Analyse des Antigen-Rezeptorrepertoires und phänotypische Charakterisierung peritonealer TCRg-d+T-Lymphozyten:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
München
Utz, Wiss.
1998
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| Schriftenreihe: | Medizin
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| Beschreibung: | Zugl.: München, Univ., Med. Fak., Diss., 1998 |
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INHALT
I
INHALTSVERZEICHNIS
I.
EINLEITUNG
1.
EINFUEHRUNG
.
1
2.
TCRY/8+T-ZELLE
.
2
2.1.
ALLGEMEINES
.
2
2.2.
ENTWICKLUNG
UND
REIFUNG
VON
T-ZELLEN
.
2
2.3.
GENOMISCHE
ORGANISATION
DER
T-ZELL-REZEPTOR-GENFRAGMENTE
.
4
2.4.
MECHANISMEN
ZUR
ERZEUGUNG
VON
REZEPTORVIELFALT
DES
T-ZELL
REZEPTORS
.
6
2.5.
KONZEPTE
ZUR
FUNKTION
VON
TCRY/8
+
T-ZELLEN
.
7
3.
DAS
"IMMUNOLOGISCHE
KOMPARTIMENT"
PERITONEUM
.
10
3.1.
ANATOMISCHE
UND
IMMUNOLOGISCHE
VORBEMERKUNGEN
.
10
3.2.
DAS
EMBRYONALE
UND
FETALE
OMENTUM
ALS
LYMPHOZYTOTROPHES
KOMPARTIMENT
.
11
3.3.
LYMPHOZYTENPOPULATIONEN
IM
PERITONEALRAUM
DER
MAUS
.
11
4.
KONTINUIERLICHE
AMBULANTE
PERITONEALDIALYSE
(CAPD)
.
12
4.1.
THERAPIEPRINZIP
.
12
4.2.
AUSWIRKUNGEN
DER
CAPD
AUF
DIE
UNSPEZIFISCHEN
INFEKTABWEHR
MECHANISMEN
DES
PERITONEUMS
.
13
5.
FRAGESTELLUNGEN
.
16
II.
METHODEN
FLUSSDIAGRAMM
.
17
1.
PATIENTEN
.
19
1.1.
KONTROLLGRUPPE
.
19
1.2.
DIALYSEPFLICHTIGE
PATIENTEN
.
19
2.
ISOLIERUNG
UND
ZELLKULTURBEDINGUNGEN
DER
T-LYMPHOZYTEN
.
21
2.1.
ZELLEN
AUS
DEM
PERITONEALRAUM
.
21
2.2.
PRAEPARATION
MONONUKLEAERER
ZELLEN
AUS
PERIPHEREM
BLUT
.
22
2.3.
PRAEPARATION
VON
PERITONEALZELLEN
ZUR
DURCHFLUSSZYTOMETRIE-ANALYSE
.
22
3.
ZELLZYTOMETRISCHE
ANALYSE
PERITONEALER
TCRY/8+T-LYMPHOZYTEN
.
23
4.
PRAEPARATION
VON
RNA
.
23
4.1.
ISOLATION
VON
GESAMT-RNA
.
24
4.2.
ISOLATION
VON
MRNA
.
25
II
INHALT
4.3.
SYNTHESE
DER
CDNA
.
25
5.
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
26
6.
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
DER
AMPLIFIKATE
.
28
7.
SOUTHERN-BLOTTING
DER
PCR-AMPLIFIZIERTEN
TCR
V-GEN-TRANSKRIPTE
.
29
8.
PRAEPARATION
DER
GENOMISCHEN
SONDEN
ZUM
NACHWEIS
VON
VY-GENEN
.
30
8.1.
PRAEPARATION
DER
PLASMIDE
UND
ISOLIERUNG
DER
INSERTS
.
30
8.2
RESTRIKTIONSVERDAU
MIT
ENDONUKLEASEN
.
31
8.3.
MARKIERUNG
DER
ERHALTENEN
INSERTS
MIT
DIGOXIGENIN
(DIG)
.
32
9.
HYBRIDISIERUNG
DER
GEBLOTTETEN
AMPLIFIKATE
MIT
DIG-MARKIERTEN
DNA-SONDEN
(VY-GENFAMILIEN)
UND
DIG-MARKIERTEN
OLIGONUKLEOTIDEN
(VOE-GENFAMILIEN)
.
33
9.1.
MARKIERUNG
DES
3'-ENDES
DER
DNA
UND
OLIGONUKLEOTID-SONDEN
MIT
DIGOXIGENIN
.
33
9.2.
HYBRIDISIERUNG
UND
NACHWEIS
DER
HYBRIDISIERTEN
DIG-MARKIERTEN
SONDEN
IM
ENZYM-IMMUNO-ASSAY
.
34
10.
ANALYSE
VON
PCR-PRODUKTEN
(V81-J81
-REGION)
DURCH
UNTERSUCHUNG
VON
EINZELSTRANG
DNA-POLYMORPHISMEN.
(SINGLE
STRAND
CONFORMATION
POLYMORPHISM;
SSCP)
.36
III.
ERGEBNISSE
1.
ISOLIERUNG
DER
T-LYMPHOZYTEN
.38
2.
PHAENOTYPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
TCRY/8
+
T-LYMPHOZYTEN
AUS
DEM
PERITONEALRAUM.
ERGEBNISSE
DER
DURCHFLUSSZYTOMETRIE-ANALYSE
.
38
3.
ANALYSE
DES
GENREPERTOIRES
PERITONEALER
TCRY/8
+
-T-LYMPHOZYTEN
.
41
3.1.
ZUSAMMENFASSUNG
DER
METHODIK
.
41
3.2.
TCR-V8-GENREPERTOIRE
IN
V8-GENTRANSKRIPTEN
IN
PBMC
UND
PCL
.
44
3.3.
TCR-VY-GENREPERTOIRE
IN
VY-GENTRANSKRIPTEN
IN
PBMC
UND
PCL
.
44
3.4.
VY-J
UND
VY-JP
UMLAGERUNGEN
IN
VY-J/JP-GENTRANSKRIPTEN
IN
PBMC
UND
PCL
.
46
3.5.
ABHAENGIGKEIT
DES
VY-GEN-REPERTOIRES
IN
VY-GENTRANSKRIPTEN
IN
PCL
UND
PBMC-T-ZELLEN
VON
DER
HAEUFIGKEIT
PERITONEALER
INFEKTIONEN
.
47
4.
UNTERSUCHUNG
ZUR
KLONALITAET
VON
TCRY/8
+
PCL
DURCH
KONFORMATIONSANALYSE
DER
V81-J81-DIVERSITAET
.
51
INHALT
III
IV.
DISKUSSION
1.
DAS
URAEMISCHE
IMMUNDEFEKT-SYNDROM
.
54
2.
PHAENOTYPISCHE
CHARAKTERISIERUNG
PERITONEALER
TCRY/8
+
T-ZELLEN
.55
2.1.
LYMPHOZYTENPOPULATIONEN
IM
PERITONEALRAUM
DES
MENSCHEN
.
55
2.2.
DER
ANTEIL
DER
TCRY/8
+
T-ZELLEN
IM
PERITONEALRAUM
UND
EXPRESSION
DER
OBERFLAECHENMARKER
CD4,
CD8
UNDCD45
.56
3.
ANALYSE
DES
V-GEN-REPERTOIRES
PERITONEALER
TCRY/8+T-ZELLEN
.
58
3.1.
ALLGEMEINE
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
HETEROGENITAET
DES
TCR
REPERTOIRES
.
58
3.2.
AUSWIRKUNGEN
DER
CAPD
AUF
DIE
LYMPHOZYTENPOPULATION
.
60
3.3.
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
HETEROGENITAET
DES
Y/8TCR-REPERTOIRES
IM
PERITONEALRAUM
.
62
4.
HINWEISE
AUF
EINE
EINSCHRAENKUNG
DER
V81-J81
-VARIABILITAET
BEI
PERITONEALEN
T-LYMPHOZYTEN
.
66
5.
ZUSAMMENFASSENDE
BEURTEILUNG
DER
ERGEBNISSE
.
67
V.
ZUSAMMENFASSUNG
68
VI.
PATIENTENLISTE
UND
MATERIALIEN
1.
PATIENTENLISTE
.
70
2.
MATERIALIEN
.
72
2.1.
CHEMIKALIEN
UND
LOESUNGEN,
ALLGEMEIN
.
72
2.2.
VERBRAUCHSMATERIAL
.73
2.3.
ZELLKULTUR-MATERIALIEN
.
73
3.
MATERIALIEN
FUER
DIE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE-ANALYSE
.
74
4.
REAGENZIEN
ZUR
RNA-RRAEPARATION
.
74
4.1.
ISOLATION
VON
GESAMT-RNA
.
74
4.2.
ISOLATION
VON
MRNA
.
75
4.3.
SYNTHESE
DER
CDNA
.
75
5.
POLYMERASE-KETTENREAKTION
(PCR)
.
76
5.1.
PCR-REAGENZIEN
.
76
5.2.
OLIGONUKLEOTIDE
(PRIMER)
ZUR
PCR-AMPLIFIKATION
VON
TCR
VY
UND
V8-GENSEGMENTEN
.
77
IV
INHALT
6.
AGAROSEGELELEKTROPHORESE-REAGENZIEN
.
78
7.
SOUTHEMBLOTTING-REAGENZIEN
.
78
8.
PRAEPARATION
DER
GENOMISCHEN
SONDEN
ZUM
NACHWEIS
VON
VY-GENEN
.
79
8.1.
PRAEPARATION
DER
PLASMIDE
UND
ISOLATION
DER
INSERTS
.
79
8.2.
RESTRIKTIONSVERDAU
MIT
ENDONULEASEN
.
81
9.
REAGENZIEN
ZUR
DIG-HYBRIDISIERUNG
.
81
9.1.
3-MARKIERUNG
VON
OLIGONUKLEOTIDEN
MIT
DIG-DDUTP
.
81
9.2.
HYBRIDISIERUNG
UND
NACHWEIS
DER
DIG-MARKIERTEN
SONDEN
IM
ENZYM-IMMUNO-ASSAY
.
82
10.
SSCP-REAGENZIEN
.
83
VII.
ANHANG
1.
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS.
2.
LITERATURVERZEICHNIS
.
3.
LEBENSLAUF.
.
99
3
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| spelling | Birkhofer, Andreas S. Verfasser (DE-588)120704498 aut Analyse des Antigen-Rezeptorrepertoires und phänotypische Charakterisierung peritonealer TCRg-d+T-Lymphozyten Andreas S. Birkhofer Analyse des Antigen-Rezeptorrepertoires und phänotypische Charakterisierung peritonealer TCR-gamma-delta-T-Lymphozyten München Utz, Wiss. 1998 100 S. Ill. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Medizin Zugl.: München, Univ., Med. Fak., Diss., 1998 Prävention (DE-588)4076308-0 gnd rswk-swf Kontinuierliche ambulante Peritonealdialyse (DE-588)4345857-9 gnd rswk-swf T-Lymphozyt (DE-588)4127387-4 gnd rswk-swf Infektion (DE-588)4161650-9 gnd rswk-swf Bauchfell (DE-588)4144136-9 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Kontinuierliche ambulante Peritonealdialyse (DE-588)4345857-9 s Bauchfell (DE-588)4144136-9 s T-Lymphozyt (DE-588)4127387-4 s Infektion (DE-588)4161650-9 s Prävention (DE-588)4076308-0 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=008360151&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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