Analyse der Zellbewegung und Zell-Zell-Kommunikation während der Morphogenese von Dictyostelium:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1998
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ANALYSE DER ZELLBEWEGUNG UND
ZELL-ZELL-KOMMUNIKATION WAEHREND DER
MORPHOGENESE VON DICTYOSTELIUM
DISSERTATION
DER FAKULTAET FUER BIOLOGIE DER
LUDWIG-MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN
ZUR ERLANGUNG DES GRADES
DOKTOR DER NATURWISSENSCHAFTEN, DR. RER. NAT.
VORGELEGT VON
DIRKDORMANN
MUENCHEN, JULI 1998
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
EINLEITUNG 1
MATERIAL UND METHODEN 18
1.1 MEDIEN UND PUFFER 18
1.2 ZELLSTAEMME UND KULTURBEDINGUNGEN 18
1.2.1 AXENISCHE STAEMME 18
1.2.2 KULTIVIERUNG VON DICTYOSTELIUM MUCOROIDES 19
1.2.3 KONSERVIERUNG VON ZELLEN UND SPOREN 19
1.3 INDUKTION DER ENTWICKLUNG - ANSETZEN DER EXPERIMENTE 20 1.3.1
HERSTELLUNG VON WELLEN-PLATTEN ZUR BEOBACHTUNG DER DUNKELFELDWELLEN 20
1.3.2 ANSETZEN VON DICTYOSTELIUM MUCOROIDES SLUGS 21
NEUTRALROTFOERBUNG 21
LADEN DER ZELLEN MIT FITC-DEXTRAN 21
MARKIERUNG MIT CELL TRACKER 21
1.3.3 SORTIERUNGSEXPERIMENTE MIT DEN CAMP-REZEPTORMUTANTEN 22
1.4 VIDEOMIKROSKOPIE 22
1.4.1 DUNKELFELDMIKROSKOPIE 22
1.4.2 HELLFELDMIKROSKOPIE - OPTISCHE DICHTEWELLEN IN MOUNDS 23 1.4.3
VERSUCHSAUFBAU FUER DICTYOSTELIUM MUCOROIDES 23
1.5 ANALYSE DER BILDSEQUENZEN 24
1.5.1 TIME-SPACE-PLOTS 24
1.5.2 BILDSUBTRAKTION 25
1.5.3 BILDMULTIPLIKATION 25
1.5.4 EINZELZELLVERFOLGUNG 26
1.5.5 VEKTORFELDANALYSE 27
TEIL A - EINFLUSS DER CAMP-REZEPTORAFFLNITAET AUF DIE WELLENFORTLEITUNG
WAEHREND DER ENTWICKLUNG VON DICTYOSTELIUM 28
ERGEBNISSE 28
1. ANALYSE DES ELTERNSTAMMES DH1 28
1.1 DUNKELFELDWELLEN 28
1.2 OPTISCHE DICHTEWELLEN IM MOUNDSTADIUM 32
2. ANALYSE DER CAMP-REZEPTORMUTANTEN 37
2.1 WELLENFORTLEITUNG DER CAR-MUTANTEN IN DER FRUEHEN AGGREGATION 38 2.2
EFFEKT DER CAMP-REZEPTORAFFINITAET AUF DIE WELLENGEOMETRIE IM
MOUNDSTADIUM43 2.3 QUANTITATIVE UNTERSCHIEDE IN DER WELLENFORTLEITUNG -
GESCHWINDIGKEIT 47
2.4 QUANTITATIVE UNTERSCHIEDE IN DER WELLENFORTLEITUNG - PERIODE 52 2.5
SORTIERUNGSEXPERIMENTE 54
IMAGE 3
DISKUSSION. 59
1. GEOMETRIE DER DUNKELFELDWELLEN 61
2. GEOMETRIE DER OPTISCHEN DICHTEWELLEN IM MOUNDSTADIUM 64
3. REZEPTORAFFINITAET UND WELLENGESCHWINDIGKEIT 67
4. REZEPTORAFFINITAET UND WELLENPERIODE 70
5. EFFEKT DER REZEPTORAFFINITAET AUF DIE ZELLDIFFERENZIERUNG 70
TEIL B - ZELLBEWEGUNG UND WELLENFORTLEITUNG WAEHREND DER ENTWICKLUNG VON
DICTYOSTELIUM MUCOROIDES 72
ERGEBNISSE 72
1. AGGREGATION UND MOUNDBILDUNG 72
1.1 DUNKELFELDWELLEN 73
1.2 MOUNDSTADIUM 75
1.3 KOAGGREGATION VON D. MUCOROIDES UND D. DISCOIDEUM 77
2. SLUGSTADIUM 80
2.1 MORPHOLOGIE VON DICTYOSTELIUM MUCOROIDES SLUGS 80
2.2 ANALYSE DER ZELLBEWEGUNG 80
2.3 PERODISCHE TIPBEWEGUNG 86
2.4 DUNKELFELDWELLEN IN SLUGS 87
2.5 BEZIEHUNG ZWISCHEN TIPBEWEGUNG UND WELLEN 90
2.6 COMPUTERSIMULATION ZUR ENTSTEHUNG VON PLANARWELLEN 91
DISKUSSION. 93
1. AGGREGATION UND MOUNDBILDUNG IN D. MUCOROIDES 93
2. EINE TWISTED-SCROLL CAMP-WELLE KOORDINIERT DIE ZELLBEWEGUNG IN D.
MUCOROIDES SLUGS 94
3. PERIODISCHE EREIGNISSE IN D. MUCOROIDES SLUGS - TIPBEWEGUNG 96
4. PERIODISCHE EREIGNISSE IN D. MUCOROIDES SLUGS - WELLEN 97
ZUSAMMENFASSUNG 100
LITERATURVERZEICHNIS 102
DANKSAGUNG 111
CURRICULUM VITAE 112
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