Allergische Rhinokonjunktivitis: das b2-Adrenozeptor-cAMP-System und die Histaminfreisetzung aus peripheren Blutleukozyten des Menschen
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Regensburg
Roderer
1999
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5 |
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INHALTSVERZEICHNIS
Seite
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5
B Einleitung
B.l. Die über IgE vermittelte Histaminfreisetzung 5
B 2 Das ß2 Adrenozeptor/cAMP System
' ' . 10
B.3. Allergie und Atopie
B.4. Fragestellung
C. Material und Methoden
15
C.l. Material
C.l.l. Chemikalien
C.l.1.1. Substanzen
16
C.l. 1.2. Pufferlösungen
C.l.2. Geräte
19
C.2. Methoden
CIA. Methodische Untersuchungen
C 2 1 1. Probandenauswahl
19
C.2.1.2. Zellpräparation
C.2.1.2.1. Blutentnahme
C.2.1.2.2. Isolation der PBL
C.2.1.3. Studien zum p2 Adrenozeptor/cAMP System 21
C.2.1.3.1. Stimulation der intrazellulären cAMP Bildung 21
C.2.1.3.2. Quantitative Bestimmung des cAMP 22
C.2.1.3.3. Auswertung der Stimulationsversuche 22
C.2.1.4. Studien zur Histaminfreisetzung 23
C.2.1.4.1. Durchfuhrung der Histaminfreisetzung 23
C.2.1.4.2. Einfluß von Pharmaka auf die Histaminfreisetzung 23
C.2.1.4.3. Quantitative Bestimmung des Histamins 24
C.2.1.4.4. Auswertung der Histaminfreisetzungsversuche 25
C.2.2. Klinische Untersuchungen 26
C.2.2.1. Probandenauswahl 26
C.2.2.1.1. Probanden der klinischen Untersuchungen 26
C.2.2.1.2. Allergie Diagnostik 27
C.2.2.2. Zellpräparation 28
C.2.2.2.1. Blutentnahme 28
C.2.2.2.2. Isolation der PBL 28
C.2.2.3. Durchfuhrung der klinischen Untersuchungen 28
C.2.3. Statistik 29
D. Ergebnisse 30
D.I. Ergebnisse der methodischen Untersuchungen 30
D.l.l. Studien zum ßi Adrenozeptor/cAMP System 30
D. 1.1.1. Effekt von Isoprenalin und IBMX 30
D.I. 1.2. Einfluß der Versuchsbedingungen auf das ß2 Adrenozeptor/cAMP 33
System
D.I. 1.2.1. Einfluß der Zellzahl 33
D.I.1.2.2. Einfluß der Vorinkubation 35
D.I.1.2.3. Einfluß der Inkubationszeit 38
D.I.1.2.4. Einfluß der Ascorbinsäure 41
D.I.1.2.5. Einfluß von anti IgE 44
D.I. 1.2.6. Einfluß der Reaktionsabbruch Methode 46
D.I.1.3. Effekt von Cimetidin 50
D. 1.1.4. TrisCM Puffer im Vergleich mit PDE und HH Puffer 52
D.I.1.5. Effekt von IBMX und Ascorbinsäure in Kombination 54
D.1.2. Studien zur Histaminfreisetzung 58
D. 1.2.1. Effekt von Isoprenalin und IBMX 58
D.I.2.2. Einfluß der Versuchsbedingungen auf die Histaminfreisetzung 66
D.I.2.2.1. Einfluß der Zellzahl 66
D.I.2.2.2. Einfluß der Vorinkubation 71
D.I.2.2.3. Einfluß der Inkubationszeit 75
D.l.2.2.4. Einfluß der Ascorbinsäure 79
D.l.2.3. Einfluß der Versuchsbedingungen auf den Effekt von Isoprenalin 81
und IBMX
D.I.2.3.1. Einfluß der Zellzahl 81
D.I.2.3.2. Einfluß der Vorinkubation 82
D.I.2.3.3. Einfluß der Inkubationszeit 87
D.I.2.3.4. Einfluß der Ascorbinsäure 88
D.2. Ergebnisse der klinischen Untersuchungen 91
D.2.1. Studien zum ß2 Adrenozeptor/cAMP System 91
D.2.1.1. ßj Adrenozeptorfunktion und cAMP Gehalt bei Atopikern und 91
Kontrollen im Vergleich
D.2.1.2. Effekt von Isoprenalin und IBMX 95
D.2.2. Studien zur Histaminfreisetzung 98
D.2.2.1. Histaminfreisetzung bei Atopikern und Kontrollen im Vergleich 98
D.2.2.2. Effekt von Isoprenalin und IBMX 101
E. Diskussion 114
E.l. Erstellung einer neuen Methodik 114
E.1.1. Einfluß der Zellzahl 117
E. 1.2. Einfluß der Vorinkubation 118
E.1.3. Einfluß der Inkubationszeit 120
E.1.4. Einfluß der Ascorbinsäure 122
E.1.5. Einfluß von anti IgE 123
E.1.6. Einfluß der Reaktionsabbruch Methode 124
E.2. Einfluß von Cimetidin auf das ß2 Adrenozeptor/cAMP System 126
E.3. Einfluß des Puffers auf das ß2 Adrenozeptor/cAMP System 128
E.4. Diskussion der klinischen Studien 130
E.4.1. Einfluß der atopischen Erkrankung 130
E.4.1.1. Das ßMdrenozeptor/cAMP System 130
E.4.1.2. Die Histaminfreisetzung 132
E.4.2. Einfluß des ß2 Adrenozeptor/cAMP Systems auf die 134
Histaminfreisetzung
F. Tabellenanhang 143
G. Literaturverzeichnis 152 |
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