Zelldifferenzierung während der sexuellen Entwicklung des Ascomyceten Sordaria macrospora:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German English |
| Veröffentlicht: |
Berlin [u.a.]
Cramer
1999
|
| Schriftenreihe: | Bibliotheca mycologica
179 |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zsfassung in engl. Sprache. - Zugl.: Bochum, Univ., Diss. |
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INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINFUEHRUNG
.
1
1.
EINLEITUNG
.
1
2.
HYPHENWUCHS
BEI
HEFEARTIGEN
PILZEN
.
2
2.1
DER
PSEUDOHYPHENWUCHS
BEI
SACCHAROMYCES
CEREVISIAE
ALS
MODELL
FUER
DEN
UEBERGANG
ZU
POLARISIERTEM
WACHSTUM
.
2
2.2
HYPHENWUCHS
UND
PATHOGENITAET
SIND
BEI
USTILAGO
MAYDIS
KORRELIERT
.
6
3.
STRUKTUREN
ZUR
ASEXUELLEN
FORTPFLANZUNG
BEI
HYPHENPILZEN
.
8
3.1
DIE
DIFFERENZIERUNG
VON
ASEXUELLEN
SPOREN
BEI
ASPERGILLUS
NIDULANS
WIRD
DURCH
RAEUMLICHE
UND
ZEITLICHE
MUSTER
DER
EXPRESSION
VERSCHIEDENER
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN
REGULIERT
.
8
3.2
EINE
INNERE
UHR
REGULIERT
DIE
KONIDIENBILDUNG
BEI
NEUROSPORA
CRASSA
.
11
4.
DIE
KREUZUNGSTYPGENE
DER
ASCOMYCETEN
KODIEREN
FUER
TRANSKRIPTIONSFAKTOREN,
DIE
FUER
DIE
REGULATION
DER
DIKARYOPHASE
ENTSCHEIDEND
SIND
.
13
5.
EINIGE
ZIELGENE
ENTWICKLUNGSGESTEUERTER
REGULATIONSPROZESSE
KODIEREN
FUER
ZELLWANDPROTEINE
.
17
6.
DIE
ERFORSCHUNG
DER
ZELLDIFFERENZIERUNG
BEI
PILZEN
LIEFERT
INTERESSANTE
EINBLICKE
IN
VERSCHIEDENSTE
REGULATIONSPROZESSE
.
18
N.
PROBLEMSTELLUNG
.
20
HL
MATERIAL
UND
METHODEN
.
24
1.
MATERIAL
.
24
1.1
STAEMME
.
24
1.2
PLASMIDE
.
24
1.3
OLIGONUKLEOTIDE
.
26
1.4
GENBIBLIOTHEK
.
27
1.5
CHEMIKALIEN
.
27
1.6
ENZYME
.
27
1.7
HAEUFIG
VERWENDETE
PUFFER
.
28
1.8
NAEHRMEDIEN
.
28
2.
METHODEN
.
28
2.1
KULTURBEDINGUNGEN
.
28
2.2
ISOLIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
29
2.2.1
PLASMID
UND
COSMID-DNA
AUS
ESCHERICHIA
COLI
.
29
2.2.2
GESAMT-DNA
AUS
PILZEN
.
29
2.2.3
GESAMT-RNA
AUS
SORDARIA
MACROSPORA
.
29
2.3
PROTOPLASTIERUNG
VON
SORDARIA
MACROSPORA
.
29
2.4
TANSFORMATIONEN
.
30
2.4.1
TRANSFORMATION
VON
ESCHERICHIA
COLI
.
30
2.4.2
TRANSFORMATION
VON
SORDARIA
MACROSPORA
.
30
2.5
GELELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
DNA
UND
RNA
.
30
2.6
ELUTION
VON
DNA
AUS
AGAROSEGELEN
.
31
2.7
IN
VITRO-REKOMBINATION
VON
DNA
.
31
2.8
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
31
2.9
BLOTVERFAHREN
UND
HYBRIDISIERUNGEN
.
31
2.10
OLIGONUKLEOTIDSYNTHESE
.
32
2.11
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
32
2.11.1
PCR
VON
S.
WACROSPORA-GESAMT-DNA
.
32
2.11.2
RT-PCR
.
32
2.12
DNA-SEQUENZIERUNG
.
33
2.13
AUSWERTUNG
VON
NUKLEOTID-SEQUENZEN
.
33
2.14
"PRIMER
EXTENSION"
.
33
2.15
HERSTELLUNG
VON
PROTEINROHEXTRAKTEN
AUS
PILZMYZEL
.
34
2.16
NACHWEIS
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
.
34
2.16.1
GLUCOSE-6-PHOSPHAT-DEHYDROGENASE-TEST
.
34
2.16.2
MALAT-DEHYDROGENASE-GEKOPPELTER
ATP-CITRAT-LYASE-TEST
.
34
2.16.3
CHLORAMPHENICOL-ACETYL-TRANSFERASE-GEKOPPELTER
ATP-CITRAT-LYASE-TEST
.
36
2.17
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
UND
WESTERN-BLOT
.
36
2.18
IMMUNHISTOCHEMIE
.
37
2.19
FLUORESZENZMIKROSKOPIE
.
38
2.20
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
38
2.21
SICHERHEITSMASSNAHMEN
.
38
IV.
ERGEBNISSE
.
39
1.
MORPHOLOGISCHE
UND
CYTOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
MUTANTE
PER5
.
39
2.
KOMPLEMENTATION
DER
MUTANTE
PER5
MIT
EINER
S.
MACRO
SPORA-COSMID-GENBANK
.41
3.
ANALYSE
DES
ACLL-G&AS
UND
SEINER
EXPRESSION
IN
DER
MUTANTE
PER5
.
48
3.1
GENETISCHE
UND
MOLEKULARE
ANALYASE
DES
AC/7-ALLELS
DER
MUTANTE
PER5
.
48
3.2
TRANSFORMATION
DER
MUTANTE
PER5
MIT
MUTIERTEN
UND
DELETIERTEN
DERIVATEN
DES
KOMPLEMENTIERENDEN
COSMID-KLONS
.
50
3.3
VERGLEICH
DER
AC/7-TRANSKRIPTION
ZWISCHEN
S.
MACROSPORA-WILDTYP
UND
MUTANTE
PER5
.
53
3.4
UNTERSUCHUNG
DER
ACL-AKTIVITAET
IN
WILDTYP,
MUTANTE
UND
KOMPLEMENTIERTEN
TRANSFORMANTEN
.
54
3.5
TEILKOMPLEMENTATION
DER
MUTANTE
PER5
DURCH
VERSCHIEDENE
MEDIEN-ZUSAETZE
.
57
4.
UNTERSUCHUNG
DES
ACL
1
-POLYPEPTIDS
.
58
4.1
"EPITOPE
TAGGING"
DES
ACL
1
-POLYPEPTIDS
.
59
4.2
SUBZELLULAERE
LOKALISATION
DES
ACL
1
-POLYPEPTIDS
IN
HYPHEN
VON
S
MACROSPORA
.
62
5.
ENTWICKLUNGSABHAENGIGE
REGULATION
DER
AC/7-EXPRESSION
IN
S.
MACROSPORA
.
63
5.1
ANALYSE
DER
ACL-AKTIVITAET
IM
VERLAUF
DER
ENTWICKLUNG
VONS.
MACROSPORA
.
63
5.2
ANALYSE
DER
AC/7-TRANSKRIPTMENGE
SOWIE
DES
ACL-POLYPEPTIDS
IM
VERLAUF
DER
ENTWICKLUNG
VON
S.
MACROSPORA
.
66
6.
EINFLUSS
DES
SDRL-GENS
AUF
DIE
ACL-AKTIVITAET
IN
S.
MACROSPORA
.
68
7.
ENTWICKLUNGSABHAENGIGE
REGULATION
DER
ACL-AKTIVITAET
BEI
PODOSPORA
ANSERINA
UND
ASPERGILLUS
NIDULANS
.
69
V.
DISKUSSION
.
74
1.
DAS
GEN
FUER
DIE
ATP-CITRAT-LYASE
KOMPLEMENTIERT
DIE
ENTWICKLUNGS
MUTANTE
PER5
VON
SORDARIA
MACROSPORA
.
74
2.
EUKARYOTISCHE
ATP-CITRAT-LYASE-GENE
SIND
SEHR
KONSERVIERT
.
76
2.1
DAS
ACLL-GEN
VON
S.
MACROSPORA
WEIST
HOHE
HOMOLOGIEN
ZU
DEN
ATP-CITRAT-LYASE-GENEN
ANDERER
EUKARYOTEN
AUF
.
76
2.2
DAS
ACL1-POLYPEPTID
VON
S.
MACROSPORA
IST
KLEINER
ALS
DAS
ACL-POLYPEPTID
AUS
TIEREN
.
79
2.3
SUBZELLULAERE
LOKALISATION
UND
PHYSIOLOGISCHE
FUNKTION
DER
ATP-CITRAT-LYASE
.
81
3.
ATP-CITRAT-LYASE-AKTIVITAET
IST
FUER
DIE
FRUCHTKOERPERENTWICKLUNG
VON
S.
MACROSPORA
ERFORDERLICH
.
85
3.1
DIE
MUTANTE
PER5
LEIDET
UNTER
ACETYL-COA-MANGEL
.
85
3.2
FUER
EINE
ERFOLGREICHE
SEXUELLE
ENTWICKLUNG
SIND
BEI
VIELEN
PILZEN
BESTIMMTE
LIPIDE
ERFORDERLICH
.
87
3.3
DIE
BEREITSTELLUNG
VON
BASISMETABOLITEN
IST
ENTWICKLUNGS
ABHAENGIG
REGULIERT
.
89
3.4
MODELLVORSTELLUNG
ZUR
FUNKTION
DER
ATP-CITRAT-LYASE
IN
DER
FRUCHTKOERPERENTWICKLUNG
VON
S.
MACROSPORA
.
93
VI.
ZUSAMMENFASSUNG
.
96
VII.
SUMMARY
.
99
VIII.
LITERATUR
.
102
IX.
ANHANG
.
117 |
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