Untersuchungen zur Isolierung, Identifizierung und biologischen Charakterisierung von arbuskulären Mykorrhizapilzen:
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1998
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1
EINLEITUNG
1
2
MATERIAL
UND
METHODEN
5
2.1.
VERSUCHSORGANISMEN
5
2.1.1
WIRTSPFLANZEN
5
2.1.2
ERDEN
UND
ANORGANISCHE
KULTURSUBSTRATE
5
2.1.3
MYKORRHIZAPILZE
6
2.1.3.1
HERKUNFT
DER
BODENPROBEN
6
2.1.3.2
ISOLIERUNG
UND
VERMEHRUNG
VON
MYKORRHIZAPILZEN
6
2.1.3.3
ANREICHERUNG
VON
INOKULUM
7
2.1.3.4
INOKULATION
VON
VERSUCHSPFLANZEN
8
2.2
MIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNGEN
9
2.2.1
LICHTMIKROSKOPIE
9
2.2.1.1
DIAGNOSTISCHE
SPORENPRAEPARATE
9
2.2.1.2
ERMITTLUNG
DER
MYKORRHIZIERUNG
9
2.2.1.3
NACHWEIS
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
10
2.2.2
ELEKTRONENMIKROSKOPIE
11
2.2.2.1
ULTRASTRUKTUR
VON
MYKORRHIZAPILZEN
11
2.3
BIOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
12
2.3.1
ISOENZYME
VON
MYKORRHIZAPILZEN
12
2.3.1.1
PROTEINEXTRAKTION
AUS
MYKORRHIZAPILZ-SPOREN
UND
WURZELMATERIAL
12
2.3.1.2
POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
13
2.3.1.3
NACHWEIS
VON
ISOENZYMEN
14
2.3.2
ITS-REGION
DER
RIBOSOMALEN
DNA
VON
MYKORRHIZAPILZ-SPOREN
15
2.3.2.1
DNA-EXTRAKTION
AUS
SPOREN
15
2.3.2.2
POLYMERASEN
KETTENREAKTION
(PCR)
16
2.3.2.3
AUFSCHLUSS
VON
PCR-AMPLIFIZIERTEN
ITS-DNA-FRAGMENTEN
17
2.4
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
18
3
ERGEBNISSE
19
3.1
KULTIVIERUNG
UND
TAXONOMISCHE
DIFFERENZIERUNG
VON
ARBUSKULAEREN
MYKORRHIZAPILZEN
19
3.1.1
MORPHOLOGISCHE
EIGENSCHAFTEN
VON
MYKORRHIZAPILZ-ISOLATEN
19
3.1.1.1
KULTUREN
AUS
WURZELINOKULUM
19
3.1.1.2
KULTUREN
AUS
SPORENINOKULUM
23
3.1.2
DIFFERENZIERUNG
VON
MYKORRHIZAPILZ-SPOREN
NACH
ISOENZYMANALYSE
25
3.1.2.1
MALATDEHYDROGENASEN
VON
MYKORRHIZAPILZ-SPOREN
25
3.1.2.2
ARYLESTERASEN
VON
MYKORRHIZAPILZ-SPOREN
26
3.1.3
DIFFERENZIERUNG
VON
MYKORRHIZAPILZ-SPOREN
NACH
ITS-DNA
AMPLIFIZIERUNG
27
3.1.3.1
DNA-FRAGMENTGROESSEN
NACH
POLYMERASEN
KETTENREAKTION
(PCR)
27
3.1.3.2
ITS-DNA-FRAGMENTGROESSEN
NACH
AUFSCHLUSS
MIT
RESTRIKTIONSENZYMEN
28
3.2
KRITERIEN
FUER
DIE
BEWERTUNG
DES
MYKORRHIZIERUNGSSTATUS
29
3.2.1
MYKORRHIZIERUNG
VON
WURZELN
29
3.2.2
ENZYMAKTIVITAETEN
VON
INTRA-UND
EXTRARADIKALEN
PILZSTRUKTUREN
32
3.2.3
ISOLATSPEZIFISCHE
ISOENZYME
IN
PROTEINEXTRAKTEN
VON
WURZELN
32
3.3
BIOLOGISCHE
CHARAKTERISIERUNG
VON
ARBUSKULAEREN
MYKORRHIZAPILZEN
35
3.3.1
ENTWICKLUNG
EINER
MYKORRHIZIERUNG
35
3.3.1.1
INFEKTIONSBEGINN
35
3.3.1.2
AUSBREITUNG
EINER
MYKORRHIZIERUNG
IM
WURZELSYSTEM
39
3.3.2
MYKORRHIZABILDUNG
BEI
VERSCHIEDENEN
EINFLUSSFAKTOREN
43
3.3.2.1
EINFLUSS
DER
WIRTSPFLANZE
AUF
DIE
ETABLIERUNG
EINER
MYKORRHIZA
43
3.3.2.2
EINFLUSS
DES
WIRTSPFLANZEN-GENOTYPS
AUF
DIE
ETABLIERUNG
EINER
MYKORRHIZA
51
3.3.2.3
EINFLUSS
DES
KULTURSUBSTRATES
AUF
DIE
ETABLIERUNG
EINER
MYKORRHIZA
57
3.3.2.4
ALKALISCHE
PHOSPHATASE-AKTIVITAET
VON
MYKORRHIZAPILZ-ISOLATEN
IN
VERSCHIEDENEN
KULTURSUBSTRATEN
60
3.3.3
EINFLUSS
EINES
AUSGEWAEHLTEN
MYKORRHIZAPILZ-ISOLATES
AUF
DIE
ENTWICKLUNG
VON
ALLIUM
CEPA
IM
FREILAND
63
4
DISKUSSION
70
5
ZUSAMMENFASSUNG
92
6
LITERATUR
94
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