Veränderte Genexpression bei systemisch erworbener Resistenz in Solanum tuberosum L.:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
|
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| Beschreibung: | Köln, Univ., Diss., 1998 |
| Beschreibung: | VIII, 182 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
.
IV
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
VII
1.
EINLEITUNG
.
I
1.1
1.1.1
1.1.2
1.1.3
1.1.3.1
1.1.3.2
DIE
PFLANZLICHE
PATHOGENABWEHR
.3
KONSTITUTIVE
SCHUTZMECHANISMEN
.
3
GENETISCHE
GRUNDLAGEN
DER
KULTIVARSPEZISCHEN
RESISTENZ
.
4
ERKENNUNG
DES
PATHOGENS,
SIGNALTRANSDUKTION
UND
INDUZIERTE
ABWEHRMECHANISMEN
.
5
ERKENNUNG
DES
PATHOGENS
.
6
INDUZIERTE
ABWEHRMECHANISMEN
.
6
13
DIE
KARTOFFEL
(SOLANUM
TUBEROSUM)
.12
13
1.3.1
1.3.2
1.3.3
1.3.4
1.3.4.1
1.3.4.2
1.3.5.
DIE
SYSTEMISCH
ERWORBENE
RESISTENZ.
14
HISTORISCHES
UND
ALLGEMEINES
.
14
TERMINOLOGIE
.
15
SAR
UND
GENEXPRESSION
.
15
SAR
UND
SIGNALTRANSDUKTION
.
16
DAS
SIGNALMOLEKUEL
SALICYLAT
.
16
DIE
SIGNALMOLEKUELE
JASMONAT
UND
ETHYLEN
.
17
DIE
SYSTEMISCH
ERWORBENE
RESISTENZ
BEI
KARTOFFEL
.
18
1.4
ZIELE
DER
ARBEIT
.
20
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
21
2.1
CHEMIKALIEN,
ENZYME
UND
RADIOISOTOPE
.21
23
HAEUFIG
VERWENDETE
KULTURMEDIEN,
STANDARDLOESUNGEN
UND
PUFFER
.21
23
2.3.1
2.3.2
2.3.3
BIOLOGISCHES
MATERIAL
UND
INDUKTION
VON
SAR
.23
ANZUCHT
VON
KARTOFFELPFLANZEN
.
23
KULTUR
VON
PSEUDOMONAS
SYRINGAE
PV
MACULICOLA
.
23
VORINOKULATION
MIT
PSM
.
24
2.4
BEHANDLUNG
MIT
STRESSOREN
UND
ANALYSE
UNBEHANDELTER
PFLANZENYY.YY.YY.YYYY.YY24
23
BAKTERIENSTAEMME,
BAKTERIOPHAGEN
UND
VEKTOREN.YYYYYY.YY.YY.YYYY.YYYY.YY.YYYYYY.YYYY24
2.6
OUGONUKLEOTIDEYY.YYYY.YY.YY.YY.YY.YYYY.YYYYYYYY.YY.YYYY.YYYYYY.YYYYYY.YY.YYYYYYYY.YY.YYYY.YY.YY.YY.25
2.7
2.7.1
2.7.2
2.7.3
2.7.4
2.7.5
2.7.6
2.7.7
2.7.8
2.7.9
2.7.10
2.7.11
2.7.12
2.7.13
2.7.14
2.7.15
ALLGEMEINE
LABORMETHODEN
.26
RESTRIKTIONS-ENDONUKLEASE-SPALTUNG
VON
DNA
.26
LIGATION
.26
ISOLIERUNG
VON
DNA-FRAGMENTEN
.26
TRANSFORMATION
VON
BAKTERIEN
(E.
COLI)
.
27
SCHNELLE
PRAEPARATION
VON
PLASMID-DNA
.
27
STANDARDISIERTE
PLASMID-PRAEPARATIONEN
(E.
COLI)
.
27
DENATURIERENDE
AGAROSEGELE
.
28
TRANSFER
VON
DNA
UND
RNA
AUF
NYLONMEMBRANEN
.
28
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA-PROBEN
.
28
HYBRIDISIERUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
29
HERSTELLUNG
VON
PROTEINEXTRAKTEN
.
29
BESTIMMUNG
VON
PROTEINKONZENTRATIONEN
.
29
SDS-PAGE
VON
PROTEINEN
.
29
TRANSFER
VON
DURCH
SDS-PAGE
GETRENNTEN
PROTEINEN
AUF
MEMBRANEN
.
30
IMMUNOLOGISCHE
DETEKTION
VON
MEMBRANGEBUNDENEN
PROTEINEN
.
30
2.8
TRANSFORMATION
UND
ANALYSE
VON
AGROBACTERIUM
TUMEFACIENS
.31
INHALTSVERZEICHNIS
2.9
ISOLIERUNG
GENOMISCHER
DNA
AUS
KARTOFFELPFLANZEN
.32
2.10
PRAEPARATION
VON
GESAMT-RNA
AUS
KARTOFFELGEWEBE.32
2.11
PRAEPARATION
VON
POLY(A)
+
-RNA
.33
2.12
DNA-SEQUENZIERUNG
.
_
_
.
_
.33
2.13
COMPUTERGESTUETZTE
AUSWERTUNG
DER
SEQUENZDATEN.33
2.14
SCREENING
EINER
CDNA-BANK
.34
2.14,1
TITERN
DER
CDNA-BANK
.
34
2.14.2
DURCHMUSTERN
DER
CDNA-BANK
.
34
2.14.3
ISOLIERUNG
DES
PHAGMIDS
(YYZAPPING
"
)
.
35
2.15
DIFFERENTIELLE
HYBRIDISIERUNG
.36
2.15.1
REVERSE
TRANSKRIPTION
.
37
2.16
HERSTELLUNG
TRANSGENER
PFLANZEN
.38
2.16.1
REAGENZIEN,
LOESUNGEN
UND
MEDIEN
.
'
.
38
2.16.2
TRANSFORMATION
UND
REGENERATION
VON
KARTOFFELPFLANZEN
.
39
2.17
NACHWEIS
VON
SS-GLUKURONIDASE-AKTIVITAET
IN
TRANSGENEN
PFLANZEN.YY.YYYYYY40
2.17.1
QUALITATIVE
ANALYSE
DER
REPORTERGENEXPRESSION
.
40
2.17.2
QUANTITATIVE
ANALYSE
DER
REPORTERGEN-EXPRESSION
.
41
3.
ERGEBNISSE
.
42
3.1
BIOLOGISCHE
INDUKTION
VON
SAR
IN
KARTOFFEL
.YYYYYYYYYYYY.,YYYY.YYYY,YYYYYY.42
3.2
DAS
MARKERGEN
CHTA
(SAURE
CHITINASE).YYYYYY,YYYY.YY.YYYYYYYY44
3.2.1
LOKALE
UND
SYSTEMISCHE
EXPRESSION
VON
CHTA
NACH
INFILTRATION
VON
PSEUDOMONAS
SYRINGAE
PV
MACULICOLA
.
44
3.2.2
CHTA:
ZWEI
GENOMISCHE
KLONE
.
46
3.2.2.1
SEQUENZANALYSE
VON
CHTAL
UND
CHTA2
.
47
33
KLONIERUNGSSTRATEGIE
ZUR
HERSTELLUNG
VON
CHTA-REPORTERGEN-KONSTRUKTEN
.51
3.4
REGENERATION
UND
IDENTIFIZIERUNG
TRANSGENER
KARTOFFELPFLANZEN
.
53
3.5
DASGENGSTL
----------------------------------------------------------------------------------------
55
3.6
ANALYSE
DER
REPORTERGENEXPRESSION
BEI
CHTA
UND
GSTL-PFLANZEN
.56
3.7
IDENTIFIZIERUNG
SYSTEMISCH
AKTIVIERTER
GENE
AUS
KARTOFFEL.
65
3.7.1
DIFFERENTIELLE
CDNA-HYBRIDISIERUNG
.
65
3.7.1.1
SEQUENZANALYSE
VON
PER
DIFFERENTIELLER
HYBRIDISIERUNG
ISOLIERTEN
CDNA-KLONEN
.
67
3.8
DAS
SYSTEMISCH
INDUZIERTE
GEN
CWP
.76
3.9
DAS
EXPRESSIONSVERHALTEN
BEKANNTER
PATHOGENINDUZIERTER
GENE
NACH
BIOLOGISCHER
SAR-INDUKTION
IN
KARTOFFEL.YY.81
3.9.1
ISOLIERUNG
EINER
VOLLSTAENDIGEN
YYP4
'
'
-CDNA
.
85
3.9.1.1
SEQUENZANALYSE
DER
ISOLIERTEN
CDNA-KLONE
UND
IDENTIFIZIERUNG
.
86
3.9.1.1
UNTERSUCHUNGEN
ZU
PRL-B
AUF
PROTEINEBENE
.
89
3.9.1.2
GENOMISCHE
ORGANISATION
VON
PRLB
.
90
3.10
VERGLEICHENDE
CHARAKTERISIERUNG
DER
EXPRESSIONSMUSTER
DER
SYSTEMISCH
INDUZIERTEN
GENE
CWP,
GST1,
PRLB
UND
CHTA
AUS
SOLANUM
TUBEROSUM
.91
3.10.1
EXPRESSIONSMUSTER
IN
VERSCHIEDENEN
ORGANEN
VON
SOLANUM
TUBEROSUM
.
91
3.10.2
EXPRESSION
NACH
INFEKTION
MIT
PHYTOPHTHORA
INFESTANS
.93
3.10.3
EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
MIT
SA
.94
3.10.4
EXPRESSION
NACH
VERWUNDUNG
.
96
3.10.5
EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
MIT
ETHYLEN
.97
3.10.6
EXPRESSION
NACH
BEHANDLUNG
MIT
JA
.99
INHALTSVERZEICHNIS
4.
DISKUSSION
.102
4.1
DAS
MARKERGEN
CHTA.
102
4.2
REPORTERGENEXPRESSION
IN
TRANSGENEN
KARTOFFELPFLANZEN
.106
4.2.1
CHTA-REPORTERGENKONSTRUKTE
.
106
4.2.2
GST1-REPORTERGENKONSTRUKTE
.
109
43
IDENTIFIZIERUNG
SYSTEMISCH
INDUZIERTER
GENE
AUS
KARTOFFEL.
111
4.3.1
DIE
METHODE
DER
DIFFERENTIELLEN
CDNA-HYBRIDISIERUNG
.
112
4.3.1.1
REPRAESENTANTEN
DES
PFLANZLICHEN
PRIMAERSTOFFWECHSELS
UND
DES
PHOTOSYNTHESEAPPARATES
SIND
SYSTEMISCH
DIFFERENTIELL
REGULIERT
.
112
4.3.1.2
EIN
ZELLWANDPROTEIN
(CWP)
IST
IN
KARTOFFEL
SYSTEMISCH
INDUZIERT
.
1
15
4.3.2
ANALYSE
BEKANNTER,
AN
DER
PFLANZLICHEN
ABWEHR
BETEILIGTER
GENE
IM
HINBLICK
AUF
IHRE
SYSTEMISCHE
RESPONSIVITAET
IN
KARTOFFEL
.
117
4.3.2.1
GST1
IST
IN
KARTOFFEL
SYSTEMISCH
INDUZIERT
.
118
4.3.2.2
EIN
PR-L-PROTEM
KODIERENDES
GEN
IST
IN
KARTOFFEL
SYSTEMISCH
INDUZIERT
.
120
4.4
VIER
SAR-MARKERGENE
(CHTA,
CWP,
GST1,
PRLB)
AUS
KARTOFFEL SIND
ENTWICKLUNGS
UND
ORGANSPEZIFISCH
EXPRIMIERT.
.122
43
CHTA,
GST1
UND
CWP
SIND
DURCH
SA
INDUZIERBAR
.
123
4.6
PRLB
IST
DURCH
ETHYLEN
INDUZIERBAR
.124
4.7
CWP
IST
DURCH
JA
INDUZIERBAR
.
126
43
CWP
UND
PRLB
SIND
DURCH
VERWUNDUNG
INDUZIERBAR
.
126
4.9
AUSBLICK.YYYYYY.YY,YY.YYYY.127
5.
ZUSAMMENFASSUNG
.
129
LITERATURVERZEICHNIS
.
131
ANHANG
.
153
1.
NUKLEOTIDSEQUENZEN
VON
CHTAL
UND
CHTA2
154
2.
SEQUENZVERGLEICHE
VON
DH-CDNA-KLONEN
162
3.
NUKLEOTIDSEQUENZEN
DER
DH-CDNA-KLONE
176 |
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