Untersuchungen zur Expression von Apoptosegenen an humanen Pankreaskarzinomzellinien und Pankreasgewebe mittels Northern-Blot, Western-Blot und PCR:
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| Sprache: | German |
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1997
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| Beschreibung: | Ulm, Univ., Diss., 1998 |
| Beschreibung: | 78 Bl. Ill., graph. Darst. |
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INHALTSVERZEICHNIS:
0. VERZEICHNIS DER ABKUERZUNGEN 1
1 .EINLEITUNG: 2
1.1. BEKANNTE MOLEKULARBIOLOGISCHE MECHANISMEN DER KARZINOGENESE 2
1.1.1. WACHSTUMSFAKTOREN UND WACHSTUMSFAKTORREZEPTOREN 2
1.1.2. ONKOGENE UND TUMORSUPPRESSORGENE 3
1.2. DIE ROLLE DER APOPTOSE BEI NEOPLASIEN 5
1.3. DIEBEL-FAMILIE 7
1.3.1. BCL-2 7
1.3.2. BCL-XL UND BCL-XS 9
1.3.3. BAX-A 10
1.4. C-MYC 12
1.5. FRAGESTELLUNG 13
2. MATERIALIEN UND METHODEN 14
2.1. ZELLKULTUR 14
2.2. RNA-ISOLIERUNG 16
2.2.1. RNA-ISOLIERUNG AUS DER ZELLKULTUR 17
2.2.2. RNA-ISOLIERUNG AUS HUMANEM SPENDERGEWEBE 18
2.3. NORTHEM-BLOT 19
2.3.1. IN VITRO TRANSSKRIPTION ZUR HERSTELLUNG EINER 19
RNA-EINZELSTRANG-SONDE
2.3.2. HERSTELLUNG EINER DNA-SONDE ZUR NORTHEM-BLOT HYBRIDISIERUNG 22
2.3.3. NORTHEM-BLOTTING 24
2.3 .4. NORTHEM-BLOT HYBRIDISIERUNG 27
2.4. PCR 29
2.4. L.RT-PCR 30
2.4.2. PCR 30
2.5. WESTEM-BLOT 31
2.5.1. PROTEINEXTRAKTION 33
2.5.2. SDS-POLYACRYLAMIDELEKTROPHORESE 34
2.5.3. WESTEM-BLOTTING 34
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3. ERGEBNISSE 36
3.1. ERGEBNISSE DES NORTHEM-BLOTS 36
3.1.1. BCL-XS UND BCL-XL 36
3.1.2. BCL-2 40
3.1.3. BAX-A 42
3.1.4. C-MYC 44
3.2. ERGEBNISSE DER PCR 45
3.3. ERGEBNISSE DES WESTEM-BLOTS 47
3.3.1. BCL-X 47
3.3.2. BCL-2 48
3.3.3. BAX-A 49
3.4. ZUSAMMENFASSENDE DARSTELLUNG DER ERGEBNISSE 49
4. DISKUSSION 52
4.1. DIE DYSREGULATION DER APOPTOSE ALS MOEGLICHER 52
FAKTOR BEI DER KARZINOGENESE
4.1.1. PANKREASKARZINOM, MAMMAKARZINOM UND BRONCHIALKARZINOM 52
UND DEREN GEMEINSAME MOLEKULARBIOLOGISCHE PATHOMECHANISMEN
4.2. ZELLINIEN ALS UNTERSUCHUNGSMATERIAL 54
4.3. BEWERTUNG DER DURCHGEFIIHRTEN METHODEN 57
4.3.1. DIE EXPRESSION VON BCL-2, BCL-X UND BAX IM NORTHEM-BLOT 57
4.3.2. DIE UNTERSUCHUNG DER BCL-X SPEZIES IN DER
POLYMERASEKETTENREAKTION 58
4.3.3. DIE PROTEINEXPRESSION VON BCL-2, BCL-X UND BAX IM WESTERN-BLOT 59
4.4. DER VERGLEICH VON PANKREASKARZINOM, MAMMAKARZINOM UND 59
BRONCHIALKARZINOM HINSICHTLICH DER EXPRESSION VON
BCL-2, BCL-X, BAX UND P53
4.5. DIE EXPRESSION DER BCL-FAMILIE IN ZUSAMMENHANG MIT APOPTOSE- 64
UND MULTIDRUGRESISTENZ
5. ZUSAMMENFASSUNG 67
6. LITERATURVERZEICHNIS
69 |
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