Herstellung und Charakterisierung monoklonaler Antikörper gegen die Pankreaselastase 1 des Hundes zur Entwicklung eines ELISA für die Pankreasdiagnostik:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Giessen
Fachverl. Köhler
1998
|
Schriftenreihe: | Veterinärmedizin
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Schlagworte: | |
Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
Beschreibung: | 92 S. Ill., graph. Darst. |
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SEITE
INHALT
1
EINLEITUNG
1
1.1
FUNKTION
DES
PANKREAS
1
1.2
ERKRANKUNGEN
DES
PANKREAS
2
1.2.1
DIE
AKUTE
PANKREATITIS/
PANKREASNEKROSE
2
1.2.2
DIE
CHRONISCHE
PANKREATITIS
6
1.2.3
PANKREASTUMOREN
7
1.2.4
DIE
EXOKRINE
PANKREASINSUFFIZIENZ
(EPI)
7
1.2.4.1
DIE
MORPHOLOGISCH
BEDINGTE
EPI
7
1.2.4.2
DIE
FUNKTIONELL
BEDINGTE
EPI
8
1.2.4.3
SYMPTOME
EINER
EPI
8
1.2.4.4
FOLGEN
EINER
EPI
9
1.2.4.5
ANDERE
URSACHEN
FUER
EINE
MALASSIMILATION
10
1.2.4.6
SYMPTOME
EINER
DUENNDARMERKRANKUNG
11
1.3
ZUR
ZEIT
ANGEWANDTE
METHODEN
IN
DER
DIAGNOSTIK
DER
EXOKRINEN
PANKREASINSUFFIZIENZ
12
1.3.1
DIE
BLUTUNTERSUCHUNG
12
1.3.2
DIE
KOTUNTERSUCHUNG
14
1.3.3
PANKREASFUNKTIONSTESTS
17
1.3.4
PHYSIKALISCHE
UNTERSUCHUNGSMOEGLICHKEITEN
18
1.4
DIE
EINTEILUNG
DER
ELASTASEN
19
1.5
AUFBAU
UND
BILDUNG
VON
ANTIKOERPERN
20
1.6
MONOKLONALE
ANTIKOERPER
21
1.7
AUFGABENSTELLUNG
UND
ZIEL
23
2
MATERIAL
UND
METHODEN
24
2.1
MATERIAL
24
2.1.1
VERSUCHSTIERE
24
2.1.2
PANKREASENZYME
24
2.1.3
ZELLEN
24
2.1.4
CHEMIKALIEN
24
2.1.5
GERAETE
UND
VERBRAUCHSMATERIALIEN
28
2.2
METHODEN
29
2.2.1
IMMUNISIERUNG
UND
BESTIMMUNG
DES
ANTIKOERPERTITERS
DER
VERSUCHSTIERE
29
2.2.2
HERSTELLUNG
MONOKLONALER
ANTIKOERPER
30
2.2.2.1
MEDIEN
30
2.2.2.2
FEEDERZELLEN
30
2.2.2.3
FUSION
DER
MILZ-UND
MYELOMZELLEN
ZU
HYBRIDOMZELLEN
31
2.2.2.4
KULTIVIERUNG
DER
HYBRIDOMZELLEN
UND
VEREINZELUNG
DER
ZELLKLONE
32
2.2.2.5
MASSENPRODUKTION
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
34
2.2.3
PROTEINBESTIMMUNG
34
2.2.4
HPLC-REINIGUNG
DER
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
35
2.2.5
BIOTINYLIERUNG
36
2.2.6
ELISA
37
2.2.6.1
ELISA
ZUR
AUSWAHL
SPEZIFISCHER
ANTIKOERPER
UND
ZUR
UEBERPRUEFUNG
IHRER
AKTIVITAET
NACH
DER
REINIGUNG
37
2.2.6.2
ELISA
ZUR
IGG-BESTIMMUNG
38
2.2.6.3
ELISA
ZUR
ANWENDUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
39
2.2.7
IMMUNGLOBULINKLASSENBESTIMMUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
40
2.2.8
POLYACRYLAMIDGEL
(PAGE)
UND
IMMUNOBLOT
41
2.2.8.1
PAGE
41
2.2.8.2
IMMUNOBLOT
43
2.2.9
ENTWICKLUNG
DER
EICHKURVE
44
2.2.10
ROCKET-IMMUNELEKTROPHORESE
44
3
ERGEBNISSE
46
3.1
ANTIKOERPERTITER
DER
IMMUNISIERTEN
MAEUSE
46
3.2
AUSWAHL
DER
HUNDEPANKREASELASTASE
1
-ANTIKOERPER
PRODUZIERENDEN
ZELLKLONE
47
3.3
IMMUNGLOBULINKLASSE
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
49
3.4
IGG-GEHALT
DER
VEREINIGTEN
FRAKTIONEN
NACH
DER
REINIGUNG
50
3.5
AKTIVITAET
DER
GEREINIGTEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
50
3.6
CHARAKTERISIERUNG
DER
GEREINIGTEN
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
52
3.7
IMMUNOBLOT
53
3.8
ERGEBNISSE
DES
ELISA
ZUR
ANWENDUNG
DER
MONOKLONALEN
ANTIKOERPER
58
3.9
ENTWICKLUNG
DER
EICHKURVE
62
3.10
UNTERSUCHUNG
VON
KREUZREAKTIONEN
62
3.11
UNTERSUCHUNG
VON
PATIENTENPROBEN
63
4
DISKUSSION
67
5
ZUSAMMENFASSUNG
75
6
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
76
7
LITERATURVERZEICHNIS
77 |
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