Einschluß von Gemcitabin (dFdC) in vesikuläre Phospholipidgele: in vivo und in vitro-Untersuchungen zur Stabilität, Pharmakokinetik und antitumoralen Wirksamkeit
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1998
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| Beschreibung: | Freiburg (Breisgau), Univ., Diss., 1998 |
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EINSCHLUSS VON GEMCITABIN (DFDC)
IN VESIKULARE PHOSPHOLIPIDGELE:
IN VIVO UND IN VITRO - UNTERSUCHUNGEN ZUR STABILITAET, PHARMAKOKINETIK
UND ANTITUMORALEN WIRKSAMKEIT
DISSERTATION
DER FAKULTAET FUER CHEMIE UND PHARMAZIE DER ALBERT-LUDWIGS-UNIVERSITAET
FREIBURG ZUR ERLANGUNG DES GRADES EINES DOKTORS DER NATURWISSENSCHAFTEN
1998
VORGELEGT VON
REGINA MOOG
AUS HUEFINGEN
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 THERAPIE VON KREBSERKRANKUNGEN 2
1.1.1 DAS ZYTOSTATIKUM GEMCITABIN (DFDC) 3
1.1.1.1 WIRKUNGSMECHANISMUS 4
1.1.1.2 METABOLISMUS UND ELIMINATION 6
1.1.1.3 KLINISCHER EINSATZ VON DFDC 7
1.1.1.4 PROBLEME BEIM KLINISCHEN EINSATZ VON DFDC 8
1.2 BESONDERHEITEN DER TUMORMORPHOLOGIE 10
1.3 LIPOSOMEN IN DER CHEMOTHERAPIE MALIGNER TUMOREN 12
1.3.1 VORAUSSETZUNGEN UND PROBLEME BEIM EINSATZ KONVENTIONELLER
LIPOSOMEN ALS ARZNEISTOFFTRAEGER FUER HYDROPHILE VERBINDUNGEN 14
1.3.2 VESIKULAERER PHOSPHOLIPIDGELE 15
1.3.2.1 MOEGLICHE KLINISCHE EINSATZGEBIETE FUER VESIKULARE
PHOSPHOLIPIDGELE 16
1.4 AUFGABENSTELLUNG UND ZIELSETZUNG 17
2 MATERIAL UND GERAETE 19
2.1 LIPIDE 19
2.2 EINZUSCHLIESSENDE SUBSTANZEN 19
2.3 VERSUCHSTIERE UND MENSCHLICHES MATERIAL 20
2.4 PUFFER 20
2.5 SONSTIGE REAGENZIEN UND SUBSTANZEN 20
2.6 MATERIAL 21
2.7 GERAETE 22
3 METHODEN 25
3.1 HERSTELLUNG DER DFDC-LIPOSOMEN MITTELS REMOTELOADING 25
3.1.1 HERSTELLUNG VON MLV S NACH DER FILMMETHODE 25
3.1.2 SUV-HERSTELLUNG MITTELS FILTER-EXTRUSION 25
3.1.3 NACHTRAEGLICHES BELADEN DER LIPOSOMEN MIT DFDC DURCH REMOTE
LOADING 26
IMAGE 3
INHALTSVERZEICHNIS
3.1.4 VESIKULARE PHOSPHOLIPIDGELE 26
3.1.5 HERSTELLUNG VON DFDC-LIPOSOMEN DURCH PASSIVE LOADING 27
3.1.6 DOPPELT RADIOAKTIV MARKIERTE VESIKULARE DFDC-PHOSPHOLIPIDGELE 27
3.1.7 REDISPERGIERUNG DER VESIKULAEREN PHOSPHOLIPIDGELE 28
3.2 ABTRENNUNG VON NICHT EINGESCHLOSSENEM DFDC 28
3.2.1 GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE 28
3.2.2 LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 29
3.3 CHARAKTERISIERUNG UND ANALYTIK DER LIPOSOMEN 29
3.3.1 BESTIMMUNG DER VESIKELGROESSE 29
3.3.2 VISKOSITAETSBESTIMMUNG VESIKULAERER PHOSPHOLIPIDGELE 30
3.3.3 LIPIDANALYTIK 31
3.3.3.1 QUANTIFIZIERUNG DER PHOSPHOLIPIDE NACH NASSVERASCHUNG 31
3.3.3.2 QUANTITATIVE HPTLC 31
3.3.4 QUANTIFIZIERUNG DES DFDC 32
3.3.4.1 PROBENAUFBEREITUNG AUS DEM SERUM 32
3.3.4.2 HERSTELLUNG DER SERUMSTANDARDS 33
3.3.4.3 AUFBEREITUNG DER SERUMPROBEN 33
3.3.5 SIMULTANBESTIMMUNG VON 14C UND 3H 34
3.3.5.1 QUANTIFIZIERUNG AUS REDISPERGIERTEN PHOSPHOLIPIDGELEN 34
3.3.5.2 QUANTIFIZIERUNG AUS ORGANISCHEM MATERIAL 34
3.4 IN VITRO-FREISETZUNGSMODELL 37
3.5 IN VIVO-UNTERSUCHUNGEN 38
3.5.1 HERKUNFT DER NACKTMAEUSE 38
3.5.2 XENOGRAFT-TRANSPLANTATION IN ATHYMISCHE NACKTMAEUSE 39
3.5.3 RANDOMISATION 39
3.5.4 THERAPIEREGIME 40
3.5.5 PHARMAKOKINETIK 40
4 ERGEBNISSE UND DISKUSSION 41
4.1 REMOTE LOADING . 41
4.2 EINSCHLUSS VON DFDC IN VESIKULARE PHOSPHOLIPIDGELE 45
4.2.1 DIREKTBELADUNG 46
INHALTSVERZEICHNIS
4.2.1.1 LAGERSTABILITAET UND AUTOKLAVIERBARKEIT DES DFDC-ENTHALTENDEN
VESIKULAEREN HEPC/CHOL-PHOSPHOLIPIDGELS 46
4.2.2 PASSIVE LOADING 47
4.2.2.1 PASSIVE LOADING IN ABHAENGIGKEIT VON DER INKUBATIONSZEIT UND
DFDC- KONZENTRATION 48
4.2.2.2 ASEPTISCHE HERSTELLUNG 50
4.2.2.3 VOR- UND NACHTEILE DES PASSIVE LOADING GEGENUEBER DER
DIREKTBELADUNG...50
4.3 UNTERSUCHUNGEN ZUR STABILITAET VON DFDC-PHOSPHOLIPIDGELEN 52
4.3.1 EINFLUSS VON DFDC AUF DIE CHEMISCHE STABILITAET DER PHOSPHOLIPIDE 52
4.3.1.1 EINFLUSS DER DFDC-KONZENTRATION 54
4.3.1.2 EINFLUSS DER LIPOSOMENCHARAKTERISTIK AUF DIE DFDC-VERMITTELTE
PHOSPHOIIPIDHYDROLYSE . 55
4.3.1.3 EINFLUSS DES MEDIUMS AUF DIE DFDC-VERMITTELTE
PHOSPHOIIPIDHYDROLYSE 57
4.3.1.4 DSC-MESSUNGEN 62
4.3.1.5 MECHANISMUS DER DEACYLIERUNG IN GEGENWART VON DFDC 63
4.3.1.6 UNTERSUCHUNGEN ZU HERSTELLUNGS- UND LAGERBEDINGUNGEN VON
VESIKULAEREN DFDC-PHOSPHOLIPIDGELEN 66
4.4 EINHEITLICHKEIT DER PHOSPHOLIPIDGELE UNTERSCHIEDLICHER
HERSTELLUNGSCHARGEN 72
4.4.1 EINHEITLICHKEIT DER VESIKELGROESSE 72
4.4.2 RHEOLOGISCHE MESSUNGEN 74
4.4.2.1 REDISPERGIERUNGSREIHEN 75
4.4.2.2 EINHEITLICHKEIT DER FLIESSKURVEN NACH REDISPERGIERUNG 77
4.4.2.3 VERGLEICH DER REDISPERGIERUNG MITTELS VORTEXEN UND MITTELS EINER
KUGELMUEHLE 78
4.5 IN V/FRO-FREISETZUNG VON DFDC AUS DEN PHOSPHOLIPIDGELEN 79
4.5.1 IN W FRO-FREISETZUNG VON DFDC AUS DEN UNVERAENDERTEN, HALBFESTEN
PHOSPHOLIPIDGELEN 79
4.5.1.1 FREISETZUNGSMEDIUM PUFFER 82
4.5.1.2 FREISETZUNGSMEDIEN ASCITES UND SERUM 85
4.5.2 VERWENDUNG REDISPERGIERTER PHOSPHOLIPIDGELE 91
4.5.2.1 LEAKAGE NACH REDISPERGIERUNG IN PUFFER 91
4.5.2.2 LEAKAGE IN SERUM 92
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