Beiträge zur Isolierung und Identifizierung von Clostridium sp. und Bacillus sp. sowie zum Nachweis deren Toxine:
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Bonn
Bundesamt für Zivilschutz
1998
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| adam_text | Inhalt
Einleitung und Aufgabenstellung 7
1 Miniaturisierte Systeme zur biochemischen
Identifizierung von Bakterien 9
1.1 Identifizierung von Clostridium-Spezies 9
1.1.1 MicroScanR (Baxter) und ATB 32A (API bioMerieux) .... 9
1.1.2 Titertek (Flow) 11
1.2 Identifizierung von Bacillus-Spezies 12
1.2.1 Konventionelle Methode 13
1.2.2 API 50CH und API 20E (bioMerieux) 13
1.2.3 VITEK (bioMerieux) 13
2 Differenzierung und Identifizierung von Bakterien mit der
„Fourier-Transform-Infrarotspektroskopie 17
2.1 Vorversuche 17
2.2 Anwendung der FT-IR-Spektroskopie zur Differenzierung
von Clostridium cochlearuim, C. malenominatum,
C. tetanomorphum und C. tetani 20
2.3 Erarbeitung von FT-IR-Referenzspektren für die
Clostridium-Datei 23
2.4 Epidemiologische Untersuchungen mittels der FT-IR-
Spektroskopie im Vergleich zu der Lysotopie und Pulsfeld-
gelektrophorese an Staphylococcus ö»re;«-Isolaten 32
3 Untersuchungen auf Clostridium difficile 37
3.1 Kultureller Nachweis 37
3.1.1 Cycloserin-Cefoxitin-Fructose-Agar (CCFA) zur Isolierung
von Clostridium difficile 37
3.2 Identifizierung 39
3.2.1 Norleucin-Tyrosin-Bouillonkultur zur Identifizierung von
Clostridium difficile mittels Gaschromatographie 39
3.2.2 Latex-Agglutinationstest (FrekaR MicroScreenR, Fresenius)
zur schnellen Identifizierung von Clostridium diffkile-
Bakterien 40
3.3 Antibiotika-Empfindlichkeit 43
4 Methoden zum Nachweis clostridieller Toxine 45
5
4.1 Nachweis von clostridiellen Cytotoxinen mittels
Lungenfibroblastenkultur 45
4.2 Verwendbarkeit der Lungenfibroblastenkultur als Ersatz
für den Tierversuch. Vergleich der Cytotoxizität
und Pathogenität von Stämmen verschiedener
Clostridium-Spezies 46
4.3 Prüfung der Lungenfibroblastenkultur zum Routine-
Nachweis von Clostridium difficile-Toxin im Stuhl
von Patienten 48
4.4 Vergleichende Prüfung eines käuflichen Latex-Agglutina¬
tionstestes (Culturette Brand CDT™, Marion Scientific)
zum Nachweis von C. difficile-Toxm in Stuhlproben 49
4.5 Nachweis von C. perfringens-Enterotoxin mittels
Vero-Zellenkultur 51
4.6 Vergleich von Vero-Zellenkultur, Latex-Agglutinationstest
und ELISA zum Nachweis von C. perfringens-Enterotoxin
in C. perfringens-Kuhuren und Stuhl von Diarrhöe-Patienten 54
5 Nachweis von Tetanus- Antikörpern im Serum mittels
ELISA 59
6 Analyse einzelner Toxine 61
6.1 Cytotoxinbildung von Clostridium-Stämmen aus
Stuhlproben von Patienten mit Verdacht auf Colitis 61
6.2 Analyse des von Clostridium butyricutn gebildeten
Cytotoxins 61
6.3 Charakterisierung der Cytotoxinc von Clostridium
oceanicum 63
6.4 Nachweis und Charakterisierung einer ADP-ribosyltrans-
ferase von Clostridium limosum 64
6.5 Nachweis und Charakterisierung einer ADP-ribosyltrans-
ferase von Bavillus cereus 65
7 Zusammenfassung und Empfehlungen 67
8 Bedeutung für den zivilen Bevölkerungsschutz 71
9 Literatur 73
Die Autoren 77
Danksagung 77
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