Untersuchung zum Auftreten der Apoptose nach orthotoper Lebertransplantation bei syngenen Lewis-Ratten:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Frankfurt am Main, Univ., Diss., 1998 |
| Beschreibung: | 84 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1.1
N
EKROSE
VERSUS
A
POPTOSE
.
1
1.1.1
NEKROSE
.
1
1.1.2
DER
PROGRAMMIERTE
ZELLTOD
(APOPTOSE)
.
3
1.2
L
EBERTRANSPLANTATION
.
.'.
.
7
1.3
F
RAGESTELLUNG
.
12
2
MATERIAL
UND
METHODE
2.1.
C
HEMIKALIEN
UND
L
OESUNGEN
.
13
2.2
L
ABORGERAETE
.
14
2.3
T
EIL
A:E
RSTELLEN
EINES
YYS
TANDARD
-A
POPTOSE
-M
ODELL
"
.
15
2.3.1
VORVERSUCHE
ZU
TEIL
A:
.
15
2.3.1.1
ZUECHTUNG
DER
FIBROBLASTENKULTUR
.
16
2.3.1.2
ANSETZEN
DER
FIBROBLASTENKULTUREN
PLUS
CAMPTOTHECIN
(CAM)
UND
PLUS
100
GY
IONISIERENDE
STRAHLUNG
.
16
2.3.1.3
AUFARBEITEN
DER
FIBROBLASTENKULTUREN
.
17
2.3.1.4
ZUECHTUNG
DER
HEP-G2
HEPATOMZELLEN
.
17
2.3.1.5
ANSETZEN
DER
HEPATOMZELLKULTUREN
PLUS
CAMPTOTHECIN
UND
PLUS
D-GALAKTOSAMIN
.
18
2.3.2
ERSTELLEN
EINES
YYSTANDARD-APOPTOSE-MODELL
"
MIT
HL-60
ZELLKULTUR
PLUS
CAMPTOTHECIN
(CAM)
.
19
2.3.2.1
ZUECHTUNG
DER
HL-60
ZELLEN
.
20
2.3.2.2
ANSETZEN
DER
PROBEN
FUER
DIE
GELELEKTROPHORESE
.
20
2.3.2.3
AUFARBEITEN
DER
PROBEN
FUER
DIE
GELELEKTROPHORESE
.
21
INHALT
2.3.2.4
VORBEREITEN
DES
AGAROSEGELS
ZUR
GELELEKTROPHORESE
.
22
2.3.2.5
ANSETZEN
DER
PROBEN
FUER
DEN
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
23
2.3.2.OE
AUFARBEITEN
DER
PROBEN
FUER
DEN
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
24
2.3.2.7
FUNKTIONSWEISE
DES
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
24
2.3.2.8
CYTOTOXICITY
DETECTION
KIT
ZUR
BESTIMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAET
DER
LAKTATDEHYDROGENASE
(LDH)
.
26
2.4
T
EIL
B:
A
POPTOSEINDUKTION
BEI
R
ATTENLEBER
MIT
D-G
ALAKTOSAMIN
UND
TNFA
.
27
2.4.1
HERSTELLUNG
DER
D-GALAKTOSAMIN
UND
TNFA-INJEKTIONSLOESUNGEN
.
28
2.4.2
VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
DER
IN
VIVO
APOPTOSEINDUKTION
IN
RATTENLEBER
(=POSITIVKONTROLLE)
.
28
2.4.3
DNA-ISOLIERUNG
ZUR
AUSWERTUNG
MIT
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
.
30
2.4.4
DNA-ISOLIERUNG
ZUR
AUSWERTUNG
MIT
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
31
23
T
EIL
C:
A
POPTOSENACHWEIS
NACH
ORTHOTOPER
L
EBER
TRANSPLANTATION
BEI
SYNGENEN
L
EWIS
-R
ATTEN
.
31
2.5.1
DURCHFUEHRUNG
DER
LEBERTRANSPLANTATION
.
31
2.5.1.1
OPERATIVE
MASSNAHMEN
AM
SPENDERTIER
.
32
2.5.1.2
OPERATIVE
MASSNAHMEN
AM
EMPFAENGERTIER
.
33
2.5.2
DNA-ISOLIERUNG
FUER
DEN
APOPTOSENACHWEIS
MIT
AGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
.
34
2.5.3
DNA-ISOLIERUNG
FUER
DEN
APOPTOSENACHWEIS
MIT
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
35
3
ERGEBNISSE
3.1
T
EIL
A:
YYS
TANDARD
-A
POPTOSE
-M
ODELL
"
.
36
3.1.1
VORVERSUCHE
ZU
TEIL
A
.
36
3.1.1.1
AUSWERTUNG
DER
FIBROBLASTENPROBEN
A
-
H
MIT
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
36
3.1.1.2
AUSWERTUNG
DER
FIBROBLASTENPROBEN
A-H
MIT
AGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
.
37
INHALT
3.1.1.3
AKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
LAKTATDEHYDROGENASE
IM
UEBERSTAND
DER
FIBROBLASTENPROBEN
A-H
MIT
CYTOTOXITY
DETECTION
KIT
.
38
3.1.1.4
AUSWERTUNG
DER
HEPATOMZELLPROBEN
A-N
MITAGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
.
39
3.1.1.5
ENZYMAKTIVITAETSBESTIMMUNG
DER
LAKTATDEHYDROGENASE
IM
UEBERSTAND
DER
HEPATOMZELLPROBEN
A-G
MIT
CYTOTOXITY
DETECTION
KIT
.
41
3.1.2
APOPTOSEINDUKTION
BEI
HL-60
ZELLKULTUR
MIT
CAMPTOTHECIN
(YYSTANDARD-APOPTOSE-MODELL
"
)
.
42
3.1.2.1
APOPTOSENACHWEIS
IN
HL-60
ZELLKULTUR
MIT
AGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
.
42
3.1.2.2
APOPTOSENACHWEIS
IN
HL-60
ZELLKULTUR
MIT
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
43
3.1.2.3
BESTIMMUNG
DER
ENZYMAKTIVITAET
DER
LAKTATDEHYDROGENASE
(LDH)
IM
UEBERSTAND
MIT
CYTOTOXITY
DETECTION
KIT
.
45
3.2
T
EIL
B:
IN
VIVO
A
POPTOSEINDUKTION
BEI
R
ATTENLEBER
MIT
D-G
ALAKTOSAMIN
UND
TNFA
.
46
3.2.1
UNBEHANDELTE
RATTENLEBER
ALS
REFERENZPROBE
.
46
3.2.2
BESTIMMUNG
DER
SERUMENZYMAKTIVITAET
VON
GOT,
GPT
UND
LDH
.
46
3.2.3
AUSWERTUNG
DER
IN
VIVO
APOPTOSEINDUKTION
MIT
AGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
(=POSITIVKONTROLLE)
.
48
3.2.4
AUSWERTUNG
DER
IN
VIVO
APOPTOSEINDUKTION
MIT
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
50
3.2.5
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
DER
IN
VIVO
APOPTOSEINDUKTION
.
52
3.3
T
EIL
C:
A
POPTOSENACHWEIS
NACH
ORTHOTOPER
L
EBER
TRANSPLANTATION
BEI
SYNGENEN
LEWIS-RATTEN
.
54
3.3.1
BESTIMMUNG
DER
SERUMENZYMAKTIVITAET
VON
GOT,
GPT
UND
LDH
.
54
3.3.2
APOPTOSENACHWEIS
NACH
LEBERTRANSPLANTATION
MIT
AGAROSEGEL
ELEKTROPHORESE
.
56
3.3.3
APOPTOSENACHWEIS
NACH
LEBERTRANSPLANTATION
MIT
CELL
DEATH
DETECTION
ELISA
.
58
3.3.4
HISTOLOGISCHE
AUSWERTUNG
NACH
LEBERTRANSPLANTATION
.
60
INHALT
4
DISKUSSION
4.1
T
EIL
A:
A
POPTOSEINDLKTION
BEI
HL-60
Z
ELLEN
MIT
C
AMPTOTHECIN
(YYS
TANDARD
-A
POPTOSE
-M
ODELL
"
)
.
62
4.2
T
EIL
B:
IN
VIVO
A
POPTOSEINDUKTION
BEI
R
ATTENLEBER
MIT
D-G
ALAKTOSAMIN
UND
TNFA
.
67
4.3
T
EIL
C:
A
POPTOSENACHWEIS
NACH
ORTHOTOPER
L
EBER
TRANSPLANTATION
BEI
SYNGENEN
LEWIS-RATTEN
.
71
5
ZUSAMMENFASSUNG
.
75
6
LITERATURVERZEICHNIS
.
76
ANHANG
D
ANKSAGUNG
L
EBENSLAUF
E
HRENWOERTUCHE
E
RKLAERUNG |
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