Expression und Aktivität der Tyrosin Kinase Src in humanen Pankreastumoren:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
|
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
3
1.1
MOLEKULARE
VERAENDERUNGEN
IM
PANKREASKARZINOM
.
3
1.2
SRC
PROTEIN
TYROSIN
KINASEN
.
5
1.2.1
STRUKTUR
DER
TYROSIN
PROTEIN
KINASEN
DER
SRC
FAMILIE
.
6
1.2.2
REGULATION
DER
SRC
TYROSIN
KINASE
.
8
1.2.3
BEDEUTUNG
DER
SRC-FAMILIE
TYROSIN
KINASEN
IN
NORMALEN
ZELLEN
.
11
1.2.4
FUNKTION
DER
SRC
TYROSIN
KINASE
IN
TUMOREN
.
13
1.3
FRAGESTELLUNGEN
.
14
2
MATERIAL
UND
METHODIK
15
2.1
ZELLKULTUR
.
15
2.1.1
KULTURBEDINGUNGEN
.
16
2.2
PROTEINEXTRAKTION
.
18
2.2.1
ZELLINIENEXTRAKTION
.
19
2.2.2
KARZINOMGEWEBEXTRAKTION
.
20
2.3
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTS
.
21
2.3.1
PRINZIP
.
21
2.3.2
DURCHFUEHRUNG
.
21
2.4
ELEKTROPHORESE
.
22
2.4.1
GRUNDPRINZIP
.
22
2.4.2
REAGENZIEN
UND
PUFFER
.
23
2.4.3
DURCHFUEHRUNG
.
24
2.5
WESTERN
BLOT
UND
MEMBRANFAERBUNG
.
25
2.5.1
PRINZIP
DES
WESTERN
BLOTS
.
26
2.5.2
REAGENZIEN
UND
PUFFER
(WESTERN
BLOT)
.
27
2.5.3
DURCHFUEHRUNG
(WESTERN
BLOT)
.
27
2.5.4
PRINZIP
DER
MEMBRANFAERBUNG
.
28
2.5.5
REAGENZIEN
UND
PUFFER
(MEMBRANFAERBUNG)
.
29
2.5.6
DURCHFUEHRUNG
(MEMBRANFAERBUNG)
.
30
2.6
KINASEN
ASSAY
.
31
2.6.1
PRINZIP
.
31
2.6.2
REAGENZIEN
UND
PUFFER
.
32
2.6.3
DURCHFUEHRUNG
.
34
2.7
HEMMVERSUCHE
MIT
HERBIMYCIN
A
.
35
2.7.1
DURCHFUEHRUNG
.
36
2.8
MEMBRANPRAEPARATION
.
36
2.8.1
PUFFER
.
37
2.8.2
DURCHFUEHRUNG
.
37
2.9
DENSITOMETRIE
.
38
2.10
STATISTIK
.
38
3
ERGEBNISSE
39
3.1
VOR
VERSUCHE
.
39
3.1.1
IMMUNPRAEZIPITATION
.
39
3.1.2
KINASE
ASSAY
.
40
3.1.3
WESTERN
BLOT
.
43
3.1.4
EINFLUSS
VON
ANTIBIOTIKA
UND
WACHSTUMSDICHTE
.
45
3.2
PROTEIN-EXPRESSION
UND
KINASEN-AKTIVITAET
VON
MITGLIEDERN
DER
SRC-KINASEN
FAMILIE
.
46
3.2.1
EXPRESSION
UND
AKTIVITAET
VON SRC,
YES,
FYN
UND
LYN
IN
PANKRE
ASTUMORZELLINIEN
.
46
3.2.2
EXPRESSION
UND
AKTIVITAET
VON
SRC
IN
HUMANEM
PANKREASTUMOR
GEWEBE
.
51
3.3
MEMBRANPRAEPARATION
.
53
3.4
EINFLUSS
VON
HERBIMYCIN
A
AUF
P60SRC
AKTIVITAET
IN
HUMANEN
PANKRE
ASKARZINOMZELLINIEN
.
56
3.4.1
EINFLUSS
VON
HERBIMYCIN
A
AUF
DIE
AKTIVITAET
VON
SRC-KINASE
FA
MILIENMITGLIEDER
IN
PANKREASTUMORZELLINIEN
IN
VITRO
.
56
3.4.2
EINFLUSS
VON
HERBIMYCIN
A
AUF
EXPRESSION
UND
KINASENAKTIVITAET
VON
MITGLIEDERN
DER
SRC-KINASE
FAMILIE
IN
PANKREASTUMORZELLI
NIEN
IN
VIVO
.
57
4
DISKUSSION
68
4.1
EXPRESSION
UND
AKTIVITAET
VON
SRC-FAMILIE
MITGLIEDERN
IN
PANKREASTU
MORZELLINIEN
.
68
4.1.1
REGULATION
DER
SRC-FAMILIE
MITGLIEDER
.
69
4.2
FUNKTION
DER
SRC-FAMILIEN
MITGLIEDER
IN
PANKREASTUMORZELLINIEN
.
73
4.3
ZUSAMMENFASSUNG
.
76
2 |
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