Wechselwirkung von Rezeptortyrosinkinasen mit Proteintyrosinphosphatasen und UV-induzierte Signaltransduktion:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
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| Beschreibung: | Jena, Univ., Diss., 1998 |
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INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 INTRAZELLULAERE PROTEINTYROSINKINASEN
1
1.2 REZEPTORTYROSINKINASEN (RTK)
2
1.2.1 DER REZEPTOR FUER DEN WACHSTUMSFAKTOR AUS THROMBOZYTEN
(PLATELET-DERIVED GROWTHFACTOR RECEPTOR
(PDGFR)) 2
1.3 PROTEINTYROSINPHOSPHATASEN (PTP)
5
1.3.1 INTRAZELLULAERE PROTEINTYROSINPHOSPHATASEN 6
1.3.2 TRANSMEMBRANE PROTEINTYROSINPHOSPHATASEN (RPTP) 9
1.3.2.1 DIE PROTEINTYROSINPHOSPHATASE RPTPA 12
1.3.2.2 DIE LAR/RPTP5/RPTPA UNTERFAMILIE DER RPTPS 14
1.3.2.3 DEP-1, EIN VERTRETER DER TYP HI RPTPS 15
1.4 UV-INDUZIERTE ZELLREAKTIONEN
16
1.5 ZIELSTELLUNGEN DIESER ARBEIT
18
2 MATERIAL UND METHODEN 19
2.1 MATERIAL
19
2.1.1 CHEMIKALIEN 19
2.1.2 ENZYME UND KITS 19
2.1.3 MEDIEN 20
2.1.4 PUFFER UND LOESUNGEN 20
2.1.5 ANTIKOERPER 21
2.1.6 WACHSTUMSFAKTOREN 23
2.1.7 BAKTERIENSTAEMME 23
2.1.8 PHAGEN 23
2.1.9 ZELLINIEN 23
2.1.10 OLIGONUKLEOTIDE 24
2.1.11 PLASMIDE 25
2.2 METHODEN
28
2.2.1 HERSTELLUNG KOMPETENTER
E. COLI BAKTERIENZELLEN UND TRANSFORMATION VON
PLASMID DNA 28
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.2.2 ISOLATION VON PLASMID DNA
2.2.3 SEQUENZIERUNG DOPPELSTRAENGIGER DNA
2.2.4 PCR AMPLIFIKATION DER DNA
2.2.5 MUTAGENESE MIT HILFE DER PCR
2.2.6 GEZIELTE MUTAGENESE DER DNA
2.2.7 TRANSIENTE TRANSFEKTION VON 293 ZELLEN
2.2.8 INDUZIERBARE TRANSKRIPTIONEILE AKTIVIERUNG DURCH
ANHYDROTETRAZYKLIN (ATC)
2.2.9 STABILE TRANSFEKTION VON SWISS 3T3 ZELLEN UND NIH 3T3 ZELLEN DURCH
ELEKTROPORATION
2.2.10 ZELLLYSE UND PROTEINBESTIMMUNG
2.2.11 IMMUNPRAEZIPITATION (IP) VON PROTEINEN
2.2.12 SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE)
2.2.13 WESTEMBLOTANALYSE
2.2.14 BESTIMMUNG DER
IN VITRO PHOSPHATASEAKTIVITAET
2.2.15 UV-BEHANDLUNG DER ZELLEN
2.2.16 STANDARDKLONIERUNGEN
3 ERGEBNISSE
28
28
29
29
29
30
31
32
32
32
33
33
33
34
34
36
3.1 INTERAKTION ZWISCHEN TRANSMEMBRANEN PTPS UND DEM PDGFSS-REZEPTOR
36
3.1.1 KONSTRUKTION VON EXPRESSIONSPLASMIDEN 36
3.1.1.1 KONSTRUKTION VSV-G EPITOP-MARKIERTER PTPS UND IHRE
KLONIERUNG IN EXPRESSIONSPLASMIDE 36
3.1.1.2 KONSTRUKTION VON EXPRESSIONSPLASMIDEN FUER DEN PDGFSS-REZEPTOR 37
3.1.2 INTERAKTION VON RPTPA MIT DEM PDGFSS-REZEPTOR 39
3.1.2.1 RPTPA DEPHOSPHORYLIERT DEN PDGFSS -REZEPTOR IN TRANSIENT
TRANSFIZIERTEN 293 ZELLEN 39
3.1.2.2 ASSOZIATION VON RPTPA MIT DEM PDGFSS-REZEPTOR 40
3.1.2.3 EFFEKTE VON RPTPA ANTISENSE-RNA-EXPRESSIONSPLASMIDEN 42
3.1.2.4 ETABLIERUNG STABILER ZELLINIEN MIT INDUZIERBARER EXPRESSION VON
RPTPA ODER
RPTPA ANTISENSE-RNA 43
3.1.3 INTERAKTION VON PHOSPHATASEN AUS ANDEREN UNTERKLASSEN DER RPTPS
MIT DEM PDGFSS-REZEPTOR 44
3.1.3.1 DEP-1 UND RPTPCR DEPHOSPHORYLIEREN DEN PDGFSS-REZEPTOR
IM UEBEREXPRESSIONSSYSTEM 44
3.1.3.2 DEP-1 UND RPTPO ASSOZIIEREN UNTERSCHIEDLICH STARK MIT DEM
PDGFSS-REZEPTOR IN TRANSIENTEN KOEXPRESSIONSEXPERIMENTEN 46
IV HNIS
3.1.3.3 INDUZIERBARE EXPRESSION VON RPTPA, DEP-1 UND RPTPA 49
3.2 UV-INDUZIERTE SIGNALTRANSDUKTION
51
3.2.1 UV-BESTRAHLUNG HEMMT RPTPA 51
3.2.1.1 UV-BESTRAHLUNG FUEHRTE ZUR VERMINDERTEN DEPHOSPHORYLIERUNG
DES PDGFSS-REZEPTORS IN TRANSIENT TRANSFIZIERTEN 293 ZELLEN 51
3.2.1.2 UV HEMMT DIE AKTIVITAET VON RPTPA 52
3.2.2 HEMMUNG DER ZYTOSOLISCHEN PTP SHP-1 DURCH UV 53
3.2.2.1 UV-BESTRAHLUNG FUEHRT ZU EINER ERHOEHTEN EGFR-AUTOPHOSPHORYLIERUNG
IN TRANSIENT TRANSFIZIERTEN 293 ZELLEN 54
3.2.2.2 DIE UV-INDUZIERTE PHOSPHORYLIERUNG DES EGF-REZEPTORS IST VON DER
DOSIS
UND DER WELLENLAENGE DES UV-LICHTS ABHAENGIG 55
3.2.2.3 UVC BESTRAHLUNG VON A431 ZELLEN ERZEUGTE EINE CHARAKTERISTISCHE
STRESSANTWORT DER ZELLEN 56
3.2.2.4 HEMMUNG VON SHP-1 DURCH UV-BESTRAHLUNG 57
3.2.3 MECHANISMUS DER HEMMUNG DER PROTEINTYROSINPHOSPHATASEN DURCH UV 58
3.2.4 UV HEMMTE DIE AKTIVITAET MEHRERER PHOSPHATASEN 59
4 DISKUSSION 62
4.1 RPTPA BILDET MIT DEM PDGFSS-REZEPTOR EINEN ENZYM-SUBSTRAT KOMPLEX
62
4.2 INTERAKTION DES PDGFSS-REZEPTORS MIT PHOSPHATASEN AUS VERSCHIEDENEN
UNTERKLASSEN DER RPTPS
64
4.3 BIOLOGISCHE BEDEUTUNG DER INTERAKTION DER RPTPS RPTPA, DEP-I UND
RPTPA
MIT DEM PDGFSS-REZEPTOR
67
4.4 UV BESTRAHLUNG HEMMT DIE AKTIVITAET VON PTPS
68
4.5 MECHANISMUS DER UV-INDUZIERTEN INAKTIVIERUNG DER
PROTEINTYROSINPHOSPHATASEN
70
5 ZUSAMMENFASSUNG 74
6 LITERATUR 75
7 ANHANG |
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| spelling | Groß, Steffen 1969- Verfasser (DE-588)121147460 aut Wechselwirkung von Rezeptortyrosinkinasen mit Proteintyrosinphosphatasen und UV-induzierte Signaltransduktion von Steffen Groß 1998 85 Bl. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Jena, Univ., Diss., 1998 Platelet-derived Growth Factor - Signaltransduktion - Regulation - Proteintyrosinphosphatase - Inhibition - Ultraviolett-Bestrahlung Platelet-derived Growth Factor - Signaltransduktion - Regulation - Rezeptor-Tyrosinkinasen - Enzymaktivität - Ultraviolett-Bestrahlung Inhibition (DE-588)4273127-6 gnd rswk-swf Ultraviolett-Bestrahlung (DE-588)4243843-3 gnd rswk-swf Regulation (DE-588)4049075-0 gnd rswk-swf Proteintyrosinphosphatase (DE-588)4311372-2 gnd rswk-swf Enzymaktivität (DE-588)4152470-6 gnd rswk-swf Rezeptor-Tyrosinkinasen (DE-588)4342440-5 gnd rswk-swf Signaltransduktion (DE-588)4318717-1 gnd rswk-swf Platelet-derived Growth Factor (DE-588)4301727-7 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Platelet-derived Growth Factor (DE-588)4301727-7 s Signaltransduktion (DE-588)4318717-1 s Regulation (DE-588)4049075-0 s Rezeptor-Tyrosinkinasen (DE-588)4342440-5 s Enzymaktivität (DE-588)4152470-6 s Ultraviolett-Bestrahlung (DE-588)4243843-3 s DE-604 Proteintyrosinphosphatase (DE-588)4311372-2 s Inhibition (DE-588)4273127-6 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=008627685&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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