Effekte von 13-cis Retinolsäure auf die Expression nukleärer Protoonkogene in humanen Pankreaskarzinomzellen:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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| Veröffentlicht: |
1998
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
9
2.
LITERATURUEBERSICHT
10
2.1
PANKREAS
10
2.1.1
FUNKTION
UND
AUFBAU
DES
PANKREAS
10
2.1.2
PANKREASKARZINOME
10
2.2
RETINOIDE
12
2.2.1
STOFFGRUPPE
UND
METABOLISMUS
12
2.2.2
BIOLOGISCHE
WIRKUNGEN
VON
RETINOIDEN
13
2.2.3
RETINOIDE
UND
KREBS
14
2.2.4
ENTWICKLUNG
VON
RETINOIDEN
UND
DEREN
KLINISCHER
EINSATZ
14
2.2.5
EINFLUSS
VON
RETINOIDEN
AUF
ZELLDIFFERENZIERUNG
UND
-PROLIFERATION
16
2.2.6
ZYTOPLASMATISCHE
BINDUNGSPROTEINE
UND
NUKLEAERE
REZEPTOREN
FUER
RETINOIDE
16
2.2.6.1
ZYTOPLASMATISCHE
PROTEINE
UND
NUKLEAERE
REZEPTOREN
FUER
RETINOIDE
IM
PANKREAS
19
2.2.6.2
REZEPTORKOMPLEX
UND
GENREGULIERUNG
20
2.2.7
RETINOIDREGULIERTE
GENE
21
23
PROTOONKOGENE
22
2.3.1
ONKOGENE
UND
PROTOONKOGENE:
DEFINITION
UND
ABSTAMMUNG
22
2.3.2
C-FOS
UND
C-JUN
23
2.3.2.1
DIE
GENPRODUKTE
FOS
UND
JUN
24
2.3.2.2
TRANSKRIPTIONSREGULATION
VON
C-FOS
UND
C-JUN
26
2.3.2.3
DER
TRANSKRIPTIONSFAKTORKOMPLEX
AP-1
26
2.3.3
C-MYC
27
3.
EIGENE
UNTERSUCHUNGEN
30
3.1
MATERIAL
30
3.1.1
BEZUGSQUELLENNACHWEIS
30
3.1.2
ZELLEN
31
3.1.3
MEDIEN
32
3.1.4
BAKTERIENSTAEMME,
VEKTOREN
UND
AMPLIFIKATE
33
3.1.5
ENZYME
34
3.2
METHODEN
35
3.2.1
ZELLKULTUREN
35
3.2.1.1
ZELLKULTIVIERUNG
36
3.2.1.2
AUFTAUEN
UND
EINFRIEREN
VON
ZELLEN
36
3.2.2
RETINOIDLOESUNGEN
UND
INKUBATION
DER
ZELLEN
37
3.2.3
ZELLEMTE
37
3.2.4
PRAEPARATION
DER
POLYA*-RNA
AUS
DEN
ZELLEN
37
3.2.4.1
QUANTIFIZIERUNG
DER
RNRNA
38
3.2.4.2
REINHEITSGRADBESTIMMUNG
38
3.2.5
PRAEPARATION
DER
C-DNA-FRAGMENT-SONDEN
(PLASMIDTRANSFORMATION)
39
3.2.5.1
PLASMID-DNA-EXTRAKTION
40
3.2.S.2
KONZENTRATIONSGELE
40
3.2.5.3
DNA-VERDAU
MIT
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
41
3.2.5.4
ISOLIERUNG
DER
DNA-FRAGMENTE
DURCH
GELELUTION
41
3.2.6
NORTHERN-BLOT
42
3.2.6.1
MRNA
VORBEREITUNG
42
3.2.6.2
FORMALDEHYD-GEL-RNA-ELEKTROPHORESE
43
3.2.6.3
KAPILLARTRANSFER
UND
IMMOBILISIERUNG
DER
NUKLEINSAEUREN
44
3.2.6.4
MRNA-HYBRIDISIERUNG
MIT
[A
32
P]-DCTP-MARKIERTEN
DNA-SONDEN
45
3.2.6.4.1
DNA-MARKIERUNG
45
3.2.6.4.2
ABTRENNUNG
VON
NICHT
INKORPORIERTEN,
RADIOAKTIVEN
NUKLEOTIDEN
MITTELS
SEPHADEX
G50
SAEULEN
46
3.2.6.4.3
PRAEHYBRIDISIERUNG
UND
HYBRIDISIERUNG
MIT
RADIOAKTIVER
SONDE
46
3.2.6.4.4
WASCHEN
DER
MEMBRANEN
47
3.2.6.5
AUTORADIOGRAPHIE
47
3.2.6.6
SCANNEN
47
3.2.6.7
STATISTISCHE
METHODEN
48
33
ERGEBNISSE
49
3.3.1
UNTERSUCHUNG
DER
BASALEN
C-FOS,
C-JUN
UND
C-MYC
GENEXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOMZELLEN
49
3.3.2
UNTERSUCHUNG
DER
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
EXPRESSION
HUMANER
PROTOONKOGENE
IN
PANKREASKARZINOMZELLEN
51
3.3.2.1
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
C-FOS
MRNA-EXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOMZELLEN
51
3.3.2.2
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
C-JUN
MRNA-EXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOMZELLEN
53
3.3.2.3
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
C-MYC
MRNA-EXPRESSION
IN
HUMANEN
PANKREASKARZINOMZELLEN
54
3.3.3
ZEITVERLAEUFE
56
3.3.3.1
UNTERSUCHUNG
DER
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
MRNA
KONZENTRATIONEN
HUMANER
PROTOONKOGENE
IN
DAN-G
ZELLEN
IN
ABHAENGIGKEIT
DER
INKUBATIONSDAUER
57
3.33.2
UNTERSUCHUNG
DER
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
C-FOS,
C-JUN
UND
C-MYC
MRNA-TRANSKRIPTMENGEN
IN
CAPAN-1
PANKREAS
KARZINOMZELLEN
IN
ABHAENGIGKEIT
DER
INKUBATIONSDAUER
61
3.33.3
UNTERSUCHUNG
DER
EFFEKTE
VON
13-CIS
RETINOLSAEURE
AUF
DIE
EXPRESSION
HUMANER
PROTOONKOGENE
IN
CAPAN-2
PANKREASKARZINOMZELLEN
IN
ABHAENGIGKEIT
DER
INKUBATIONSDAUER
66
3.3.4
DOSISWIRKUNG
69
3.3.4.1
UNTERSUCHUNG
DER
AUSWIRKUNGEN
UNTERSCHIEDLICHER
13-CIS
RETINOLSAEUREKONZENTRATIONEN
AUF
DIE
GENEXPRESSION
VON
C-FOS
IN
DAN-G
ZELLEN
69
33.4.2
UNTERSUCHUNG
DER
AUSWIRKUNGEN
UNTERSCHIEDLICHER
13-CIS
RETINOLSAEUREKONZENTRATIONEN
AUF
DIE
GENEXPRESSION
VON
C-JUN
IN
DAN-G
ZELLEN
71
4.
DISKUSSION
73
5.
ZUSAMMENFASSUNG
83
6,
SUMMARY
7.
ANHANG
85
87
8.
LITERATURVERZEICHNIS
89 |
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