Präparative "Free-Solution"-Isotachophorese zur Trennung von Serumlipoproteinen und Charakterisierung der Subfraktionen:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
|
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | VII, 180 S. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNISS
SEITE
I
INHALTSVERZEICHNIS
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
.
VI
1.
EINLEITUNG
.
1
1.1.
LIPOPROTEINSTOFFWECHSEL
.
1
1.1.1.
EINTEILUNG
UND
NOMENKLATUR
DER
LIPOPROTEINE
.
1
1.1.1.1.
LIPOPROTEINDICHTEKLASSEN
.
2
1.1.1.2.
ELEKTROPHORETISCHE
EINTEILUNG
DER
LIPOPROTEINE
.
3
1.1.1.3.
LIPOPROTEINFAMILIEN
.
3
1.1.2.
APOLIPOPROTEINE
.
4
1.1.2.1.
APOLIPOPROTEIN
A-L
.
4
1.1.2.2.
APOLIPOPROTEIN
A-IL
.
5
1.1.2.3.
APOLIPOPROTEIN
A-IV
.
6
1.1.2.4.
APOLIPOPROTEIN
B
.
7
1.1.2.5.
C-APOLIPOPROTEINE
.
8
1.1.2.5.1.
APOLIPOPROTEIN
C-L
.
8
1.1.2.5.2.
APOLIPOPROTEIN
C-IL
.
8
1.1.2.5.3.
APOLIPOPROTEIN
C-ILL
.
9
1.1.2.5.4.
APOLIPOPROTEIN
C-IV
.
9
1.1.2.6.
APOLIPOPROTEIN
0
.
9
1.1.2.7.
APOLIPOPROTEIN
E
.
10
1.1.2.8.
APOLIPOPROTEIN
F
UND
G
.
11
1.1.2.9.
APOLIPOPROTEIN
H
.
11
1.1.2.10.
APOLIPOPROTEIN
J
.
12
1.1.2.11.
APOLIPOPROTEIN
L
.
12
1.1.2.12.
LIPOPROTEIN-ASSOZIIERTER
GERINNUNGSINHIBITOR
(LACI)
.
13
1.1.2.13.
SERUM
AMYLOID
A (SAA)
.
13
1.1.2.14.
LIPOPOLYSACCHARID-BINDINGS
PROTEIN
(LBP)
.
14
1.1.3.
ENZYME
DES
LIPOPROTEINSTOFFWECHSELS
.
14
1.1.3.1.
LIPOPROTEIN
LIPASE
(LPL)
.
15
1.1.3.2.
HEPATISCHE
LIPASE
(HL)
.
15
1.1.3.3.
LECITHIN:CHOLESTERIN
ACYLTRANSFERASE
(LCAT)
.
16
1.1.3.4.
CHOLESTERINESTER-TRANSFERPROTEIN
(CETP)
.
16
1.1.3.5.
PHOSPHOLIPID-TRANSFERPROTEIN
(PLTP)
.
17
SEITE
N
_
INHALTSVERZEICHNIS
1.1.3.6.
PARAOXONASE
(PON)
.
18
1.1.4.
STOFFWECHSEL
APO
B-HALTIGER
LIPOPROTEINE
.
18
1.1.5.
HDL-STOFFWECHSEL
.
20
1.1.5.1.
HDL-SUBKLASSEN
.
20
1.1.5.1.1.
HDL-SUBKLASSEN
NACH
DICHTE
UND
GROESSE
.
20
1.1.5.1.2.
HDL-SUBKLASSEN
NACH
IMMUNAFFINITAET
.
22
1.1.5.1.3.
HDL-SUBKLASSEN
NACH
LADUNG
.
22
1.1.5.2.
SYNTHESE
DER
HDL
.
24
1.1.5.3.
REVERSER
CHOLESTERINTRANSPORT
UND
HDL-INTERKONVERSION
.
24
1.1.6.
Y-LIPOPROTEIN
E
(LP
E)
.
26
1.2.
ISOTACHOPHORESE
.
28
1.2.1.
THEORIE
DER
ELEKTROPHORETISCHEN
MIGRATION
.
28
1.2.2.
PRINZIP
DER
ISOTACHOPHORESE
.
29
1.2.2.1.
ZONENSCHAERFUNGSEFFEKT
.
32
1.2.2.2.
TEMPERATUREFFEKT
.
32
1.2.2.3.
KONZENTRATIONSEFFEKT
.
33
1.2.3.
SPACERTECHNIK
.
33
1.2.4.
ANALYTISCHE
ISOTACHOPHORESE
.
35
1.2.5.
PRAEPARATIVE
ISOTACHOPHORESE
.
35
2.
AUFGABENSTELLUNG
.
38
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
39
3.1.
MATERIAL
.
39
3.1.1.
GERAETE
.
39
3.1.2.
CHEMIKALIEN
.
40
3.2.
METHODEN
.
41
3.2.1.
ISOTACHOPHORESE
(ITP)
.
41
3.2.1.1.
ANALYTISCHE
ITP
.
41
3.2.1.2.
PRAEPARATIVE
ITP
.
43
3.2.2.
SEQUENTIELLE
ULTRAZENTRIFUGATION
.
46
3.2.3.
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
VON
PROTEINEN
.
47
INHAL
TSVERZEICHNISS
SEITE
HI
3.2.3.1.
GESAMTPROTEIN
NACH
SMITH
ET
AL.
(1985)
.
47
3.2.3.2.
IMMUNCHEMISCHE
PROTEINBESTIMMUNG
.
48
3.2.3.2.1.
ENZYME
LINKED
IMMUNOSORBANT
ASSAY
(ELISA)
.
48
3.2.3.2.2.
ELEKTROIMMUNDIFFUSION
.
53
3.2.4.
QUANTITATIVE
BESTIMMUNG
VON
LIPIDEN
.
54
3.2.4.1.
GESAMTCHOLESTERIN-COLORIMETRISCH
.
54
3.2.4.2.
GESAMTCHOLESTERIN-FLUORIMETRISCH
(HEIDERUND
BOYETT
1978)
.
55
3.2.4.3.
FREIES
CHOLESTERIN-FLUORIMETRISCH
.
56
3.2.4.4.
PHOSPHOLIPIDE-COLORIMETRISCH
.
57
3.2.5.
BESTIMMUNG
VON
ENZYMAKTIVITAETEN
.
58
3.2.5.1.
LEZITHIN:CHOLESTERIN
AZYLTRANSFERASE
(LCAT)-AKTIVITAET
.
58
3.2.5.2.
CHOLESTERINESTER-TRANSFER
(CET)-AKTIVITAET
.
60
3.2.5.3.
PHOSPHOLIPID-TRANSFER
(PLT)-AKTIVITAET
.
60
3.2.5.4.
PARAOXONASE-AKTIVITAET
UND
KONZENTRATION
.
61
3.2.6.
GELELEKTROPHORESE
.
65
3.2.6.1.
AGAROSGELELEKTROPHORESE
.
65
3.2.6.1.1.
PROTEINELEKTROPHORESE
.
65
3.2.6.1.2.
LIPOPROTEINELEKTROPHORESE
.
65
3.2.6.1.3.
AGAROSEGELELEKTROPHORESEBEI
PH
8,6
BZW.
BEI
PH
7,0
.
66
3.2.3.2.
POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
.
67
3.2.6.2.1.
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
NACH
LAEMMLI
(1970)
.67
3.2.6.2.2.
NATIVE
GRADIENTENGELELEKTROPHORESE
.
70
3.2.6.3.
ZWEIDIMENSIONALE
AGAROSE-POLYACRYLAMIDGRADIENTEN
GELELEKTROPHORESE
NACH
CASTRO
UND
FIELDING
(1988)
.
72
3.2.6.4.
ISOELEKTRISCHE
FOKUSSIERUNG
(IEF)
.
76
3.2.7.
METHODEN
ZUR
PROTEINFAERBUNG
.
78
3.2.7.1.
COOMASSIE-FAERBUNG
(BUMETTE
1981)
.
78
3.2.7.2.
SILBERFAERBUNG
.
79
3.2.7.3.
POUCEAU
ROT
FAERBUNG
.
80
3.2.8.
WESTERN
BLOT
.
81
3.2.8.1.
SEMIDRY
BLOTTING
.
81
3.2.8.2.
DETEKTION
VON
APO
A-L
(ASZTALOS
ET
AL.
1993)
.
82
3.2.8.3.
DETEKTION
VON
APO
E
.
83
3.2.8.4.
DETEKTION
VON
APO
C-ILL
.
84
3.2.8.5.
DETEKTION
VON
LBP
.
85
3.2.8.
ZELLKULTUR
.
86
SEITE
IV
INHALTSVERZEICHNIS
4.
ERGEBNISSE
.
87
4.1.
ANALYTISCHE
ISOTACHOPHORESE
VON
HUMANEM
SERUM
.
87
4.1.1.
DAS
ANALYTISCHE
ITP-DIAGRAMM
.
87
4.1.2.
PEAKIDENTIFIZIERUNG
DURCH
ZUGABEEXPERIMENTE
.
88
4.1.3.
ITP-DIAGRAMME
VON
SERUM
UND
PLASMA
.
90
4.1.4.
ITP-DIAGRAMME
VON
PATIENTENSEREN
.
91
4.1.5.
ITP-DIAGRAMME
NACH
SERUMINKUBATION
BEI
37
'
C
.
92
4.1.6.
ANALYTISCHE
ITP
MIT
NBD-CERAMID
FAERBUNG
.
95
4.2.
PRAEPARATIVE
ITP
VON
SERUM/PLASMA
.
97
4.2.1.
FARBSTOFFTRENNUNG
.
97
4.2.2.
PRAEPARATIVE
ITP
VON
SUDAN
SCHWARZ
GEFAERBTEM
UND
UNGEFAERBTEM
SERUM
.
99
4.2.3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ITP-FRAKTIONEN
NACH
PRAEPARATIVER
TRENNUNG
.
101
4.2.3.1.
ANALYTISCHE
ITP
.
101
4.2.3.2.
ELEKTROPHORETISCHE
MOBILITAET
.
103
4.2.3.3.
PROTEINVERTEILUNG
.
105
4.2.3.3.1.
GESAMTPROTEIN
.
105
4.2.3.3.2.
13%
SDS-PAGE
.
105
4.2.3.3.3.
APOLIPOPROTEINVERTEILUNG
.
106
4.2.3.4.
LIPID-VERTEILUNG
.
111
4.2.3.4.1.
CHOLESTERIN
.
111
4.2.3.4.2.
PHOSPHOLIPIDE
.
112
4.2.3.5.
VERTEILUNG
DER
ENZYMAKTIVITAETEN
.
113
4.2.3.5.1.
LEZITHIN:CHOLESTERIN
AZYLTRANSFERASE-AKTIVITAET
.
113
4.2.3.5.2.
CHOLESTERINESTER-TRANSFER-AKTIVITAET
.
113
4.2.3.5.3.
PHOSPHOLIPID-TRANSFER-AKTIVITAET
.
115
4.2.3.5.4.
PARAOXONASE-AKTIVITAET
UND
PROTEINVERTEILUNG
.
115
4.2.4.
IDENTIFIKATION
VON
HDL-SUBKLASSSEN
.
117
4.2.4.1.
HDL-SUBKLASSEN
NACH
PARTIKELGROESSE
.
117
4.2.4.2.
HDL-SUBKLASSEN
NACH
IMMUNAFFINITAET
.
119
4.2.4.3.
HDL-SUBKLASSEN
NACH
LADUNG
UND
GROESSE
.
120
INHALTSVERZEICHNISS
SEITE
V
4.3.
ETABLIERUNG
EINES
APO
E
ENZYME-LLNKED
IMMUNOSORBENT
ASSAY
(ELISA).
.122
4.3.1.
METHODE
.
122
4.3.2.
PRAEZISION
DER
MESSUNG
.
123
4.3.3.VERGLEICH
MIT
NEPHELOMETRISCHER
APO
E-BESTIMMUNG
.
124
4.3.4.
KREUZREAKTIVITAET
UND
INTERFERENZ
.
125
4.4.
VERSUCHE
ZUM
Y-LP
E
.
129
4.4.1.
ANTI-APO
E-BLOT
.
129
4.4.2.
Y-LP
E
BLOT
.
131
4.4.3.
Y-LP
E
ALS
CHOLESTERINAKZEPTOR
.
134
5.
DISKUSSION
.
137
5.1.
ANALYTISCHE
ISOTACHOHORESE
.
137
5.2.
PRAEPARATIVE
ISOTACHOPHORESE
.
140
5.2.1.
METHODEN
ZUR
PRAEPARATIVEN
TRENNUNG
.
140
5.2.2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ITP-FRAKTIONEN
.
141
5.2.3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
HDL-SUBFRAKTIONEN
.
149
5.3.
APO
E-ELISA
.
151
5.4.
Y-LP
E
.
154
5.4.1.
ANTI-APO
E
BLOT
.
155
5.4.2.
Y-LP
E
ALS
CHOLESTERINAKZEPTOR
.
156
6.
ZUSAMMENFASSUNG
.
159
7.
LITERATURVERZEICHNIS
.
160 |
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| author | Ploch, Judith |
| author_facet | Ploch, Judith |
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| author_sort | Ploch, Judith |
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| discipline | Chemie / Pharmazie |
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| spelling | Ploch, Judith Verfasser aut Präparative "Free-Solution"-Isotachophorese zur Trennung von Serumlipoproteinen und Charakterisierung der Subfraktionen vorgelegt von Judith Ploch 1998 VII, 180 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Regensburg, Univ., Diss. Serumlipoproteine (DE-588)4181061-2 gnd rswk-swf Isotachophorese (DE-588)4162565-1 gnd rswk-swf High-density-Lipoproteine (DE-588)4159842-8 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content High-density-Lipoproteine (DE-588)4159842-8 s Isotachophorese (DE-588)4162565-1 s DE-604 Serumlipoproteine (DE-588)4181061-2 s DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=008181412&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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