WHO-Laborhandbuch zur Untersuchung des menschlichen Ejakulates und der Spermien-Zervikalschleim-Interaktion:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German English |
| Veröffentlicht: |
Berlin [u.a.]
Springer
1999
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| Ausgabe: | 4. Aufl. |
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| Beschreibung: | XI, 138 S. Ill., graph. Darst. |
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| adam_text | Inhaltsverzeichnis
1 Einleitung 1
2 Gewinnung und Untersuchung des menschlichen
Ejakulates 5
2.A Standardverfahren 5
2.1 Gewinnung und Transport der Ejakulatprobe 5
2.2 Sicherheitsvorkehrungen beim Umgang mit Proben . 7
2.3 Erste makroskopische Untersuchung 7
2.3.1 Liquefizierung (Verflüssigung) 7
2.3.2 Aussehen 8
2.3.3 Volumen 8
2.3.4 Konsistenz 8
2.3.5 pH Wert 9
2.4 Erste mikroskopische Untersuchung 9
2.4.1 Aufbereitung zur routinemäßigen Samenanalyse .... 9
2.4.2 Vorläufige Bestimmung der Spermienkonzentration . 10
2.4.3 Klassifikation der Spermienmotilität 11
2.4.4 Zelluläre Elemente außer Spermien 13
2.4.5 Agglutinationen 16
2.5 Weitere mikroskopische Untersuchungen 17
2.5.1 Lebensfähigkeit der Spermien durch
Farbausschluß/Vitalfärbung 17
2.5.2 Messung der Spermienkonzentration 17
2.5.3 Beurteilung der Spermienmorphologie 20
2.5.4 Klassifizierung der Spermienmorphologie 22
2.5.5 Durchführung der Morphologieanalyse 31
2.6 Testung auf membrangebundene Spermienantikörper 31
2.6.1 Immunobead Test 31
2.6.2 MAR Test ( mixed antiglobulin reaction test ) 32
2.B Fakultative Tests 33
2.7 Errechnung des Index vielfacher Spermiendefekte ... 33
2.8 Hypoosmotischer Schwelltest (HOS Test) 34
2.9 Ejakulatkultur 34
2.10 Biochemische Marker für die Funktion
der akzessorischen Drüsen 34
2.10.1 Sekretorische Kapazität der Prostata 35
VIII Inhaltsverzeichnis
2.10.2 Sekretorische Kapazität der Samenblasen 35
2.10.3 Sekretorische Kapazität des Nebenhodens 35
2.11 Computer assistierte Spermienanalyse (CASA) 35
2.12 Zona freier Hamsteroozytenpenetrationstest 36
2.C Tests für Forschungszwecke 37
2.13 Spermienfunktionstests 37
2.13.1 Die Bedeutung freier Sauerstoffradikale
für die männliche Fertilität 37
2.13.2 Humaner Zona pellucida Bindungstest 38
2.13.3 Beurteilung der Akrosomreaktion 38
2.14 Computer assistierte Spermienanalyse: Morphologie 39
3 Spermienpräparationstechniken 41
4 Qualitätskontrolle im Andrologielabor 43
4.1 Einleitung 43
4.2 Fehler bei Bestimmungen 43
4.2.1 Statistische Zählfehler bei der Spermienanalyse 44
4.2.2 Weitere Fehler bei der Spermienanalyse 45
4.2.3 Bedeutung der Qualitätskontrolle (QK) 46
4.3 Praktische Ansätze bei der Qualitätskontrolle 46
4.3.1 Routineüberwachung und Korrelation
der Ergebnisse innerhalb der Proben 47
4.3.2 Wöchentliche interne Qualitätskontrolle:
Beurteilung der Präzision einer (Intra MTA Präzision)
und mehrerer MTAs (Inter MTA Präzision) 48
4.4 Ermittlung der monatlichen Mittelwerte 58
4.5 Reaktion auf Ergebnisse außerhalb d. Kontrollgrenzen 58
4.6 Externe Qualitätskontrolle (EQK) 59
5 Spermien Mukus Interaktion 61
5.1 Einleitung 61
5.2 Gewinnung und Konservierung des Zervixsekretes .. 64
5.2.1 Gewinnung 64
5.2.2 Lagerung und Konservierung 64
5.3 Bewertung des Zervikalsekretes 65
5.3.1 Volumen 65
5.3.2 Konsistenz 65
5.3.3 Farnkrautbildung 66
5.3.4 Spinnbarkeit 66
5.3.5 Zelluläre Bestandteile 66
5.3.6 pH Wert 67
5 4 Spermien Mukus Interaktion 67
5.4.1 In vivo Test (Postkoitaltest) 68
5.4.2 In vitro Untersuchungen 69
Inhaltsverzeichnis IX
Anhang
LA Referenzwerte der Ejakulatparameter 73
I.B Nomenklatur einiger Ejakulatparameter 75
II Sicherheitsrichtlinien für das Andrologielabor 76
III Methoden zum Leukozytennachweis 78
111.1 Peroxidasefärbung mit Ortho Toluidin Blau 78
111.1.1 Reagenzien 78
111.1.2 Durchführung 78
111.2 Immunozytochemie 79
111.2.1 Reagenzien 79
111.2.2 Zellpräparation 80
IV Supravitalfärbungen 82
IV.i Eosin allein 82
IV.1.1 Reagenzien 82
IV.1.2 Durchführung 82
IV.2 Eosin Nigrosin (modifizierte Blom Technik) 82
IV.2.1 Reagenzien 82
IV.2.2 Durchführung 82
IV.3 Hypoosmotischer Spermienschwelltest (HOS Test) .. 83
IV.3.1 Schwell Lösung 83
IV.3.2 Durchführung 83
IV.3.3 Beurteilung der Ergebnisse 83
IV.3.4 Qualitätskontrolle 84
V Für Spermien modifizierte Papanicolaou Färbung ... 85
V.i Vorbereitung der Proben 85
V.2 Durchführung der Färbung 86
V.3 Herstellung der Farblösungen 87
V.3.1 Bestandteile von EA 36, zu EA 50 äquivalent 87
V.3.2 Bestandteile von Orange G6 88
V.3.3 Bestandteile von Hämatoxylin nach Harris
ohne Essigsäure 88
V.3.4 Bestandteile der Scott s Lösung 89
V.3.5 Bestandteile der angesäuerten Äthanol Lösung 89
VI Shorr Färbung für Spermien Morphologie 90
VI.1 Herstellung des Ausstriches 90
VI.2 Färbevorschrift 90
VI.3 Reagenzien 90
VII Schnellfärbeverfahren für Spermienmorphologie .... 91
VII.1 Reagenzien 91
VII.2 Durchführung 91
X Inhaltsverzeichnis
VIII Immunobead Test 92
VIII.i Reagenzien 92
VIII.2 Durchführung 92
VIII.3 Indirekter Immunobead Test 94
VIII.4 Kontrollen 94
IX Gemischter Antiglobulin Test 95
IX.i Durchführung 95
IX.2 Interpretation 95
X Bestimmung von Zink im Seminalplasma 96
X.i Allgemeines 96
X.2 Prinzip 96
X.3 Reagenzien 96
X.4 Durchführung 96
X.5 Kalkulation 97
X.6 Referenzwert 97
XI Bestimmung von Fruktose im Seminalplasma 98
XI.i Allgemeines 98
XI.2 Prinzip 98
XI.3 Reagenzien 98
XI.4 Durchführung 98
XI.5 Berechnung 99
XI.6 Referenzwert 99
XII Bestimmung der neutralen oc Glukosidase
im Seminalplasma 100
XII.1 Allgemeines 100
XII.2 Prinzip 100
XII.3 Reagenzien 100
XII.4 Durchführung 101
XII.5 Berechnung 102
XII.6 Referenzwert 102
XIII Anweisung und Befundbogen für
Ejakulatuntersuchungen 103
XIII.A Anweisung zur Gewinnung und Übergabe
einer Samenprobe 103
XIII.B Befundbogen für Ejakulatuntersuchungen 103
XIV Computer assistierte Spermienanalyse (CASA) 106
XIV.i Erhältliche Systeme 106
XIV.2 Parametereinstellungen 106
XIV.3 Vorbereitung der Proben 106
XIV.4 Anwendung des CASA Gerätes 107
Inhaltsverzeichnis XI
XIV.5 CASA Terminologie 107
XIV.6 Statistische Auswertung 109
XV Protokolle für den Hamsterovumpenetrationstest ... 110
XV.i Standardprotokoll 110
XV.1.1 Durchführung 110
XV.2 Protokoll mit Ca Ionophor (A23187) 111
XV.3 Qualitätskontrolle 113
XVI Bestimmung der freien Sauerstoffradikale
in Spermiensuspensionen 114
XVI.i Protokoll 114
XVII Bestimmung der induzierten Akrosomreaktion 117
XVII.i Auslöser der AR 117
XVII.2 Durchführung 117
XVII.3 Ergebnisse 118
XVII.4 Qualitätskontrolle 118
XVIII Spermienpräparationstechniken 119
XVIII.i Verfahren 119
XVIII.2 Swim up 119
XVIII.3 Diskontinuierliche Percoll Gradienten 120
XVIII.4 Präparation von qualitativ schlechten Ejakulatproben 121
XIX Qualitätskontroll(QK )Verfahren 122
XIX.i QK Proben 122
XIX.2 Material zur QK 122
XIX.3 Eichung von Apparaten 122
XIX.4 Externe Qualitätsbeurteilungsprogramme 123
XX Patientenempfehlung für die Vorbereitung
eines Postkoitaltests 124
XXI Sperma Mukus Interaktion: der Kapillartest 125
XXI.i Material 125
XXI.2 Methode 126
XXI.3 Beurteilung des Testes 126
XXI.3.1 Migrationsstrecke 126
XXI.3.2 Eindringdichte 126
XXI.3.3 Migrationsgradient 127
XXI.3.4 Dauer der progressiven Bewegungen 127
XXII Grundausstattung eines Andrologielabors 128
Literatur 133
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