Membranordnung und multiple Chemoresistenz bei Tumorzellen: Untersuchungen an Chinese Hamster Ovary- und Harnblasenkarzinomzellinien mittels Elektronen-Paramagnetischer Resonanzspektroskopie
Gespeichert in:
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1998
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5
INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
1.1.
HISTORISCHER
RUECKBLICK
9
1.2.
MEHRFACH-RESISTENZ
9
1.2.1.
P
170-GLYKOPROTEIN-ASSOZIIERTE
KLASSSISCHE
11
MEHRFACH-RESISTENZ
1.2.2.
P
170-GLYKOPROTEIN
IM
NORMALEN
GEWEBE
13
1.2.3.
MODULATION
DER
P
170-GP
ASSOZIIERTEN
MEHRFACH
14
RESISTENZ
1.2.4.
ROLLE
DES
CALCIUMS
BEI
DER
MODULATION
DER
15
TYPISCHEN
MEHRFACH-RESISTENZ
1.3.
ATYPISCHE
MDR
15
1.4.
MDR
AUFGRUND
VERAENDERUNGEN
BIOPHYSIKALISCHER
17
MEMBRANEIGENSCHAFTEN
1.5.
DAS
HAMBLASENKARZINOM
20
1.6.
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
20
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
2.1.
MATERIAL
22
2.1.1.
ZELLINIEN
22
2.1.1.1.
CHINESE
HAMSTER
OVARY-ZELLEN
(CHO)
22
ALS
MDR
ZELLEN
2.1.1.2.
HUMANE
HAMBLASENKARZINOMZELLINIE
22
RT112
2.1.1.3.
DOXORUBICIN-RESISTENTE
HUMANE
23
HAMBLASENKARZINOMZELLINIE
RT
1
12/D21
2.1.2.
MEMBRANMODULATOREN
24
2.1.2.1.
R-VERAPAMIL
24
2.I.2.2.
GALLENSAEUREN
TCDC
UND
TUDC
26
2.1.2.3.
DIPYRIDAMOL
27
2.1.3.
NAEHRMEDIEN
UND
CHEMIKALIEN
FUER
DIE
ZELLKULTUR
28
2.1.3.1.
NAEHRMEDIEN
29
2.1.3.2.
CHEMIKALIEN
29
6
2.1.4.
CHEMIKALIEN
FUER
DIE
RT-POLYMERASE-KETTENREAKTION
29
(RT-PCR)
2.1.5.
CHEMIKALIEN
FUER
DIE
ELEKTRONEN-PARAMAGNETISCHE
31
RESONANZ-SPEKTROSKOPIE
(EPR)
2.1.6.
ZYTOSTATIKA
32
2.1.7.
MEMBRANMODULATOREN
32
2.1.8.
REAGENZIEN
FUER
DIE
DUENNSCHICHT-UND
32
GASCHROMATOGRAPHIE
2.1.9.
GERAETE
33
2.2.
METHODEN
36
2.2.1.
KULTIVIERUNG
DER
ZELLINIEN
36
2.2.1.1.
KULTUR
DER
CHO-ZELLEN
36
2.2.1.2.
KULTUR
VON
RT
11
2-ZELLEN
37
2.2.1.3.
KULTUR
DER
HUMANEN
38
HAMBLASENKARZINOMZELLINIE
RT
112/D21
2.2.2.
REVERSE
TRANSKRIPTION-POLYMERASE-KETTENREAKTION
38
2.2.3.
STANDARDISIERUNG
DER
VERSUCHSBEDINGUNGEN
43
2.2.3.1.
ERSTELLUNG
EINER
WACHSTUMSKURVE
43
2.2.3.2.
PH-MESSUNG
IM
KULTURMEDIUM
44
2.2.3.3.
MIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
ZELLEN
45
2.2.3.4.
ZELLVITALITAETSPRUEFUNG
MIT
TRYPANBLAU
45
2.2.4.
VORBEHANDLUNG
DER
MEMBRANMODULATOREN
45
2.2.5.
MORPHOLOGISCHE
KONTROLLEN
VOR
EPR
46
EXPERIMENTEN
2.2.6.
ELEKTRONEN-PARAMAGNETISCHE
47
RESONANZSPEKTROSKOPIE
(EPR)
2.2.7.
CHROMATOGRAPHISCHE
BESTIMMUNG
VON
FETTSAEUREN
58
3.
ERGEBNISSE
3.1.
PROLIFERATIONSKURVEN
DER
CHO-ZELLEN
66
3.1.1.
WACHSTUMSKURVE
DER
SENSITIVEN
PARENTALEN
66
AUXBL-ZELLINIE
3.1.2.
WACHSTUMSKURVE
DER
RESISTENTEN
CH*C5-SUBLINIE
67
7
3.2.
PH-MESSUNG
IM
KULTURMEDIUM
68
3.3.
MIKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
MORPHOLOGIE
DER
CHO
69
ZELLEN
3.4.
RT-POLYMERASE-KETTENREAKTION
73
3.5.
EINFLUSS
VON
R-VERAPAMIL,
TCDC,
TUDC
UND
74
DIPYRIDAMOL
AUF
DIE
ZELLMORPHOLOGIE
3.6.
EPR-SPEKTROSKOPIE
74
3.6.1.
EPR-SPEKTROSKOPIE
DER
CHO
ZELLEN
74
3.6.1.1.
STANDARDISIERUNG
DER
EPR-MESSUNGEN
74
3.6.1.2.
NATIVER
ORDNUNGSPARAMETER
S
DER
CHO
76
ZELLEN
3.6.1.3.
EPR-SPEKTROSKOPIE
DER
CHO
ZELLEN
MIT
78
R-VERAPAMIL
3.6.1.4.
EPR-SPEKTROSKOPIE
DER
CHO
ZELLEN
MIT
79
DEN
GALLENSAEUREN
TCDC
UND
TUDC
3.6.1.4.1.
WIRKUNG
VON
TCDC
AUF
DEN
79
ORDNUNGSPARAMETER
S
3.6.1.4.2.
WIRKUNG
VON
TUDC
AUF
DEN
80
ORDNUNGSPARAMETER
S
3.6.2.
EPR-SPEKTROSKOPIE
DES
NATIVEN
81
ORDNUNGSPARAMETERS
S
DER
RT
112
ZELLEN
3.6.3.
EPR-SPEKTROSKOPIE
DER
RT
112/D21
83
HAMBLASENKARZINOMZELLINIE
3.6.3.1.
NATIVE
ORDNUNGSPARAMETER
DER
83
RT
U2/D21-ZELLEN
3.6.3.2.
EPR-SPEKTROSKOPIE
DER
RT
112/D21
MIT
84
DIPYRIDAMOL
3.7.
GASCHROMATOGRAPHIE
85
3.7.1.
CHROMATOGRAPHISCHE
AUFTRENNUNG
DER
GESAETTIGTEN
86
UND
UNGESAETTIGTEN
FETTSAEUREN
3.7.2.
FETTSAEUREN-ZUSAMMENSETZUNG
DER
ZELLMEMBRAN
DER
87
CHO-ZELLEN
3.7.3.
VERAENDERUNGEN
DER
FETTSAEURENZUSAMMENSETZUNG
88
DER
ZELLMEMBRAN
DURCH
R-VERAPAMIL
3.7.4.
WIRKUNG
DER
GALLENSAEUREN
TCDC
UND
TUDC
AUF
89
DIE
FETTSAEURENZUSAMMENSETZUNG
DER
ZELLMEMBRAN
DER
CHO-ZELLEN
3.7.4.1.
VERAENDERUNG
DER
FETTSAEURENZUSAMMENSETZUNG
89
NACH
INKUBATION
MIT
TCDC
3.7.4.2.
VERAENDERUNG
DER
FETTSAEURENZUSAMMENSETZUNG
90
NACH
INKUBATION
MIT
TUDC
4.
DISKUSSION
4.1.
EINFLUSS
VON
ZELLKULTURPARAMETEM
UND
MESSTEMPERATUR
AUF
91
DIE
EPR-MESSUNGEN
4.2.
ZELLMEMBRANVERAENDERUNGEN
BEI
CHEMORESISTENTEN
CHO
92
ZELLEN
4.3.
ZELLMEMBRANVERAENDERUNGEN
BEI
MEHRFACH-RESISTENTEN
94
HAMBLASENKARZINOMZELLEN
4.4.
WIRKUNG
VON
CHEMOSENSITIZEM
AUF
DIE
MEMBRANORDNUNG
95
4.5.
VERAENDERUNG
DER
FETTSAEUREZUSAMMENSETZUNG
DER
MEMBRAN
98
UND
EINFLUSS
DER
GALLENSAEUREN
TCDC
UND
TUDC
AUF
DIE
MEMBRANSTRUKTUR
4.6.
SCHLUSSFOLGERUNG
102
5.
ZUSAMMENFASSUNG
103
6.
SUMMARY
105
7.
LITERATURVERZEICHNIS
106
8.
TABELLENANHANG
150
9.
ABKUERZUNGEN
164
DANKSAGUNG
166
VEROEFFENTLICHUNGEN
168
LEBENSLAUF
170
EHRENWOERTLICHE
ERKLAERUNG
172 |
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