Flowcytometrische Untersuchung der akrosomalen Reaktion humaner Spermatozoen:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Marburg
Görich & Weiershäuser
1999
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| Schriftenreihe: | Wissenschaft in Dissertationen
439 |
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: Marburg, Univ., Diss., 1999 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1.1.
ENTDECKUNG
UND
ERFORSCHUNG
DES
AKROSOMS
1
1.2.
DAS
AKROSOM
UND
SEINE
BEDEUTUNG
AUS
HEUTIGER
SICHT
3
1.2.1.
BILDUNG
DES
AKROSOMS
IM
VERLAUF
DER
HUMANEN
SPERMATOGENESE
3
1.2.2
EPIDIDYMALE
REIFUNG
4
1.2.3
KAPAZITATION
5
1.2.4.
AKROSOMREAKTION
7
1.3.
VERFAHREN
ZUM
NACHWEIS
DER
AKROSOMREAKTION
11
1.3.1.
STRATEGIE
I'
VERLUST
VON
AKROSOMALEN
STRUKTUREN
11
1.3.2.
STRATEGIE
II
:
AUFTRETEN
VON
STRUKTUREN
NACH
DER
AKROSOMREAKION
13
1.3.3.
TUEBINGER
SPERMATOZOEN
ANTIKOERPER
(TUS)
14
1.3.4.
ABGRENZUNG
DER
"FALSCHEN"
AKROSOMALEN
REAKTION
15
1.4.
FLOWCYTOMETRIE
IM
VERGLEICH
ZUR
MIKROSKOPIE
16
1.5.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
18
2.
MATERIAL
UND METHODEN
2.1.
UNTERSUCHUNGSGUT
19
2.2.
AUFARBEITUNG DER
EJAKULATE
19
2.2.1
AUFREINIGUNG
DER
EJAKULATE
19
2.2.2.
GEWINNUNG
LEBENDER
SPERMATOZOEN
20
2.2.3.
ABTOETUNG
VON
SPERMATOZOEN
20
2.3.
INKUBATION
UND AUSLOESUNG
DER
AKROSOMREAKTION
20
2.4.
BESTIMMUNG
DES
AKROSOMALEN
STATUS
21
2.4.1.
LEKTINFARBUNG
21
2.4.11.
MIKROSKOPISCHER
NACHWEIS
DES
AKROSOMALEN
STATUS
MIT
PSA-LEKTIN
21
2.4.1.2.
FLOWCYTOMETRISCHER
NACHWEIS
DES
AKROSOMS
MIT
PSA-LEKTIN
22
2.4.2.
ANTIKOERPERFAERBUNG
22
2
4
2.1
ANTIKOERPERFAERBUNG
OHNE
PERMEABILISIERUNG
22
2.4.22.
ANTIKOERPERFAERBUNGNACHPERMEABILISIERUNGMITTRITONX-100
23
2
4.2.3.
ANTIKOERPERFAERBUNG
NACH
PERMEABILISIERUNG
MIT
ETHANOL
ODER
METHANOL
23
2.5.
BESTIMMUNG
DER
LEBENSFAEHIGKEIT
DER
SPERMATOZOEN
23
2.5.1.
VITALFAERBUNG
MIT
PROPIDIUM
LODID
(PI)
23
2.5.1.1.
VERSUCHE
ZUR
STABILITAET
DER
VITALFAERBUNG
MIT
PI
23
2.5.12.
PERMEABILISIERUNG
MIT
ETHANOL
(25%)
24
2.5.2.
VITALFAERBUNG
MIT
STREPTAVIDIN
TRI-COLOR
(SAT-C)
25
2.6.
SIMULTANE
BESTIMMUNG
DES
AKROSOMALEN
STATUS
UND
DER
VITALITAET
25
2.6.1.
PERMEABILISIERUNG
DER
SPERMATOZOEN
MIT
ETHANOL
(25%)
UND
25
ANFAERBUNG
DES
AKROSOMS
MIT
TUES-ANTIKOERPEM
ODER
PSA-LEKTIN
2.6.2.
BESTIMMUNG
DER
AKROSOMREAKTION
MIT
TUES
19
UND
DER
26
LEBENSFAEHIGKEIT
MIT
PI
2.7.
VERSUCHE
ZU
DEN
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
26
2.8.
OPTIMIERTER
ANSATZ
MIT
INDUSTRIELL
PRODIZIERTEN
FERTIGMEDIEN
26
2.9.
MIKROSKOPISCHE
AUSWERTUNG
28
2.10.
FLOWCYTOMETRISCHE
AUSWERTUNG
29
2.11.
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
31
3.
ERGEBNISSE
3.1.
BESTIMMUNG
DES
AKROSOMALEN
STATUS
32
3.1.1.
LEKTINFAERBUNG
32
3.1.1.1.
MIKROSKOPISCHER
NACHWEIS
DES
AKROSOMALEN
STATUS
MIT
PSA-LEKTIN
32
3.1.1.2.
FLOWCYTOMETRISCHER
NACHWEIS
DES
AKROSOMS
MIT
PS
A-LEKTIN
34
3.1.2.
ANTIKOERPERFAERBUNG
36
3.12.1.
ANTIKOERPERFAERBUNG
OHNE
PERMEABILISIERUNG
36
3.1.2.2.
ANTIKOERPERFAERBUNG
NACH
PERMEABILISIERUNG
MIT
TRITON
X-100
37
3.1.2.3.
ANTIKOERPERFAERBUNG
NACH
PERMEABILISIERUNG
MIT
ETHANOL
ODER
METHANOL
39
3.2.
BESTIMMUNG
DER
LEBENSFAEHIGKEIT
DER
SPERMATOZOEN
39
3.2.1.
VITALFAEFBUNG
MIT
PROPIDIUM
LODID
(PI)
39
3.2.1.1.
VERSUCHE
ZUR
STABILITAET
DER
VITALFAERBUNG
MIT
PI
39
3.2.1.2.
PERMEABILISIERUNG
MIT
ETHANOL
(25%)
40
3.2.2.
VITALFAERBUNG
MIT
STREPTAVIDIN
TRI-COLOR
(SAT-C)
42
3.3.
SIMULTANE
BESTIMMUNG
DES
AKROSOMALEN
STATUS
UND
DER
VITALITAET
43
3.3.1.
PERMEABILISIERUNG
DER
SPERMATOZOEN
MIT
ETHANOL
(25%)
UND
43
ANFAERBUNG
DES
AKROSOMS
MIT
TUES-ANTIKOERPEM
ODER
PSA-LEKTIN
3.3.2.
BESTIMMUNG
DER
AKROSOMREAKTION
MIT
TUES
19
UND
DER
43
LEBENSFAEHIGKEIT
MIT
PI
3.4.
VERSUCHE
ZU
DEN
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
48
3.5.
OPTIMIERTER
ANSATZ
MIT
INDUSTRIELL
HERGESTELLEN
FERTIGMEDIEN
50
4.DISKU5$IQN
4.1.
AUFARBEITUNG
DER
EJAKULATE
UND
AUSLOSUNG
DER
53
AKROSOMREAKTION
4.2.
BESTIMMUNG
DES
AKROSOMALEN
STATUS
57
4.2.1.
LEKTINFAERBUNG
57
4.2.2.
ANTIKOERPERFAERBUNG
60
4.3.
BESTIMMUNG
DER
LEBENSFAEHIGKEIT
DER
SPERMATOZOEN
63
4.3.1.
VITALFAERBUNG
MIT
PROPIDIUM
LODID
63
4.3.2.
VITALFAEIBUNG
MIT
STREPTAVIDIN
TRI-COLOR
63
4.4.
SIMULTANE
BESTIMMUNG
DES
AKROSOMALEN
STATUS
UND
DER
VITALITAET
64
4.5.
OPTIMIERTER
ANSATZ
MIT
INDUSTRIELL
HERGESTELLEN
FERTIGMEDIEN
65
4.6.
BEDEUTUNG
DER
BESTIMMUNG
DER
AKROSOMALEN
REAKTION
IN
DER
65
EJAKULATUNTERSUCHUNG
4.7.
DIE
FLOWCYTOMETRIE
IN
DER
EJAKULATANALYSE
66
5, ZUSAMMENFASSUNG/
SL
ARY
68
ANHANG
I:
ZUBEREITUNGSPROTOKOLLE
DER
VERSUCHSREAGENZIEN
71
ANHANG
II:
VERZEICHNIS
DER
FINNENADRESSEN
73
ANHANG
III:
ZENTRIFUGATION
73
LITERATURVERZEICHNIS
74
LEBENSLAUF
84
LISTE
DER
AKADEMISCHEN
LEHRER
85
DANKSAGUNG
86
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
87 |
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