Phänotypische und funktionelle Untersuchung von immunkompetenten Zellen in der Dezidua:
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1998
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1.
EINLEITUNG
3
1.1
I
MPLANTATION
UND
B
ILDUNG
DER
P
LAZENTA
.
4
1.2
D
EZIDUA
.
5
1.2.1
ANATOMIE
.
5
1.2.2
HISTOLOGIE
.
5
1.2.3
PHAENOTYPISCHE
BESCHREIBUNG
MIT
MONOKLONALEN
ANTIKOERPERN
.
6
1.3
N
ATUERLICHE
K
ILLERZELLEN
UND
Z
YTOTOXIZITAET
.
7
1.4
E
INFLUESSE
,
DIE
SICH
AUF
DIE
H
AEUFIGKEIT
VON
L
ARGE
G
RANULAER
L
YMPHOCYTES
(LGL)
IM
E
NDOMETRIUM
AUSWIRKEN
.
8
1.4.1
LGL
WAEHREND
DES
MENSTRUATIONSZYKLUS
.
8
1.4.2
LGL
WAEHREND
DER
SCHWANGERSCHAFT
.
9
1.5
F
UNKTIONEN
DER
D
EZIDUA
.
9
1
.5.
1
PATHOLOGIE
DER
INVASION
.
10
1.6
E
IGENE
V
ORGEHENSWEISE
.
11
2.
METHODEN
13
2.1
U
NTERSUCHUNGSMATERIAL
.
13
2.
1.1
ENZYMATISCHE
GEWEBEAUFBEREITUNG
.
13
2.
1.2
MECHANISCHE
GEWEBEAUFBEREITUNG
.
14
2.2
Z
ELLISOLATION
AUS
DEM
P
ERIPHERBLUT
.
15
2.3
D
URCHFLUSSZYTOMETRIE
.
15
2.3.1
ZWEIFACHE
IMMUNFLUORESZENZFAERBUNG
.
15
2.3.2
MESSUNG
DER
ZWEIFACHFAERBUNG
IM
DURCHFLUSSZYTOMETER
.
16
2.3.3
AUSWERTUNG
DER
GEMESSENEN
PROBEN
.
17
2.4
S
TATISTISCHE
A
USWERTUNG
.
18
2.5
S
ORTIEREN
DER
Z
ELLEN
MIT
FACS
TAR
P
LUS
.
18
2.5.
1
PRINZIP
DES
FACSTAR
PLUS
.
18
2.5.2
MARKIERUNG
DER
ZELLEN
FUER
DIE
SORTIERUNG
.
19
2.6
Z
YTOSPIN
.
19
2.7
D
OKUMENTATION
DER
Z
ELLEN
.
20
2.8
Z
YTOTOXIZITATSBESTIMMUNG
MIT
DEM
E
UROPIUMFREISETZUNGSTEST
.
20
2.
8.1
EUROPIUMFREISETZUNGSTEST
.
20
2.8.2
KULTIVIERUNG
DER
TARGETZELLEN
K562
.
22
2.8.3
DURCHFUEHRUNG
DES
EUROPIUMFREISETZUNGSTESTS
.
23
2.9
R
EVERSE
T
RANSKRIPTASE
-P
OLYMERASEKETTENREAKTION
(RT-PCR)
.
25
2.9.1
DAS
PRINZIP
DER
RT-POLYMERASEKETTENREAKTION
.
25
2.9.2
ISOLIERUNG
DER
MRNA
.
27
2.
9.3
CDNA-SYNTHESE
.
29
2.9.
4
POLYMERASEKETTENREAKTION
(PCR)
.
30
2.9.5
GELELEKTROPHORESE
MIT
POLYACRYLAMIDGEL
.
32
2.9.6
SEMIQUANTITATIVE
AUSWERTUNG
.
32
2.9.7
STANDARDISIERUNG
DER
VERWENDETEN
ZYTOKINE
.
33
2.9.8
VERGLEICHSZELLEN
FUER
DIE
UNTERSUCHUNG
VON
LGL
AUF
ZYTOKINE
.
34
3.
MATERIALLISTE
35
3.1
G
ERAETE
UND
F
ESTMATERIALIEN
.
35
3.2
A
NTIKOERPER
,
R
EAGENZIEN
UND
L
OESUNGEN
.
37
3.3
S
TAMMLOESUNGEN
,
P
UFFER
UND
M
EDIEN
.
41
4.
ERGEBNISSE
45
4.1
P
HAENOTYPISCHER
V
ERGLEICH
VON
DEZIDUALEN
UND
PERIPHEREN
L
YMPHOZYTEN
MIT
H
ILFE
DER
D
URCHFLUSSZYTOMETRIE
.
45
4.2
V
ERGLEICH
DER
A
NTIGENEXPRESSION
BEI
CD56*
Z
ELLEN
IN
DER
D
EZIDUA
UND
IM
P
ERIPHERBLUT
.
46
4.2.1
HAEUFIGKEIT
VON
DEZIDUALEN
LGL
UND
PERIPHEREN
NK-ZELLEN
NACH
DER
AUFTRENNUNG
DURCH
DICHTEZENTRIFUGATION
.
46
4.2.2
MORPHOLOGIE
VON
DURCHFLUSSZYTOMETRISCH
SORTIERTEN
DEZIDUALEN
LGL
.
47
4.2.3
PHAENOTYPISCHER
VERGLEICH
DER
ANTIGENEXPRESSION
VON
DEZIDUALEN
LGL
UND
NK-ZELLEN
.
47
4.3
V
ERGLEICH
VON
O
BERFLAECHENMERKMALEN
PERIPHERER
UND
DEZIDUALER
T-ZELLEN
.
53
4.3.1
HAEUFIGKEIT
VON
T-ZELLEN
IN
DER
DEZIDUA
UND
IM
PERIPHERBLUT
.
53
4.3.2
VERGLEICH
VON
OBERFLAECHENANTIGENEN
AUF
DEZIDUALEN
UND
PERIPHEREN
T-ZELLEN
.
53
4.4
Z
YTOTOXIZITAET
VON
LGL
GEGEN
K562
.
57
4.5
N
ACHWEIS
VON
Z
YTOKINEN
IN
LGL
.
58
5.
DISKUSSION
62
5.1
M
ETHODENKRITIK
.
62
5.2
M
ORPHOLOGIE
DEZIDUALER
LGL
.
65
5.3
V
ERGLEICH
DER
E
XPRESSION
VON
O
BERFLAECHENANTIGENEN
AUF
DEZIDUALEN
LGL
UND
PERIPHEREN
NK-ZELLEN
.
65
5.3.
1
EXPRESSION
VON
CD56.
65
5.3.2
CD122
UND
PROLIFERATION
.
66
5.3.3
DAS
CD
1
6-ANTIGEN
.
67
5.3.4
ADHAESIONSMOLEKUELE
AUF
LGL
.
68
5.3.5
AKTIVIERUNGSMOLEKUELE
AUF
LGL
.
69
5.3.6
SCHLUSSFOLGERUNGEN
AUS
DEM
VERGLEICH
VON
DEZIDUALEN
LGL
MIT
NK-ZELLEN
.
72
5.4 B
ESTIMMUNG
DER
Z
YTOTOXIZITAET
VON
LGL
.
73
5.
4.1
SCHLUSSFOLGERUNG
AUS
DER
BESTIMMUNG
DER
ZYTOTOXIZITAET
.
75
5.5
N
ACHWEIS
VON
Z
YTOKINEN
IN
LGL
.
75
5.5.
1
LNTERIEUKIN-1
SS
.
76
5.5.2
LNTERIEUKIN-2
.
76
5.5.3
INTERFERON-^
.
77
5.5.4
TUMOR
GROWTH
FACTOR-SS
(TGF-SS)
.
77
5.5.5
STAMMZELLFAKTOR
(SCF)
.
78
5.5.6
MACROPHAGE-COLONY
STIMULATING
FACTOR
(M-CSF)
UND
GRANULOCYTE
MACROPHAGE-COLONY
STIMULATING
FACTOR
(GM-CSF)
79
5.5.7
LEUKEMIA
INHIBITORY
FACTOR
(LIF)
.
79
5.5.
8
SCHLUSSFOLGERUNG
AUS
DER
UNTERSUCHUNG
AUF
ZYTOKINE
.
80
5.6
P
HAENOTYPISCHER
V
ERGLEICH
DER
E
XPRESSION
VERSCHIEDENER
O
BERFLAECHENANTIGE
AUF
PERIPHEREN
UND
DEZIDUALEN
T-Z
ELLEN
.
81
5.
6.1
ADHAESIONS
UND
AKTIVIERUNGSMOLEKUELE
.
82
5.6.2
MOLEKUELE
MIT
BESONDERER
BEDEUTUNG
BEI
DER
ANTIGENERKENNUNG
.
83
5.6.3
SCHLUSSFOLGERUNG
AUS
DEM
VERGLEICH
VON
T-ZELLEN
.
84
8.
ZUSAMMENFASSUNG
86
7.
LITERATUR
88
8.
ANHANG
98
8.1
A
BBILDUNGSVERZEICHNIS
.
97
8.2
T
ABELLENVERZEICHNIS
.
98
8.3
F
ORMELVERZEICHNIS
.
99
8.4
A
BKUERZUNGEN
.
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