Instrumentelle Bioanalytik: Biosubstanzen, Trennmethoden, Strukturanalytik, Applikationen ; mit 17 Tabellen
Gespeichert in:
| Späterer Titel: | Gey, Martin H. Instrumentelle Analytik und Bioanalytik |
|---|---|
| 1. Verfasser: | |
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
Braunschweig
Vieweg
1998
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | XX, 319 S. Ill., graph. Darst. |
| ISBN: | 3528068736 |
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VII
INHALTSVERZEICHNIS
VORWORT
.V
INHALTSVERZEICHNIS
.
VH
ABKUERZUNGEN
.
XIII
SYMBOLE
.
XVIII
1
EINLEITUNG
.
1
2
BIOMOLEKUELE
.
9
2.1
PROTEINE
.
9
2.1.1
AMINOSAEURESTRUKTUREN
.
10
2.1.1.1
ZWITTERIONENFORM
UND
PH-ABHAENGIGKEIT
.
12
2.1.1.2
PK-WERTE
UND
ISOELEKTRISCHER
PUNKT
.
13
2.1.1.3
D
UND
L-KONFIGURATION
.
14
2.1.2
PROTEINSTRUKTUREN
.
14
2.1.2.1
PEPTIDBINDUNG
.
14
2.1.2.2
SULFIDBINDUNG
.
15
2.1.2.3
AMINOSAEURESEQUENZ
.
15
2.1.2.4
PRIMAER-,
SEKUNDAER-,
TERTIAER
UND
QUARTEMAERSTRUKTUR
.
18
2.1.2.5
A-HELIX
UNDJ?-FALTBLATT
.
18
2.1.3
DENATURIERUNG
UND
REDENATURIERUNG
.
20
2.1.4
GLUTATHION
UND
METALLOTHIONEINSTRUKTUREN
.
21
2.2
NUCLEINSAEUREN
.
24
2.2.1
STRUKTUREN
.
24
2.2.2
DOPPELHELIX,
BASENPAARUNG
UND
REPLIKATION
.
27
2.2.3
TRANSLATION
UND
TRANSKRIPTION
.
30
2.2.4
DIE
POLYMERASEKETTENREAKTION
.
30
2.3
GLYCOPROTEINE
.
33
2.3.1
STRUKTUREN
.
33
2.3.1.1
7V-GLYCOSIDISCHE
BINDUNG
.
35
2.3.1.2
O-GLYCOSIDISCHE
BINDUNG
.
37
VIII
INHALTSVERZEICHNIS
2.3.2
ISOLIERUNG
VON
GLYCOPROTEINEN
AUS
MEMBRANEN
.
37
2.3.3
ENZYMATISCHE
SEQUENZIERUNG
DER
GLYCANE
.
42
2.3.4
FREISETZUNG
DER
GLYCANE
AUS
PROTEINEN
.
45
2.3.4.1
ENZYMATISCHE
ISOLIERUNG
.
45
2.3.4.2
HYDRAZINOLYSE.
46
2.3.5
MARKIEREN
DER
GLYCANE
.
46
2.3.5.1
FLUORESZENZMARKIERUNG
MIT
2-AB
UND
BAP
.
47
2.3.5.2
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
.
48
2.4
LIPIDE
.
49
2.4.1
STRUKTUREN
.
49
2.4.2
BIOSYNTHESEPROZESSE.
53
2.4.2.1
CHOLESTERIN
UND
SQUALEN
.
53
2.4.2.2
CERAMID
UND
CEREBROSID
.
54
3
PRECHROMATOGRAPHISCHE
METHODEN
.
57
3.1
LYSOZYMBEHANDLUNG.
57
3.2
AUSSALZEN
.
58
3.3
LYOPHILISATION
.
60
3.4
DIALYSE
.
61
3.5
ULTRAZENTRIFUGATION
.
61
3.6
BATCH-ADSORPTION
.
63
3.7
FLUESSIG-FLUESSIG-EXTRAKTION
.
64
3.8
FILTRATION
.
65
3.8.1
MIKROFILTRATION
.
66
3.8.2
ULTRAFILTRATION
.
67
4
FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE
.
71
4.1
HOCHLEISTUNGSFLUESSIGCHROMATOGRAPHIE.
71
4.1.1
GRUNDLAGEN
DES
TRENNPROZESSES
.
72
4.1.2
APPARATIVE
GRUNDLAGEN
.
80
4.1.3
TRENNSYSTEME
.
90
4.1.3.1
NORMALPHASENCHROMATOGRAPHIE
.
90
4.1.3.2
CHEMISCH
MODIFIZIERTE
PHASEN
UND
REVERSED-PHASE-CHROMATOGRAPHIE
.
90
4.1.3.3
CHIRALE
TRENNSYSTEME
.
92
INHALTSVERZEICHNIS
IX
4.2
SPEZIELLE
TRENNMETHODEN
UND
-SYSTEME
.
95
4.2.1
LONENPAARCHROMATOGRAPHIE
.
95
4.2.2
LONENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
.
96
4.2.3
ANIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
MIT
GEPULST-AMPEROMETRISCHER
DETEKTION.
98
4.2.4
LONENCHROMATOGRAPIE
.
99
4.3
BIOCHROMATOGRAPHIE
.
101
4.3.1
CHROMATOGRAPHIE
AN
HYDROXYLAPATIT
.
103
4.3.2
GROESSENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
.
104
4.3.3
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
.
106
4.3.4
HYDROPHOBE
WECHSELWIRKUNGS-CHROMATOGRAPHIE.
110
4.3.5
AFFINITAETSCHROMATOGRAPHIE
.
112
4.3.6
KOVALENTE
CHROMATOGRAPHIE
.
115
4.3.7
CHROMATOGRAPHIE
AN
POROESEN
GLASKUGELN
.
118
4.3.8
PERFUSIONSCHROMATOGRAPHIE
.
119
5
ELEKTROPHORESE-TECHNIKEN
.
123
5.1
KLASSISCHE
ELEKTROPHORESE
.
123
5.1.1
TRAEGERFREIE
UND
TRAEGERGESTUETZTE
ELEKTROPHORESE
.
123
5.1.2
ZONENELEKTROPHORESE
.
125
5.1.3
DISK-ELEKTROPHORESE
.
126
5.1.4
SDS-POLYACRYLAMID-GEL-ELEKTROPHORESE.
127
5.1.5
ISOTACHOPHORESE
.
129
5.1.6
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
130
5.2
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
132
5.2.1
APPARATIVE
GRUNDLAGEN
.
132
5.2.1.1
AUFBAU
EINER
KAPILLARELEKTROPHORESE-APPARATUR
.
132
5.2.1.2
INJEKTIONSTECHNIKEN
.
133
5.2.1.3
TRENNKAPILLAREN
.
133
5.2.1.4
DETEKTION
.
134
5.2.2
TRENNPHAENOMENE
.
135
5.2.2.1
ELEKTROPHORESEPRINZIP
.
135
5.2.2.2
ELEKTROOSMOTISCHER
FLUSS
.
136
5.2.3
TRENNMECHANISMEN
.
138
5.2.3.1
KAPILLARZONENELEKTROPHORESE
.
138
S.2.3.2
KAPILLARGELELEKTROPHORESE
.
138
5.2.3.3
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
.
139
5.2.3.4
ISOTACHOPHORESE
.
139
5.2.3.5
MICELLARE
ELEKTROKINETISCHE
CHROMATOGRAPHIE
.
139
5.2.3.6
KAPILLAR-ELEKTROCHROMATOGRAPHIE
.
141
X
INHALTSVERZEICHNIS
6
STRUKTURANALYTISCHE
METHODEN
.
145
6.1
UV/VIS
UND
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
.
145
6.1.1
SPEKTRALBEREICHE
.
147
6.1.2
WECHSELWIRKUNGEN
ZWISCHEN
STRAHLUNG
UND
SUBSTANZ
.
149
6.1.3
LAMBERT-BEER'SCHES
GESETZ
.
150
6.1.4
AUFBAU
EINES
SPEKTRALPHOTOMETERS
.
151
6.1.5
FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE
.
152
6.2
KEMMAGNETISCHE
RESONANZSPEKTROSKOPIE.
153
6.2.1
MAGNETFELD,
KEMANREGUNG
UND
KEMSPIN
.
154
6.2.2
RESONANZBEDINGUNG
.
157
6.2.3
RELAXATION
.
158
6.2.4
IMPULSVERFAHREN
.
159
6.2.5
CHEMISCHE
VERSCHIEBUNG
.
159
6.2.6
SPIN-SPIN-KOPPLUNG.
161
6.2.7
AUFBAU
EINES
NMR-SPEKTROMETERS
.
162
6.2.8
STRUKTURAUFKLAERUNG
.
163
6.3
MASSENSPEKTROMETRIE
.
166
6.3.1
AUFBAU
EINES
MASSENSPEKTROMETERS
.
166
6.3.2
HARTE
LONISATIONSARTEN
.
168
6.3.2.1
ELEKTRONENSTOSSIONISATION
.
168
6.3.3
WEICHE
LONISATIONSARTEN
.
169
6.3.3.1
THERMOSPRAY
.
170
6.3.3.2
CHEMISCHE
IONISATION
.
170
6.3.3.3
FAST
ATOM
BOMBARDEMENT
.
170
6.3.3.4
ELECTROSPRAY
.
171
6.3.3.5
FELDIONISATION
.
171
6.3.3.6
FELDDESORPTION
.
172
6.3.4
SPEKTROMETERTYPEN
.
172
6.3.4.1
MAGNETFELD-SEKTORFELD-MASSENSPEKTROMETER.
172
6.3.4.2
FLUGZEITMASSENSPEKTROMETER
.
174
6.3.4.3
QUADRUPOLMASSENSPEKTROMETER
.
175
6.3.4.4
TANDEMMASSENSPEKTROMETER
.
175
6.3.6
SPEKTRENVERGLEICH
ZWISCHEN
HARTER
UND
WEICHER
IONISATION
.
176
6.4
LASER
DESORPTIONS/IONISATIONS
-
MASSENSPEKTROMETRIE
.
177
6.4.1
AUFBAU
VON
MALDI-TOF-MS-GERAETEN
.
178
6.4.2
PROBEPRAEPARATION
.
180
6.4.3
MOLEKULARGEWICHTSBESTIMMUNG
MITTELS
MALDI-MS
.
182
7
KOPPLUNGSTECHNIKEN
.
185
7.1
GASCHROMATOGRAPHIE
-
MASSENSPEKTROMETRIE
.
185
INHALTSVERZEICHNIS
XI
7.2
FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE
-
MASSENSPEKTROMETRIE
.
187
7.2.1
LC-THERMOSPRAY-MS
.
188
7.2.2
LC-ATMOSPHAERENDRUCK-MS
.
190
7.2.3
LC-FAST-ATOM-BOMBARDEMENT-MS
.
192
7.2.4
LC-ELECTROSPRAY-MS
.
193
7.2.5
LC-PARTICLE-BEAM-MS
.
194
7.2.6
P-LC-DIREKTEINLASS-MS
.
195
8
APPLIKATIONEN
KLEINER
BIOSUBSTANZEN
.
199
8.1
GLUTATHION
UND
METALLOTHIONEINE
IN
TOXISCHEN
UND
ANTITOXISCHEN
PROZESSEN
.
200
8.1.1
METALLOTHIONEINE
.
200
8.1.2
PHYTOCHELATINE
.
202
8.1.3
GLUTATHION
UND
THIOLSPECIES
.
203
8.1.4
DERIVATISIERUNG
UND
DETEKTION
VON
THIOLSPECIES
.
205
8.1.4.1
ELHNAN'S-REAGENZ
.
206
8.1.4.2
SANGER'S
REAGENZ
.
206
8.1.4.3
SUBSTITUIERTE
MALEINIMIDE
.
206
8.1.4.4
MONOBROMBIMAN
.
207
8.1.4.5
O-PHTHALALDEHYD
.
207
8.1.4.6
ELEKTROCHEMISCHE
DETEKTION
.
208
8.1.5
HPLC
VON
THIOLEN
UND
DISULFIDEN
.
209
8.1.5.1
KOVALENTE
CHROMATOGRAPHIE
.
209
8.1.5.2
YYSAURE
"
REVERSED-PHASE-HPLC
.
211
8.1.5.3
ELECTROSPRAY-MS
VON
GLUTATHION
UND
METABOLITEN
.
213
8.1.5.4
ANALYSE
BIOLOGISCHER
MATRICES
.
214
8.1.6
KAPILLARELEKTROPHORESE
VON
THIOLEN
UND
DISULFIDEN
.
216
8.1.7
KAPILLARELEKTROPHORESE
VON
PHYTOCHELATINEN
.
218
8.2
NUCLEOBASEN
UND
NUCLEOSIDE
IN
ZELLEN
UND
GEWEBEN
.
221
8.2.1
REVERSED-PHASE
UND
LONENPAARCHROMATOGRAPHIE
.
222
8.2.2
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
224
8.3
KOHLENHYDRATE
IN
HYDROLYSATEN
UND
LEBENSMITTELN
.
225
8.3.1
CHROMATOGRAPHIE
AN
AMINOPHASEN
.
225
8.3.2
HPAEC-PAD-TECHNIK
.
229
8.3.3
KAPILLARELEKTROPHORESE
.
231
8.4
SAEUREN
IN
BIOTECHNOLOGISCHEN
PROZESSEN
UND
PRODUKTEN
.
232
8.4.1
ORGANISCHE
SAEUREN
IN
FERMENTATIONSMEDIEN
.
232
8.4.1.1
LONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE
VON
ORGANISCHEN
SAEUREN.
234
8.4.1.2
LONENAUSSCHLUSSCHROMATOGRAPHIE
VON
NIEDEREN
ORGANISCHEN
SAEUREN
.
236
8.4.2
FETTSAEUREN
IN
HEFEN
UND
BAKTERIEN
.
238
8.4.2.1
MODIFIZIERUNGEN
UND
KAPILLARGASCHROMATOGRAPHIE
.
240
8.4.2.2
KAPILLARGASCHROMATOGRAPHIE
-
MASSENSPEKTROMETRIE
.
243
XN
INHALTSVERZEICHNIS
9
APPLIKATIONEN
GROSSER
BIOMOLEKUELE
.247
9.1
ENZYME
VON
THERMOPHILEN
MIKROORGANISMEN
.
247
9.1.1
ISOLIERUNG
DER
ENZYMFRAKTIONEN
.
247
9.1.2
BIOCHROMATOGRAPHIE
.
249
9.2
NUCLEOTIDE
IN
GEWEBEN
UND
VON
DNA-SPALTPRODUKTEN
.
253
9.2.1
LONENPAARCHROMATOGRAPHIE
.
254
9.2.2
KAPILLARGELELEKTROPHORESE
VON
DNA-FRAGMENTEN
.
256
9.3
GLYCAN-STRUKTUREN
VON
GLYCOPROTEINEN
.
260
9.3.1
PROFILANALYSEN
DER
GLYCANE
.
262
9.3.1.1
MONOSACCHARID-MAPPING
MITTELS
HPAEC-PAD
.
262
9.3.1.2
A-GLYCAN-TRENNUNGEN
MIT
SPEZIELLEN
HPLC-METHODEN
.
263
9.3.2
STRUKTURANALYSEN
DER
GLYCANE
.
264
9.3.2.1
GC-MS
UND
METHYLIERUNGSANALYSE
.
265
9.3.2.2
FAST-ATOM-BOMBARDEMENT
.
266
9.3.3.3
LC-ELECTROSPRAY-MS
.
267
9.3.3.4
MALDI-TOF-MS
.
268
9.3.2.5
MALDI-PSD-TOF-MS
.
269
9.3.2.5
'H-NMR
.
274
9.4
PHOSPHOLIPIDE
IN
BIOLOGISCHEN
EXTRAKTEN
.
276
9.4.1
FLUESSIGCHROMATOGRAPHIE
.
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