Zur Hydrolyse von Proteinen in Anwesenheit von nativem und immobilisiertem Pepsin A: Bestimmung der Kinetik mittels konduktometrischer Messungen
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1998
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
EINLEITUNG
UND
PROBLEMSTELLUNG
.
1
2
ALLGEMEINE
EIGENSCHAFTEN
VON
PEPSIN
A
UND
OVALBUMIN
.
4
2.1
DAS
ENZYM
PEPSIN
A
.
4
2.1.1
STRUKTUR
UND
WIRKUNGSWEISE
.
4
2.1.2
KATALYSEMECHANISMUS
.
8
2.2
EIGENSCHAFTEN
DES
SUBSTRATES
OVALBUMIN
.
10
3
BESTIMMUNG
DER
PEPSINAKTIVITAET
.
13
3.1
KONDUKTOMETRIE
.
13
3.2
BESCHREIBUNG
DES
MESS
VORGANGES
BEI
VERWENDUNG
VON
PEPSIN
A
.
16
3.3
ENTWICKLUNG
EINES
STANDARDISIERTEN
MESSVERFAHRENS
.
17
4
KONDUKTOMETRISCHE
UNTERSUCHUNGEN
AM
NATIVEN
PEPSIN
A
.
19
4.1
PH-ABHAENGIGKEIT
DER
PEPSINAKTIVITAET
.
19
4.2
EINFLUSS
DER
SUBSTRATKONZENTRATION
.
20
4.3
THERMISCHE
STABILITAET
DES
PEPSINS
A
.
22
4.3.1
BESTIMMUNG
DES
TEMPERATURKOEFFIZIENTEN
.
22
4.3.2
TEMPERATURVERHALTEN
VON
NATIVEM
PEPSIN
A
.
23
4.3.2.1
BESTIMMUNG
DER
AKTIVIERUNGSENERGIE
E
A
.
24
4.3.2.2
BESTIMMUNG
DER
INAKTIVIERUNGSENERGIE
E;
.
25
4.4
BESTIMMUNG
DER
SPEZIFISCHEN
AKTIVITAET
DES
ENZYMS
PEPSIN
A
.
29
4.5
EINFLUSS
ORGANISCHER
LOESUNGSMITTEL
AUF
DIE
AKTIVITAET
DES
NATIVEN
PEPSINS
A
.
30
4.5.1
EINFLUSS
DER
TEMPERATUR
BEI
DER
INKUBATION
IN
ORGANISCHEN
LOESUNGSMITTELN
.
30
4.5.2
LAGERSTABILITAET
IN
ORGANISCHEN
LOESUNGMITTELN
.
33
5
IMMOBILISIERUNG
VON
PEPSIN
A
.
35
5.1
IMMOBILISIERUNGSMETHODEN
.
35
5.2
EXPERIMENTELLE
ERGEBNISSE
UNTERSCHIEDLICHER
IMMOBUEISIERUNGSARTEN
.
40
5.2.1
KOVALENTE
IMMOBILISIERUNG
UNTER
VERWENDUNG
VON
VA-EPOXY
BIOSYNTH
.
40
5.2.1.1
DIREKTE
KOVALENTE
IMMOBILISIERUNG
MIT
VA-EPOXY
BIOSYNTH.
41
5.2.1.1.1
IMMOBILISIERUNGSSCHEMA
.
41
5.2.1.1.2
VARIATION
DES
REAKTIONSMEDIUMS
.
43
5.2.1.1.3
VARIATION
DER
REAKTIONSZEIT
IN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
44
5.2.1.1.4
VARIATION
DES
ENZYMANGEBOTES
IN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
45
5.2.1.1.5
VARIATION
DES
TRAEGERANGEBOTES
.
48
5.2.1.1.6
IMMOBILISIERUNG
IN
ORGANISCHEN
LOESUNGSMITTELN
.
50
5.2.1.1.7
LAGERUNGSUNTERSUCHUNGEN
.
51
5.2.1.2
IMMOBILISIERUNG
VON
PEPSIN
AN
VA-EPOXY
BIOSYNTH
UNTER
VERWENDUNG
DES
SPACERS
ADSD
.
55
5.2.1.2.1
HERSTELLUNG
DES
KATALYSATORS
.
55
5.2.1.2.2
VARIATION
DER
ADSD-MENGE
.
57
5.2.1.2.3
EINFLUSS
DER
REAKTIONSZEIT
DES
SPACERS
ADSD
.
58
5.2.1.2.4
EINFLUSS
DES
ENZYMANGEBOTES
AUF
DIE
IMMOBILISIERUNG
IN
DEN
MEDIEN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
60
5.2.1.2.5
EINFLUSS
DER
KONTAKTZEIT
DES
PEPSINS
IN
DEN
MEDIEN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
63
5.2.1.2.6
IMMOBILISIERUNG
IN
ORGANISCHEN
LOESUNGSMITTELN
.
67
5.2.1.2.7
LAGERUNGSUNTERSUCHUNGEN
.
70
5.2.2
IMMOBILISIERUNG
AN
CAB-OSIL
M-5
.
74
5.2.2.1
ADSORPTIVE
IMMOBILISIERUNG
VON
PEPSIN
AN
CAB-OSIL
M-5
.
74
5.2.2.1.1
VARIATION
DER
REAKTIONSZEIT
IN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
75
5.2.2.1.2
VARIATION
DES
PEPSINANGEBOTES
IN
WASSER
.
78
5.2.2.1.3
DESORPTIONSVERHALTEN
DES
TRAEGERS
CAB-OSIL
M-5
.
79
5.2.2.2
IONISCHE
IMMOBILISIERUNG
AN
CAB-AMINOSIL
.
82
5.2.2.2.1
HERSTELLUNG
DES
TRAEGERMATERIALS
.
82
5.2.2.2.2
EINFLUSS
DES
ENZYMANGEBOTES
.
84
5.2.2.2.3
GEGENUEBERSTELLUNG
VERSCHIEDENER
LOESUNGSMITTEL
.
85
5.2.23
KOVALENTE
IMMOBILISIERUNG
AN
CAB-AMINOSIL
MITTELS
EINES
CARBODIIMIDS
ALS
KUPPLUNGSVERMITTLER
.
89
5.2.23.1
IMMOBILISIERUNGSSCHEMA
.
89
5.2.23.2
VARIATION
DER
CARBODIIMIDMENGE
.
91
5.2.233
EINFLUSS
DES
ENZYMANGEBOTES
.
92
5.2.23.4
VARIATION
DER
REAKTIONSZEIT
.
94
5.2.23.5
VERGLEICH
DER
IMMOBILISIERUNG
MIT
UND
OHNE
VERWENDUNG
VON
SALZSAEURE
.
95
5.2.23.6
LAGERUNGSUNTERSUCHUNGEN
.
97
5.2.2.4
KOVALENTE
IMMOBILISIERUNG
AN
CAB-AMINOSIL-GDA
.
100
5.2.2.4.1
HERSTELLUNG
DES
TRAEGERMATERIALS
.
100
5.2.2.4.2
VARIATION
DER
REAKTIONSDAUER
IN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
102
5.2.2.43
EINFLUSS
DES
ENZYMANGEBOTES
IN
WASSER
UND
CITRATPUFFER
.
104
5.2.2.4.4
LAGERUNTERSUCHUNGEN
.
106
53
VERGLEICH
DER
KINETISCHEN
DATEN
DER
OPTIMIERTEN
INUNOBILISIATE
UND
DES
NATIVEN
ENZYMS
.
109
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
112
6.1
ZUSAMMENFASSUNG
(DEUTSCH)
.
112
6.2
ZUSAMMENFASSUNG
(ENGLISCH)
.
116
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
120
8
ANHANG
.
126
A)
PHOTOMETRIE
ZUR
PROTEINBESTIMMUNG
NACH
BIURET
.
126
B)
PROBENVORBEREITUNG
ZUR
RASTERELEKTRONENMIKROSKOPIE
.
127
C)
ABKUERZUNGEN
.
128
D)
VERWENDETE
CHEMIKALIEN
.
130 |
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| topic_facet | Pepsin Proteine Reaktionskinetik Konduktometrie Hydrolyse Hochschulschrift |
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