Reinigung und Charakterisierung eines spermienspezifischen Selenoproteins:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
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| Beschreibung: | Berlin, Freie Univ., Diss., 1999 |
| Beschreibung: | 111 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
5
0 ABKUERZUNGEN UND EINHEITEN.
1 AUFGABENSTELLUNG.
2 EINLEITUNG.
2.1 ALLGEMEINES ZUM ELEMENT SELEN.
2.2 SELEN ALS ESSENTIELLES SPURENELEMENT.
2.3 SELENOCYSTEIN ALS 21. AMINOSAEURE.
2.4 SELENOPROTEINE.
2.5 SPERMATOGENESE BEI SAEUGETIEREN.
2.6 SELEN IN DER FORTPFLANZUNG.
3 MATERIALIEN UND METHODEN.
3.1 MATERIALIEN.
3.1.1 VERSUCHSTIERE.
3.1.2 HODENGEWEBE.
3.1.3 CHEMIKALIEN.
3.1.4 PHOSPHATIDVLCHOLINHYDROPEROXID.
3.1.5 "SE-RADIOTRACER.
3.1.6 ANTIKOERPER GEGEN DIE PHGPX.
3.1.7 PEPTID-ANTIKOERPER.
3.2 METHODEN.
3.2.1 NEUTRONENAKTIVIERUNGSANALYSE.
3.2.2 'SE-1 RAEERMESSUNG IM BOHRLOCHDETEKTOR.
3.2.3 'SE-BESTIMMUNG IN ELEKTROPHORESEGELEN.
3.2.4 LN VIVO-MARKIERUNG MIT "SE.
3.2.5 GEWEBEAUFARBEITUNG.
3.2.6 DIFFERENTIALZENTRIFUGATION NACH RICKWOOD UND C HAMBERS.
3.2.7 PRAEPARATION ULTRASCHALLSTABILER SPERMATIDENKERNE (SRS-KERNE)
3.2.8 REINIGUNGSVERFAHREN FUER DAS 34 KD-SELENOPROTEIN.
3.2.9 SDS-PAGE NACH I.AEMMLI.
3.2.10 TRICIN-SDS-PAGE NACH SCHAEGGER UND JAGOW.
3.2.11 2D-ELEKTROPHORESE NACH KLOSE UND JUNGBLUT.
3.2.12 ELEKTROBLOTTING (WESTERNBLOT).
.8
.9
10
10
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13
16
20
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YY
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VI
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27
28
29
29
30
30
3.2.13 ELEKTROELUTION
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/956200079
INHALTSVERZEICHNIS 6
3.2.14 T'OOMASSIETARBUNG VON ACRYLAMIDGELEN.31
3.2.15 SILBERFAERBUNG VON ACRYLAMIDGELEN NACH HEUKESHOVEN.31
3.2.16 SILBERFARBUNG VON ACRYLAMIDGELEN NACH RABILLOUD.31
3.2.17 AMIDOSEHWARZTARBUNG FUER PVDF-MEMBRANEN.32
3.2.18 SILBERFARBUNG VON (ILYKOPROTEINEN .32
3.2.19 FAERBUNG VON GLYKOPROTEINEN MIT DEM SCHIFTSCHEM REAGENZ.32
3.2.20 FAERBUNG VON LIPOPROTEINEN
1-'".33
3.2.21 PROTEOLYSE.33
3.2.22 INKUBATION MIT N-GLYCOSIDASE F.33
3.2.23 UNTERSUCHUNG MIT PROTEINASE K.34
3.2.24 NACHWEIS VON ZUCKERN IN GLYKOPROTEINEN MITTELS EINES
IMMUNOASSAYS.34
3.2.25 MIKROSKOPIE.34
3.2.26 MIKROAUTORADIOGRAPHIE.35
3.2.27 PIIGPX-FNZYMTEST.35
3.2.28 MAFDI-MS.36
3.2.29 N-TERMINALE SEQUENZIERUNG.36
3.2.30 BESTIMMUNG VON SELENOCYSTEIN NACH HAMMEL.37
3.2.3 1 IMMUNOCHEMISCHER ANTIGENNACHWEIS MIT PEPTID-ANTIKOERPERN.37
3.2.32 DATENVERARBEITUNG.38
4 FRGEBNISSE.39
4.1 SELEN IM MAENNLICHEN REPRODUKTIVEN SYSTEM DER RATTE.39
4.1.1 SELENGEHALTE IM REPRODUKTIVEN SYSTEM.39
4.1.2 VERGLEICH DER VERTEILUNG VON NATIVEM SELEN UND DEM SELENTRACER.41
4.1.3 VERTEILUNG DES TRACERS IN ABHAENGIGKEIT VON DER MARKIERUNGSDAUER.42
4.1.4 SELENHALTIGE PROTEINE IM REPRODUKTIVEN SYSTEM DER RATTE.43
4.1.5 SELENHALTIGE PROTEINE IM HODEN.44
4.1.6 ZUSAMMENFASSUNG DER FRGEBNISSE.46
4.2 VERTEILUNG DES SELENHALTIGEN 34 KD-PROTEINS IM REPRODUKTIVEN
SYSTEM.47
4.2.1 LOKALISIERUNG DES SELENHALTIGEN 34 KD-PROTEINS.47
4.2.2 VERGLEICH VON PRAEPUBERTAEREN UND ADULTEN RATTEN.49
4.2.3 V ERTEILUNG IN ABHAENGIGKEIT VOM SELENSTATUS.50
4.2.4 FINILUB DER MARKIERUNGSDAUER AUF DIE VERTEILUNG.54
INHALTSVERZEICHNIS
7
4.2.5 VERGLEICH DER KERNFRAKTIONEN AUS HODEN UND NEBENHODEN.57
4.2.6 ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE.56
4.3 ENTWICKLUNG EINES REINIGUNGSVERFAHREN FUER DAS SELENHALTIGE 34
KD-PROTEIN.61
4.4 CHARAKTERISIERUNG DES SELENHALTIGEN 34 KD-PROTEINS.65
4.4.1 SELENOCYSTEINBESTIMMUNG IM SELENHALTIGEN 34 KD-PROTEIN.65
4.4.2 ERMITTLUNG DER TEILSEQUENZ DES 34 KD-SELENOPROTEINS.66
4.4.3 CHARAKTERISIERUNG DURCH MALDI-MS.67
4.4.4 REAKTION MIT EINEM PHGPX-ANTIKOERPER.73
4.4.5 UNTERSUCHUNG DER ENZYMATISCHEN EIGENSCHAFTEN.74
4.4.6 EOKALISIERUNG DES SPERMIENSPEZIFISCHEN 34 KD-SELENOPROTEINS
INNERHALB DER
SPERMATIDENKERNE.75
4.4.7 VERGLEICH ZWISCHEN PHGPX UND DEM SPERMIENSPEZIFTSCHEN
SELENOPROTEIN.77
4.4.8 ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE.76
4.5 ZERFALL DES SPERMIENSPEZI FISCHEN SELENOPROTEINS.80
4.6 VORKOMMEN DES SPERMIENSPEZIFISCHEN SELENOPROTEINS IN ANDEREN
SPECIES.84
4.6.1 VORKOMMEN DES SPERMIENSPEZIFISCHEN SELENOPROTEINS IN ANDEREN I
IERARTEN.84
4.6.2 VORKOMMEN DES SPERMIENSPEZIFISCHEN SELENOPROTEINS IM MENSCHEN.87
4.6.3 ZUSAMMENFASSUNG.
5 DISKUSSION DER ERGEBNISSE.
ZUSAMMENFASSUNG.
SUMMARY.
EITERATUR.
VORABVEROEFFENTLICHUNGEN .
ERKLAERUNG GEMAESS $6. (4) DER PROMOTIONSORDNUNG
LEBENSLAUF. |
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