Inhibition der Clotbildung in vitro und in vivo durch antikörpergerichtetes Hirudin:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Heidelberg, Univ., Diss., 1998 (Nicht für den Austausch) |
| Beschreibung: | 101 Bl. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 8
1.1 HIRUDIN G
1.1.1 AUFBAU G
1.1.2 THROMBININHIBITION DURCH HIRUDIN 9
1.2 ANTIKOERPER-TARGETING
14
1.2.1 PRINZIP 14
1.2.2 7E3
I5
1.2.3 59D8
16
1.3 ZIELSETZUNG DER ARBEIT 16
2 MATERIAL 18
2.1 HIRUDIN LG
2.2 ANTIKOERPER LG
2.3 PUFFER UND LOESUNGEN LG
2.4 SONSTIGE MATERIALIEN 22
2.5 GERAETE UND TECHNISCHE HILFSMITTEL 24
2.6 VERSUCHSTIERE 25
3 METHODIK 27
3.1 ALLGEMEINE METHODEN 27
3.1.1 PH-MESSUNG 27
3.1.2 PROTEINBESTIMMUNG 27
3.1.3 PHOTOMETRIE 28
3.1.4 ULTRAFILTRATION 28
3.1.5 STERILFILTRATION 28
3.1.6 DIALYSE 28
3.1.7 ZENTRIFUGATION 28
3.1.8 LYOPHILISATION 29
3.1.9 RADIOAKTIVITAETSBESTIMMUNG 29
3.1.10 GELELEKTROPHORESE 29
3.2 GELCHROMATOGRAPHIE 29
3.3 BIOCHEMISCHE KONJUGATION VON HIRUDIN AN EINEN MONOKLONALEN
ANTIKOERPER 29
3.3.1 HIRUDIN-MODIFIKATION 30
3.3.2 7E3 F(AB')
2 - VORBEHANDLUNG FUER KONJUGATION 31
3.3.3 HIRUDIN-7E3-KOPPLUNG 31
3.4 AKTIVITAETSTEST S-2238 32
3.4.1 ENDPUNKT-MESSUNG (HEIDELBERG) 32
3.4.2 KINETISCHE MESSUNG (ATLANTA) 3 3
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
HTTP://D-NB.INFO/953833488
3.5 GPIIB/HIA-ASSAY J.
3.5
.1
MODIFIZIERTES GPIIMIIA-ASSAY
35
3.6 HIRUDIN-BIOCKED-CIOT-ASSAY
3
6
3.6.1 PRINZIP ^
3.6.2 KONJUGATE UND PLASMA
37
3.6.3 VERSUCHSBEDINGUNGEN:
37
3.6.4 VERSUCHSDURCHFUEHRUNG:
3
G
3.6.5 DOSIS-WIRKUNGS-KURVE
39
3.6.6 AUSWERTUNG
39
3.7 AGGREGOMETERSTUDIEN
39
3.7.1 PRINZIP
39
3.7.2 VERSUCHSDURCHFUEHRUNG
39
3.8 SDS-POLYACRVLAMID-GELELEKTROPHORESE
40
3.8.1 PRINZIP
40
3.8.2 PROBENPRAEPARATION
40
3.8.3 GELPRAEPARATION
40
3.8.4 GELFAERBUNG
41
3.9 PAVIAN-EXPERIMENTE
42
3.9.1 AUSWAHL DER TIERE
42
3.9.2 SHUNTMODELL
43
3.9.3 VERSUCHSABLAUF
44
4 ERGEBNISSE 45
4.1 SYNTHESE DES ANTIKOERPERGERICHTETEN ANTITHROMBOTISCHEN MOLEKUELS
HIRUDIN-7E3 45
4.1.1 HIRUDIN-MODIFIKATION
46
4.1.2 REDUKTION VON 7E3-(FAB'): 48
4.1.3 HIRUDIN-7E3-KOPPLUNG
49
4.2 CHARAKTERISIERUNG DES HIRUDIN-7E3-KONJUGATES IN VITRO
51
4.2.1 AKTIVITAETSTEST S-2238: THROMBININHIBITION IN ABWESENHEIT DES
ZIELMOLEKUELS 51
4.2.2 GPIIH/IIIA-ASSAY 52
4.2.3 HIRUDIN-BLOCKED-CLOT-ASSAV MIT HUMANEM PLASMA 56
4.2.4 AGGREGOMETERSTUDIEN 60
4.3 CHARAKTERISIERUNG DES HIRUDIN-59D8-KONJUGATES IN VITRO 65
4.3.1 HIRUDIN-BLOCKED-CLOT-ASSAV MIT PAVIAN-PLASMA 65
4.4 CHARAKTERISIERUNG DES HIRUDIN-59D8-KONJUGATES IN VIVO 69
5 DISKUSSION 78
5.1 HIRUDIN 78
5.2 SYNTHESE DES ANTIKOERPERGERICHTETEN ANTITHROMBOTISCHEN MOLEKUELS
HIRUDIN-7E3 78
5.2.1 GPIIB/IIIA 78
5.2.2 7E3 78
5.2.3 KOPPLUNG VON HIRUDIN AN 7E3 78
5.3 CHARAKTERISIERUNG DES HIRUDIN-7E3-KONJUGATES IN VITRO 75
5.3.1 AKTIVITAETSTESTS 79
5.3.2 GPIIB/IIIA-ASSAV 80
5.3.3 HIRUDIN-BLOCKED-CLOT-ASSAY MIT HUMANEM PLASMA 81
5.3.4 AGGREGATIONSSTUDIEN 81
5.4 SYNTHESE DES ANTIKOERPERGERICHTETEN ANTITHROMBOTISCHEN MOLEKUELS
HIRUDIN-59D8
5.4.1 SS-15-22-PEPTID
5.4.2 59D8
5.4.3 KOPPLUNG VON HIRUDIN AN 59D8 UND VORVERSUCHE
5.5 CHARAKTERISIERUNG DES HIRUDIN-59D8-KONJUGATES IN VITRO MIT
PAVIAN-PLASMA
5.5.1 FUNKTIONSTEST IN PAVIAN-PLASMA
5.6 CHARAKTERISIERUNG DES HIRUDIN-59D8-KONJUGATES IN VIVO
5.7 SCHLUSSFOLGERUNG
6
ZUSAMMENFASSUNG
7 LEBENSLAUF
8
DANKSAGUNG
9 LITERATURVERZEICHNIS
82
82
82
82
83
83
83
85
86
88
90
91 |
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