Induktion immunregulatorischer Zytokine durch Borrelia burgdorferi:
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1998
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INHALTSVERZEICHNIS
LISTE DER IN DER ARBEIT VERWENDETEN ABKUERZUNGEN
SEITE
1. EINLEITUNG 1
1.1. DEFINITION UND HISTORISCHER UEBERBLICK 1
1.2.
B. BURGDORFERI - DER ERREGER DER LYME-BORRELIOSE 3
1.3. DIE LYME-BORRELIOSE 6
1.3.1. EPIDEMIOLOGIE 6
1.3.2. PATHOGENESE 8
1.3.3. KLINIK DER LYME-BORRELIOSE 9
1.3.3.1. STADIUM I - FRUEHE LOKALISIERTE ERKRANKUNG 10
1.3.3.2. STADIUM II - FRUEHE DISSEMINIERTE ERKRANKUNG 12
1.3.3.3. STADIUM III - CHRONISCHE ERKRANKUNG 12
1.3.4. THERAPIE DER LYME-BORRELIOSE 13
1.3.5. DIAGNOSTIK 15
1.4. IMMUNANTWORT BEI INFEKTION MIT
B. BURGDORFERI 17
1.4.1. PHAGOZYTOSE 17
1.4.2. DENDRITISCHE ZELLEN 19
1.4.3. T-ZELL-ANTWORT ALS AUSDRUCK DER SPEZIFISCHEN INFEKTIONSABWEHR 21
1.4.4. B-ZELL-ANTWORT ALS AUSDRUCK DER SPEZIFISCHEN INFEKTIONSABWEHR 23
1.4.5. CHRONIFIZIERUNG 24
1.5. ZYTOKINE UND DEREN BEDEUTUNG BEI DER IMMUNANTWORT 25
1.5.1. PROINFLAMMATORISCHE ZYTOKINE 25
1.5.2. IMMUNREGULATORISCHE ZYTOKINE 26
2. FRAGESTELLUNG UND ZIEL DIESER STUDIE
29
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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SEITE
3. PROBANDEN UND METHODEN 31
3.1. PROBANDEN 31
3.1.1. PATIENTEN MIT LYME-BORRELIOSE 31
3.1.2. NORMALSPENDER 31
3.1.3. PATIENTENDATENERHEBUNG UND DIAGNOSTISCHE KRITERIEN 32
3.2.
IN VITRO KULTIVIERUNG VON B. BURGDORFERI 32
3.3. ZELLKULTUR 33
3.3.1. ISOLIERUNG MONONUKLEAERER ZELLEN AUS DEM PERIPHEREN BLUT UND
SERUMPRAEPARATION 33
3.3.2. ISOLIERUNG UND ANZUECHTUNG VON MODC 34
3.4. BESTIMMUNG VON ZYTOKINEN IM UEBERSTAND KULTIVIERTER MONO
NUKLEAERER ZELLEN (PBMC) MITTELS ELISA 35
3.4.1. PRINZIP DES ELISA 35
3.4.2. VERWENDETE ANTIGERIE BZW. MITOGENE 36
3.4.2.1.
B. BURGDORFERI 36
3.4.2.2.
TREPONEMA PHAGEDENIS 37
3.4.2.3. PHYTHAEMAGGLUTININ (PHA) 37
3.4.3. TESTANSATZ 37
3.4.4. AUSWERTUNG 39
3.5. BESTIMMUNG DER TH1/ TH2 - IMMUNANTWORT AUF BORRELIEN
ANTIGENE MITTELS DURCHFLUSSZYTOMETRIE 40
3.5.1. PRINZIP DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE 40
3.5.1.1. GERAETEBESCHREIBUNG 41
3.5.1.2. DARSTELLUNG DER MESSDATEN 41
3.5.2. TESTANSATZ 42
3.5.3. AUSWERTUNG 43
3.6. BESTIMMUNG IMMUNREGULATORISCHER ZYTOKINE IM UEBERSTAND
VON MODC 44
3.6.1. VERWENDETE ANTIGENE 45
3.6.2. TESTANSATZ 45
3.6.3. AUSWERTUNG 46
3.7. STATISTIK 46
SEITE
4. ERGEBNISSE 47
4.1. INDUKTION IMMUNREGULATORISCHER ZYTOKINE 47
4.1.1. ZYTOKINPRODUKTION DURCH MONONUKLEAERE ZELLEN (PBMC) 47
4.1.1.1. IMMUNANTWORT AUF STIMULATION MIT DEM B. A/ZE//7'-STAMM PKO 47
4.1.1.1.1. INDUKTION DER IFNY-PRODUKTION 47
4.1.1.1.2. INDUKTION DER IL-12-PRODUKTION 48
4.1.1.1.3. INDUKTION DER IL-4-PRODUKTION 50
4.1.1.1.4. INDUKTION DER IL-10-PRODUKTION 51
4.1.1.2. IMMUNANTWORT AUF STIMULATION MIT DEM
B. BURGDORFERI SENSU
STRICTO-STAMM LW2 53
4.1.1.2.1. INDUKTION DER IFNY-PRODUKTION 53
4.1.1.2.2. INDUKTION DER IL-12-PRODUKTION 54
4.1.1.2.3. INDUKTION DER IL-4-PRODUKTION 55
4.1.1.2.4. INDUKTION DER IL-10-PRODUKTION 56
4.1.1.3. IMMUNANTWORT AUF STIMULATION MIT DEM
B. GARINII-STAMM 387 58
4.1.1.3.1. INDUKTION DER IFNY-PRODUKTION 58
4.1.1.3.2. INDUKTION DER IL-12-PRODUKTION 58
4.1.1.3.3. INDUKTION DER IL-4-PRODUKTION 59
4.1.1.3.4. INDUKTION DER IL-10-PRODUKTION 60
4.1.1.4 ZELLULAERE IMMUNANTWORT AUF STIMULATION MIT
TREPONEMA
PHAGEDENIS
62
4.1.1.4.1. INDUKTION DER IFNY-PRODUKTION 62
4.1.1.4.2. INDUKTION DER IL-12-PRODUKTION 63
4.1.1.4.3. INDUKTION DER IL-4-PRODUKTION 63
4.1.1.4.4. INDUKTION DER IL-10-PRODUKTION 63
4.1.2. ZYTOKINPRODUKTION DURCH MODC 64
4.1.2.1. INDUKTION DER IL-12-PRODUKTION 64
4.1.2.2. INDUKTION DER IL-10-PRODUKTION 65
4.2. NACHWEIS HELFERZELL-SPEZIFISCHER ZYTOKINE MITTELS DER INTRA
ZELLULAEREN ZYTOKINFAERBUNG (ICS) 66
4.2.1. ETABLIERUNG DER INTRAZELLULAEREN ZYTOKINFAERBUNG 67
SEITE
4.2.2. ZYTOKINPRODUKTION CD3+ZELLEN NACH STIMULATION MIT DEM
B. BURGDORFERI
SENSU STRICTO-STAMM LW2 67
4.2.2.1. INDUKTION DER IFNY-PRODUKTION 67
4.2.2.2. INDUKTION DER IL-4-PRODUKTION 69
4.3.
IN VITRO GENERATION VON DENDRITISCHEN ZELLEN (MODC) AUS
ADHAERENTEN ZELLEN DES PERIPHEREN BLUTES ~ 71
4.3.1. KULTIVIERUNG DER ZELLEN 71
4.3.2. EXPRESSION VON CD1A, CDM UND HLA-DR AUF DER OBERFLAECHE
STIMULIERTER UND UNSTIMULIERTER ZELLEN 75
4.4. ZUSAMMENFASSUNG DER ERGEBNISSE 77
5. DISKUSSION 82
5.1. KRITIK DER METHODEN 82
5.1.1. ZYTOKINBESTIMMUNG MITTELS ELISA 84
5.1.2. DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ANALYSE 84
5.1.3. GENERATION DENDRITISCHER ZELLEN 85
5.2. INTERPRETATION DER ERGEBNISSE 87
6. ZUSAMMENFASSUNG 115
7. TABELLEN 118
8. LITERATURVERZEICHNIS 125
9. DANKSAGUNG 136
10. EIDESSTATTLICHE ERKLAERUNG 137
11. LEBENSLAUF 138 |
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