Die Bedeutung der MAP-Kinase für die Insulinsekretion und Proliferation von INS-1-Zellen: Rolle von Glucose und Agonisten von G-Protein gekoppelten Rezeptoren
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1999
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| Beschreibung: | Münster, Univ., Diss., 1999 |
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INHALTSVERZEICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
MAP-KINASE
1
1.1.1
HISTORISCHE
EINFUEHRUNG
1
1.1.2
STRUKTUR
UND
FUNKTION
DER
MAP-KINASEN
1
1.2
MAP-KINASE-KASKADE
2
1.3
MAP-KINASE-KASKADE
VON
REZEPTOR-TYROSINKINASEN
4
1.4
MAP-KINASE-KASKADE
VON
G-PROTEIN
GEKOPPELTEN
REZEPTOREN
5
1.4.1
G
8
7
1.4.2
GIUNDGQ
8
1.4.3
G
O
12
1.4.4
HEMMUNG
DER
MEK
12
1.4.5 FUNKTION
UND
HEMMUNG
DER
PI3-KINASE
13
1.4.6
FUNKTION
UND
HEMMUNG
VON
TYROSINKINASEN
15
1.4.7 FUNKTION
UND
HEMMUNG
DER
PROTEINKINASE
C
17
1.5
INSULINSEKRETION
19
1.5.1
GLUCOSEINDUZIERTE
INSULINSEKRETION
19
1.5.2
MODULATOREN
DER
INSULINSEKRETION
20
1.5.2.1
GRP
20
1.5.2.2
OXYTOCIN
22
1.5.2.3
GIP
24
1.6
WACHSTUM
DER
SS-ZELLMASSE
25
1.6.1
NEOGENESE
26
1.6.2
PROLIFERATION
26
1.6.2.1
STIMULATOREN
DER
PROLIFERATION
27
1.6.2.2
INHIBITOREN
DER
PROLIFERATION
29
1.6.2.3
AN
DER
PROLIFERATION
BETEILIGTE
MEDIATOREN
29
1.7
FRAGESTELLUNG
DER
ARBEIT
31
2
MATERIAL
32
2.1
ZELLINIE
INS-1
32
2.2
GERAETE
UND
PROGRAMME
32
2.3 CHEMIKALIEN,
KITS
UND
ENZYME
32
INHALTSVERZEICHNIS
II
2.4
LOESUNGEN
35
2.4.1
ZELLKULTUR
35
2.4.2
PROLIFERATIONSASSAY
35
2.4.3
IMMUNPRAEZIPITATION
35
2.4.4
PROTEINBESTIMMUNG
36
2.4.5
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
UND
BLOTTING
37
2.4.6
MICRO-TRAP-ASSAY
37
2.4.7
INSULINSEKRETIONSVERSUCHE
38
2.4.8
STAMMLOESUNGEN
FUER
DIE
INKUBATION
39
3
METHODEN
40
3.1
IMMUNPRAEZIPITATION
40
3.2
PROTEINBESTIMMUNG
41
3.3
POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(PAGE)
UND
BLOTTING
42
3.4
MICRO-TRAP-ASSAY
43
3.4.1
TESTPRINZIP
43
3.4.2
DURCHFUEHRUNG
44
3.4.3
METHODENDISKUSSION
46
3.5
VERSUCHE
ZUR
INSULINSEKRETION
47
3.6
[
3
H]THYMIDINEINBAU
48
3.6.1
TESTPRINZIP
48
3.6.2
DURCHFUEHRUNG
48
3.6.3
METHODENDISKUSSION
49
3.7
STATISTIK
49
4
ERGEBNISSE
50
4.1
ZEITABHAENGIGER
EINFLUSS
VON
GLUCOSE,
GRP,
OXYTOCIN
UND
GIP
AUF
DIE
AKTIVITAET
DER
MAP-KINASE.
51
4.2
SIGNALTRANSDUKTION
DER
AKTIVIERUNG
DER
MAP-KINASE
DURCH
GLUCOSE,
GRP,
OXYTOCIN
UND
GIP
53
4.2.1
EINFLUSS
DES
MEK-INHIBITORS
PD
098059
53
4.2.2
EINFLUSS
VON
PERTUSSISTOXIN
57
4.2.3
EINFLUSS
VON
TYROSINKINASEINHIBITOREN
58
4.2.4
EINFLUSS
DES
PI3-KINASEINHIBITORS
WORTMANNIN
60
4.2.5
EINFLUSS
VON
PMA
62
INHALTSVERZEICHNIS
III
4.3
BETEILIGUNG
DER
MAP-KINASE
AN
DER
INSULINSEKRETION
63
4.4
BETEILIGUNG
DER
MAP-KINASE
AN
DER
PROLIFERATION
63
5
DISKUSSION
69
5.1
VORKOMMEN
DER
MAP-KINASE-ISOENZYME
ERK1
UND
ERK2
69
5.2
AKTIVIERUNG
DER
MAP-KINASE
DURCH
G-PROTEIN
GEKOPPELTE
REZEPTOREN
69
5.3
ZEITABHAENGIGE
AKTIVIERUNG
DER
MAP-KINASE
71
5.4
SIGNALTRANSDUKTION
DER
AKTIVIERUNG
DER
MAP-KINASE
74
5.4.1
MEK
74
5.4.2
G-PROTEINE
74
5.4.3
TYROSINKINASE
78
5.4.4
PI3-KINASE
80
5.4.5
PROTEINKINASE
C
82
5.5
DIE
ROLLE
DER
MAP-KINASE
BEI
DER
INSULINSEKRETION
84
5.6
DIE
ROLLE
DER
MAP-KINASE
BEI
DER
PROLIFERATION
85
6
ZUSAMMENFASSUNG
90
7
LITERATURVERZEICHNIS
92 |
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