Regulation und Modulation des spannungsabhängigen L-Typ Ca+-Stromes (ICaL) und des Hyperpolarisation aktivierten nicht-selektiven Kationenstromes (If) in aus embryonalen Stammzellen der Maus abgeleiteten Kardiomyozyten:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
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1999
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1999 |
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CONTENT
CONTENT
1.
INTRODUCTION
.
1
2.
QUESTIONS
ADDRESSED
IN
THIS
STUDY
.
7
3.
MATERIALS
AND
METHODS
.
8
3.1.
CELL
CULTURE
.
8
3.2.
PREPARATION
OF
SINGLE
CARDIOMYOCYTES
.
9
3.3.
ELECTROPHYSIOLOGICAL
MEASUREMENTS
.
10
3.4.
PIPETTES
AND
SOLUTIONS
.
11
3.5.
IMMUNOCYTOCHEMICAL
INVESTIGATION
OF
NOS
EXPRESSION
.
11
3.6.
SUBSTANCES
TESTED
IN
THE
STUDY
.
15
4.
RESULTS
.
16
4.1.
ESTABLISHMENT
OF
SS-ADRENERGIC
MODULATION
OF
I
CAL
IN
EARLY
STAGE
OF
CARDIOMYOCYTE
DEVELOPMENT
.
16
4.1.1.
ISO,
FORSKOLIN
AND
8-BR-CAMP
STIMULATED
I
CAL
IN
LDS
BUT
NOT
IN
VEDS
CARDIOMYOCYTES
.
18
4.1.2.
I
CAL
WAS
STIMULATED
BY
CELL
DIALYSIS
WITH
CATALYTIC
SLUBUNIT
OF
PKA
IN
VEDS-AND
LDS-CELLS
.
22
4.1.3.
I
CAL
STIMULATION
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
24
4.1.4.
EFFECT
OF
ATP-Y-S
AND
OKAIDIC
ACID
ON
I
CAL
IN
EDS-AND
LDS
CELLS
.
27
4.1.5.
FUNCTIONAL
EXPRESSION
OF
PDES
IN
EDS
CELLS
.
27
4.1.6.
I
CAL
STIMULATION
BY
A
MEMBRANE-DELIMITED
PATHWAY
IN
LDS
BUT
NOT
IN
VEDS
CARDIOMYOCYTES
.
29
4.1.7.
CATALYTIC
SUBUNIT
OF
PKA
INHIBITOR
(PKI)
INDUCED
AN
INHIBITORY
EFFECT
OF
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
31
CONTENT
4.2.
REGULATION
AND
MODULATION
OF
I
CAL
BY
MUSCARINIC
AGONISTS
.
32
4.2.1
.EFFECT
OF
CCH
ON
ACTION
POTENTIALS
IN
EDS
AND
LDS
CELLS
.
32
4.2.2.
EFFECT
OF
CCH
ON
THE
PEAK
AMPLITUDE
OF
BASAL
I
CAL
IN
BOTH
EDS
AND
LDS
CELLS
.
32
4.2.3.
EFFECT
OF
CCH
ON
THE
PEAK
CURRENT-VOLTAGE
RELATIONSHIP
OF
BASAL
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
35
4.2.4.
PERTUSSIS
TOXIN
ELIMINATED
THE
INHIBITORY
EFFECT
OF
CCH
ON
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
35
4.2.5.
EFFECT
OF
CCH
ON
I
CAL
IN
PRESENCE
OF
NO
SYNTHASE
INHIBITORS
IN
EDS
AND
LDS
CELLS
.
35
4.2.6.
EFFECT
OF
CCH
ON
I
CAL
IN
ODQ
PRE-TREATED
EDS
CELLS
.
39
4.2.7.
EFFECT
OF
PDE
INHIBITORS
ON
CCH
DEPRESSION
OF
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
43
4.2.8.
EFFECT
OF
CCH
ON
ISO
PRESTIMULATED
I
CAL
IN
LDS
CARDIOMYOCYTES
.45
4.2.9.
EXPRESSION
AND
IDENTIFICATION
OF
NOS
ISOFORMS
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
.45
4.2.10.
EFFECT
OF
CCH
ON
I
CAL
IN
AMINOGUANIDINE
PRE-INCUBATED
EDS
CELLS
.
46
4.3.
ATRIAL
NATRIURETIC
PEPTIDE
(ANP)
REGULATES
I
CAL
IN
ES
CELL-DERIVED
CARDIOMYOCYTES
.
48
4.3.1.
EFFECT
OF
ANP
ON
ACTION
POTENTIALS
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
48
4.3.2.
INHIBITORY
EFFECT
OF
ANP
ON
BASAL
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
50
3.3.3.
ANP
DEPRESSED
ISO
PRE-STIMULATED
I
CAL
IN
LDS
CARDIOMYOCYTES.
53
4.3.4.
L-NMMA
DID
NOT
BLOCK
THE
DEPRESSION
EFFECT
OF
ANP
ON
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
53
VII
CONTENT
4.3.5.
EFFECT
OF
ODQ
AND
METHYLENE
BLUE
ON
ANP-INDUCED
I
CAL
DEPRESSION
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
56
4.3.6.
ANP
DOES
NOT
DEPRESS
I
CAL
IN
PRESENCE
OF
ATP-Y-S
AND
FORSKOLIN
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
58
4.3.7.
EHNA
BLOCKS
THE
EFFECT
OF
ANP
ON
BASAL
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
58
4.3.8.
PERTUSSIS
TOXIN
DOES
NOT
PREVENT
ANP-MEDIATED
INHIBITION
OF
BASAL
I
CAL
IN
EDS
CARDIOMYOCYTES
.
58
4.3.9.
EXPRESSION
OF
ANP
IN
EDS
AND
LDS
CARDIOMYOCYTES
.
59
4.4.
EXPRESSION
AND
MODULATION
OF
HYPERPOLARIZATION
ACTIVATED
INWARD
CURRENT
(I
F
)
IN
ES
CELL-DERIVED
CARDIOMYOCYTES
.
62
4.4.1
.EXPRESSION
OF
I
F
IN
ES
CELL-DERIVED
CARDIOMYOCYTES
.
62
4.4.2.
EFFECT
OF
CAESIUM
ON
I
F
IN
ES
CELL-DERIVED
CARDIOMYOCYTES
.
62
4.4.3.
EFFECT
OF
CCH
ON
I
F
CURRENT
.
66
4.4.4.
EFFECT
OF
8-BROMO-CAMP
AND
CATALYTIC
SUBUNINT
OF
PKA
ON
I
F
.
68
4.4.5.
EFFECT
OF
ISO
AND
FORSKOLIN
ON
I
F
CURRENT
.
69
4.4.6.
EFFECT
OF
CGMP
AND
ANP
ON
I
F
CURRENT
.
71
4.4.7.
EFFECT
OF
DEANONOATE(DEA)
ON
I
F
CURRENT
.
73
4.4.8.
EFFECTS
OF
PDE
INHIBITORS
ON
I
F
CURRENT
.
74
5.
DISCUSSION
.
76
5.1.
ESTABLISHMENT
OF
SS-ADRENERGIC
MODULATION
OF
I
CAL
.
77
5.2.
REGULATION
OF
I
CAL
BY
CCH
.
81
5.3.
REGULATION
OF
I
CAL
BY
ANP
.
85
4.4.
EXPRESSION
AND
REGULATION
OF
I
F
.
88
6.
SUMMARY
.
91
7.
ZUSAMMENFASSUNG
.
94
VNI
CONTENT
8.
REFERENCES
.
98
9.
ABBREVIATION
.
122
10.
PUBLICATIONS
.
124
IX |
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