Isolierung und funktionelle Charakterisierung peripherer Stammzellen und Vorläuferzellen des haematopoietischen Systems:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1997
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Schlagworte: | |
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Beschreibung: | Köln, Univ, Diss., 1998 |
Beschreibung: | 161 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
A.
EINLEITUNG
A.1.:
DAS
IMMUNSYSTEM
DER
VERTEBRATEN
1
A.2.:
HAEMATOPOESE
2
A.2.1.:
KLINISCHE
BEDEUTUNG
4
A.2.2.
:
STAMMZELLEN
UND
VORLAEUFERZELLEN
7
A.2.
3.:
FUNKTIONELLE
CHARAKTERISIERUNG
VON
STAMMZELLEN
8
A.2.4.
:
FUNKTIONELLE
CHARAKTERISIERUNG
VON
VORLAEUFERZELLEN
10
A.2.
5.:
WACHSTUMSFAKTOREN,
HORMONE
UND
CYTOKINE
11
A.3.:
MAGNETISCHE
ZELLSORTIERUNG
14
B;
ZIELE
DIESER
ARBEIT
B.1.:
ETABLIERUNG
DER
EFFIZIENTEN
ISOLIERUNG
VON
CD34+
HUMANEN
17
HAEMATOPOIETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
B.2.:
CHARAKTERISIERUNG
VON
PERIPHEREN
CD34+HUMANEN
17
HAEMATOPOIETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
B.3.:
NEUE
FUNKTIONELLE
MARKER
FUER
VORLAEUFERZELLEN:
18
BEKANNTE
MARKER
UND
NEUE
TECHNIKEN
B.4.:
NEUE
FUNKTIONELLE
MARKER
FUER
VORLAEUFERZELLEN:
19
NEUE
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
C:
MATERIAL
UND
METHODEN
C.1.:
MAEUSE,
IMMUNISIERUNGEN
UND
ZELLTRANSFER
20
C.2.:
HUMANE
ZELLEN
UND
ZELLINIEN
20
C.3.:
ZELLFUSIONEN
21
C.4.:
ANTIKOERPER
22
C.4.1.:
ANTIKOERPER
GEGEN
HUMANE
OBERFLAECHENIMMUNGLOBULINE
22
C.4.2.:
ANTIKOERPER
GEGEN
MAUS-OBERFLAECHENMOLEKUELE
22
C.4.3.:
ANTIKOERPER
GEGEN
HUMANE
OBERFLAECHENMOLEKUELE
23
C.4.4.:
REAGENZIEN
ZUR
BLOCKIERUNG
UND
ISOTYPKONTROLLEN
24
C.4.5.:
SEKUNDAERREAGENZIEN
24
SEITE
C.4.6.:
C.4.7.:
ANTIKOERPER
FUER
INTRAZELLULAERE
CYTOKINANALYSEN
ANTIKOERPER
FUER
ELISA
24
24
C.5.:
KOPPLUNG
VON
HAPTENEN,
FLUORESZEIN
UND
PHYCOERYTHRIN
AN
ANTIKOERPER
25
C.6.:
MAGNETOFLUORESZENTE
LIPOSOMEN
26
C.7.:
MAGNETISCHE
ZELLSORTIERUNG
27
C.8.:
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
UND
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNGEN
27
C.8.1.:
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
27
C.8.2.:
OBERFLAECHENANTIGENE
28
C.8.3.:
INTRAZELLULAERE
IMMUNFLUORESZENZ
28
C.9.:
ELISA
29
C.10.:
IMMUNPRAEZIPITATIONEN,
SDS-PAGE,
IMMUNOBLOT
30
C.11.:
"CFU-ASSAY"
UND
FLUESSIG-KULTUREN
31
C.12.:
IN
VITRO
T-ZELL-STIMULATION
32
C.13.:
STANDARDLOESUNGEN
UND
REAGENZIEN
32
D:
_
ERGEBNISSE
D.1.:
ETABLIERUNG
DER
ZELLSORTIERUNG
VON
HUMANEN
CD34+
ZELLEN
33
D.1.1.:
NEUE
REAGENZIEN
33
D.1.2.:
BLOCKIERUNG
UNSPEZIFISCHER
BINDUNG
AN
FC
REZEPTOREN
35
D.1.3.:
MINIMACS
SYSTEM
UND
''EINZELZELLSUSPENSIONEN''
35
D.1.4.:
EFFIZIENZ-KONTROLLE
37
D.1.5.:
ISOLIERUNG
VON
CD34+
ZELLEN
37
D.2.:
CHARAKTERISIERUNG
PERIPHERER
CD34+
ZELLEN
39
D.2.1.:
IMMUNPHAENOTYP
PERIPHERER
CD34+
ZELLEN
39
D.3.:
CHARAKTERISIERUNG
DES
IN
VITRO
DIFFERENZIERUNGS
POTENTIALS
PERIPHERER
CD34+
HAEMATOPOIETISCHER
VORLAEUFERZELLEN
41
D.3.1.
ETABLIERUNG
DES
CFU-TESTS
FUER
PERIPHERE
MACS-ISOLIERTE
CD34+
ZELLEN
41
SEITE
D.3.2.:
IN
VITRO
DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL
VON
SUBPOPULATIONEN
PERIPHERER
CD34+
HAEMATOPOIETISCHER
VORLAEUFERZELLEN
45
D.3.3.:
MEHR-PARAMETER-PHAENOTYPISIERUNG
PERIPHERER
CD34+
ZELLEN
53
D.3.4.:
IN
VITRO
DIFFERENZIERUNGSPOTENTIAL
VON
CD34+
CD45RA
CD71'
HLA-DR
ZELLEN
56
D.4.:
IDENTIFIZIERUNG
UND
FUNTIONELLE
CHARAKTERISIERUNG
PERIPHERER
PRIMITIVER
HAEMATOPOIETISCHER
VORLAEUFERZELLEN
59
D.4.1.:
EXPANSION
VON
HUMANEN
CFU-MIX-VORLAEUFERZELLEN
MIT
H-IL-6
59
D.4.2.:
EXPANSION
VON
MAUS-STAMMZELLEN
UND
ZELLTRANSFER
B
UND
T
ZELL-DEPLETIERTER
ZELLEN
IN
IMMUNDEFIZIENTE
SCID-MAUS-REZIPIENTEN
63
D.5.:
CYTOKINREZEPTOREN
ALS
NEUE
MARKER
FUER
STAMMZELLEN
UND
VORLAEUFERZELLEN
68
D.5.1.:
DREI-PARAMETER
ANALYSEN
DER
EXPRESSION
VON
G-CSF-,
EPO-,
IL-3
UND
IL-6-REZEPTOR
AUF
PERIPHEREN
CD34+
ZELLEN
69
D.5.2.:
FUNKTIONELLE
CHARAKTERISIERUNG
VON
IL-6-R+
CD34+
ZELLEN
73
D.6.:
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
GEGEN
NEUE,
UNBEKANNTE
ANTIGENE
AUF
CD34
+
HAEMATOPOIETISCHEN
VORLAEUFERZELLEN
78
D.6.1.:
IMMUNISIERUNGEN
78
D.6.2.:
ELISA-SCREEN
UND
FACSCAN-SCREEN
VON
HYBRIDOMUEBERSTAENDEN
80
D.6.3.:
FACSCAN-SCREEN
NACH
NP-KONJUGATION
VON
ANTIKOERPERN
82
D.6.4.:
IMRRIUNPRAEZIPITATION
MIT
MOAB
156.15
85
D.7.:
PHAENOTYPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
VON
CD31
+
UND
CD31
CD19+
B-ZELLEN
89
D.7.1.:
DREI-PARAMETER-ANALYSEN
VON
CD31+
UND
CD31
CD19+
B-ZELLEN
89
D.8.:
PHAENOTYPISCHE
UND
FUNKTIONELLE
ANALYSE
VON
CD31+
UND
CD31
CD4+
T-ZELLEN
93
D.8.1:
DREIPARAMETER
ANALYSEN
VON
CD31+
UND
CD31
CD4+
T-ZELLEN
93
SEITE
D.8.2.:
CYTOKIN-POTENTIAL
VON
CD31+UND
CD31
-
CD4+T-ZELLEN
101
E:
DISKUSSION
E.1.:
ISOLIERUNG
VON
CD34+VORLAEUFERZELLEN
MIT
MAGNETISCHER
105
ZELLSORTIERUNG
E.1.1.:
CHARAKTERISIERUNG
VON
CD34+ZELLEN
AUS
"NORMALEM"
109
PERIPHEREN
BLUT
E.2.:
"
NEUE-ALTE"
MARKER
FUER
SUBPOPULATIONEN
PERIPHERER
113
VORLAEUFERZELLEN:'CHARAKTERISIERUNG
VON
DURCH
MAGNETISCHE
MEHR-PARAMETER-SORTIERUNG
ISOLIERTEN
CD34+
SUBPOPULATIONEN
E.3.:
EX
VIVO
EXPANSION
PRIMITIVER
CD34+
ZELLEN
MIT
H-IL-6
118
E.4.:
CYTOKINREZEPTOREN
ALS
NEUE
FUNKTIONALE
MARKER
FUER
125
SUBPOPULATIONEN
VON
CD34+
VORLAEUFERZELLEN
E.4.1.:
INTERLEUKIN
6:
EIN
"EARLY
ACTING
CYTOKINE"
?
126
E.5.:
NEUE
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
GEGEN
CD34+ZELLEN:
130
CD62L,
CD31
?
E.6.:
CD31
ALS
MARKER
FUER
ANTIGEN-UNERFAHRENEB-UND
TH-ZELLEN
132
E.6.1.:
CD31+UND
CD3T
LGG
+
GEDAECHTNIS-B-ZELLEN
132
E.6.2.:
CD31"
CD45RA+
TH-ZELLEN:
SPEZIFISCHE
TH-ZELLEN
?
134
E.6.3.:
IFN-Y
PRODUZIERENDE
CD45RA+CD4+T-ZELLEN
SIND
136
CD31
NEGATIV
F:
ZUSAMMENFASSUNG
141
G:
LITERATUR
143
DANKSAGUNGEN
157 |
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