDOTHELZELLKULTUREN
.9
3.1.1
KULTIVATIONSBEDINGUNGEN
.
9
3.
1
.2
ENDOTHELZELLISOLIERUNG
.
1
0
3.1.3
ENDOTHELZELLGEWINNUNG
.
II
3.1.4
KULTIVIERUNG
.
12
3.1.5
SUBKULTIVIERUNG
.
12
3.1.6
ROUTINEANALYTIK
.
13
3.1.6.1
ZELLMORPHOLOGIE
.
13
3.
1
.6.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
ZELLEN
.
1
3
3.1.7
IMMUNHISTOCHEMISCHER
FAKTOR-VIII-NACHWEIS
.
1
5
3.2
KULTIVIERUNG
DER
SUBKULTUREN
MIT
DEM
WACHSTUMSFAKTOR
B-FGF
.
13
3.2.1
QUANTIFIZIERUNG
DER
ZELLPROLIFERATION
DURCH
3
H*THYMIDINEINBAU
.
16
3.2.2
LICHTMIKROSKOPISCHE
AUSWERTUNG
.
17
3.3
ENDOTHELIALISIERUNG
.
17
3.3.1
FIXATION
VON
SCHWEINEPERIKARD
.
17
3.3.2
AUFBEREITUNG
UND
KRYOKONSERVIERUNG
DER
ALLOGRAFTS
.
17
3.3.3
ENTTOXIFIKATIONSVERFAHREN
.
18
3.3.4
ENDOTHELIALISIERUNG
DER
PRAEPARATE.
18
3.3.4.1
FLAECHIGE
PRAEPARATE
.
18
3.3.4.2
RAEUMLICHE
PRAEPARATE
.
.
.
20
3.4
IMPLANTATION
VON
AUTOLOG
ENDOTHELIALISIERTEN
HERZKLAPPEN
IM
TIERMODELL
.
20
3.5
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
21
3.6
HISTOLOGIE
.
22
3.7
PROSTACYCLINMESSUNGEN
.
22
3.8
STATISTISCHE
METHODEN
.
23
4
ERGEBNISSE
.
24
4.1
PATIENTENDATEN
.
24
4.2
ZELLMORPHOLOGIE
UND
WACHSTUMSVERHALTEN
DER
ENDOTHELZELLKULTUREN
.
25
4.2.1
DESKRIPTIVE
MORPHOLOGISCHE
BEURTEILUNG
(LICHTMIKROSKOP)
.
25
4.2.1.1
PRIMAERKULTUREN
.
25
4.2.1.2
SEKUNDAERKULTUREN
.
25
4.2.2
QUANTITATIVE
BEURTEILUNG
.
27
4.2.2.1
KRISTALLVIOLETTZAEHLUNG
.
27
4.2.2.2
PRIMAERKULTUREN
IN
6-LOCHGEWEBEKULTURPLATTEN
.
27
4.2.2.3
PASSAGIERTE
ENDOTHELZELLEN
IN
165-CM
2
-KULTURFLASCHEN
.
29
4.2.3
IMMUNHISTOCHEMISCHE
FAKTOR-VILL-FAERBUNGEN
.
30
4.3
EINFLUSS
VON
B-FGF
AUF
DIE
PROLIFERATION
DER
ENDOTHELZELLEN
.
32
4.3.
1
QUANTIFIZIERUNG
DER
PROLIFERATION
DURCH
3
H-THYMIDINEINBAU
.32
4.3.2
QUANTIFIZIERUNG
DER
PROLIFERATION
UND
BEURTEILUNG
DER
MORPHOLOGIE
DURCH
LICHTMIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.38
4.3.3
MORPHOLOGIE
.
46
4.4
ENDOTHELIALISIERUNG
VON
BIOLOGISCHEN HERZKLAPPENPROTHESEN
.
47
4.4.
1
ENDOTHELZELLWACHSTUM
AUF
GLUTARALDEHYDFIXIERTEM
SCHWEINEPERIKARD
.
47
4.4.1.1
KULTIVIERUNG
VON
ENDOTHELZELLEN
UNTER
DEM
ZUSATZ
VON
ECGS
.
47
4.4.1.2
KULTIVIERUNG
DER
ENDOTHELZELLEN
UNTER
DEM
ZUSATZ
VON
B-FGF
.
49
4.4.2
ENDOTHELZELLWACHSTUM
AUF
DEN
KLAPPENSEGELN
VON
HANCOCKBIOPROTHESEN
.
50
4.4.2.1
KULTIVIERUNG
DER
ENDOTHELZELLEN
UNTER
DEM
ZUSATZ
VON
ECGS
.
50
4.4.2.2
KULTIVIERUNG
DER
ENDOTHELZELLEN
UNTER
DEM
ZUSATZ
VON
B-FGF
.
52
4.4.3
ENDOTHELIALISIERUNG
VON
BIOLOGISCHEN
HERZKLAPPENPROTHESEN
.
53
4.5
MORPHOLOGIE
DER
IM
TIERMODELL
IMPLANTIERTEN
HERZKLAPPEN
.
55
4.5.1
MORPHOLOGIE
DER
ENDOTHEHALISIERTEN
PROTHESEN
NACH
DURCHGEFILHRTER
IMPLANTATION
.
55
4.5.2
MORPHOLOGIE
NICHT
ENDOTHELIALISIERTER
IMPLANTIERTER
PROTHESEN
.59
4
6
NACHWEIS
DER
PROLIFERATION
SOWIE
DER
STOFFWECHSELAKTIVITAET
VON
TRANSPLANTIERTEN
ENDOTHELZELLEN
.
60
*
*
1
3
H-THYMIDINEINBAU
.
60
4.6.2
PROSTACYCLINMESSUNG
.
61
5
DISKUSSION
.
62
5.
1
ISOLIERUNG
UND
KULTIVIERUNG
VON
ENDOTHELZELLEN
ALS
VORAUSSETZUNG
FUER
EINE
ERFOLGREICHE
ENDOTHELIALISIERUNG
.
62
5.2
B-FGF
.
65
5.2.
1
OPTIMIERUNG
DER
ENDOTHELZELLKULTIVIERUNG
DURCH
DEN
WACHSTUMSFAKTOR
B-FGF
.65
5.2.2
EINFLUSS
VON
B-FGF
AUF
DIE
ENDOTHELIALISIERUNG
.
67
5.3
ENDOTHELIALISIERUNG
.
67
5.3.1
EINFLUSS
DER
FIXATION
AUF
DIE
ENDOTHELIALISIERUNG
.
67
5.3.2
EINFLUSS
DER
ENTTOXIFIKATIONSLOESUNG
AUF
DIE
ENDOTHELIALISIERUNG
.
68
5.3.3
ENDOTHELIALISIERUNG
VON
GLUTARALDEHYDFLXIERTEM
PERIKARD
UND
KOMMERZIELLEN
HERZKLAPPENSEGELN
.
70
5.3.4
ENDOTHELIALISIERUNG
VON
GLUTARALDEHYDFLXIERTEN
XENOGRAFTS
UND
ANTIBIOTIKAVORBEHANDELTEN,
KRYOKONSERVIERTEN
ALLOGRAFTS
.
71
5.3.5
IN-VITRO-ENDOTHELIALISIERUNG
UND
SPONTANE
ENDOTHELIALISIERUNG
.74
5.4
TIERMODELL
.
75
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
78
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
.
.
80
8
DANKSAGUNG
.
100
9
CURRICULUM
VITAE
.
101 |
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