Entwicklung und Anwendung neuer Strategien und DNA-Sonden zur molekular zytogenetischen Analyse chromosomaler Umbauten:
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
_
L
INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1
ZUSAMMENFASSUNG
1
2
EINLEITUNG
7
3
MATERIAL
UND
METHODEN
33
4
ERGEBNISSE
74
5
DISKUSSION
195
6
LITERATUR
268
7
ANHANG
293
8
KOOPERATION
MIT
ANDEREN
WISSENSCHAFTLERN
297
9
DANKSAGUNG
298
10
LEBENSLAUF
299
1
ZUSAMMENFASSUNG
1
2
EINLEITUNG
7
2.1
ENTWICKLUNGEN
DER
MOLEKULAREN
ZYTOGENETIK
8
2.1.1
YYRECIPROCAL
CHROMOSOME
PAINTING
"
8
2.1.2
SUBCHROMOSOMALE
DNA
SONDEN
11
2.1.3
YYMULTICOLOUR
"
FISH
12
2.1.4
STRATEGIEN
ZUR
FARBLICHEN
DIFFERENZIERUNG
VON
CHROMOSOMEN
13
2.2
DIE
SYSTEMATIK
DER
PRIMATEN
15
2.2.1
METHODEN
DER
VERGLEICHENDEN
BIOLOGIE
15
2.2.2
ERGEBNISSE
DER
VERGLEICHENDEN
KARYOTYPANALYSE
18
2.2.2.1
KLASSISCHE
ZYTOGENETIK
19
2.2.2
2
MOLEKULARE
ZYTOGENETIK
23
2.2.3
BIOLOGIE
UND
PHYLOGENIE
UNTERSUCHTER
PRIMATEN
UND
SCANDENTIA
26
2.3
ZIELSETZUNG
DER
VORLIEGENDEN
ARBEIT
31
3
MATERIAL
UND
METHODEN
33
3.1
ZELLMATERIAL
33
3.2
DNA
SONDEN
34
INHALTSVERZEICHNIS
_
I_L
3.2.1
CEPH
MEGA
YAC
KLONE
34
3.2.2
COSMID
KLONE
34
3.2.3
DNA
SONDEN
AUS
SOMATISCHEN
MENSCH-HAMSTER
HYBRIDZELLINIEN
35
3.2.4
CHROMOSOMENSPEZIFISCHE
DNA
SONDEN
35
3.2.5
OLIGONUKLEOTIDE
36
3.3
ZELLKULTUR
36
3.3.1
PRIMAERE
LYMPHOZYTENKULTUREN
36
3.3.2
KULTUR
LYMPHOBLASTOIDER
ZELLINIEN
37
3.3.3
ETABLIERUNG
VON
FIBROBLASTENKULTUREN
37
3.3
4
EINFRIEREN
UND
AUFTAUEN
VON
ZELLKULTUREN
38
3.4
METAPHASECHROMOSOMENPRAEPARATION
FUER
DIE
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
39
3
5
PRAEPARATION
GENOMISCHER
DNA
40
3.6
GENERIERUNG
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
MITTELS
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
UND
DOP-PCR
41
3.6.1
CHROMOSOMENPRAEPARATION
43
3.6.2
AMPLIFIZIERUNG
DER
SORTIERTEN
CHROMOSOMEN
UEBER
DOP-PCR
43
3.7
ANREICHERUNG
MENSCHLICHER
DNA
AUS
YACS
UND
SOMATISCHEN
HYBRIDZELLINIEN
DURCH
ALU-PCR
46
3.8
NICHTRADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
DNA
SONDEN
50
3.8.1
VERWENDETE
REPORTERMOLEKUELE
50
3.8.2
NICKTRANSLATION
51
3.8.3
ALU-PCR
53
3.8.4
DOP-PCR
54
3.9
CHROMOSOMEN
IN
SITU
HYBRIDISIERUNG
56
3.91
VORBEREITUNG
DER
DNA
SONDEN
57
3.9.2
DENATURIERUNG
VON
DNA
SONDEN
UND
METAPHASEPRAEPARATEN
59
3.9.3
HYBRIDISIERUNG
IN
SITU
UND
STRINGENZWASCHUNG
60
3.10
PRINS
60
3.11
DETEKTION
DES
HYBRIDISIERUNGSSIGNALS
62
3.11.1
VERWENDETE
DETEKTIONSSYSTEME
63
3.11.2
NACHWEIS
64
INHALTSVERZEICHNIS
III
3.11.3
CHROMOSOMALE
GEGENFAERBUNG
MIT
DAPI
65
3.11.4
EINDECKEN
VON
FLUORESZENZPRAEPARATEN
65
3.12
AUSWERTUNG
66
3.12.1
MIKROSKOPIE
66
3.12.2
BILDVERARBEITUNG
UND
DOKUMENTATION
67
3.12.3
ANALYSE
DER
REPRODUZIERBARKEIT
VON
HYBRIDISIERUNGSMUSTERN
69
3.13
MATERIAL
69
3.13.1
CHEMIKALIEN
69
3.13.2
NAEHRMEDIEN
UND
ZUSAETZE
70
3.13.3
ENZYME
UND
NUKLEINSAEUREN
70
3.13.4
BIOTINNACHWEIS
UND
ANTIKOERPER
71
3.13.5
PUFFER-LOESUNGEN
71
4
ERGEBNISSE
74
4.1
FARBLICHE
DIFFERENZIERUNG
DER
CHROMOSOMEN
HOEHERER
PRIMATEN
UND
VON
ZELLINIEN
DES
CHINESISCHEN
HAMSTERS
DURCH
YYMULTICOLOUR
"
FISH
74
4.1.1
YYCHROMOSOME
BAR
CODING"
VON
PRIMATEN
MITTELS
DNA
SONDEN
AUS
SOMATISCHEN
MENSCH/HAMSTER
HYBRIDZELLINIEN
74
4
1.1.1
ENTSTEHUNG
DES
YYCHROMOSOME
BAR
CODES
"
74
4.1.1.2
UEBERPRUEFUNG
DER
REPRODUZIERBARKEIT
DES
HYBRIDISIERUNGSMUSTERS
78
4.1.1.3
ANWENDUNGEN
DES
YYCHROMOSOME
BAR
CODES
"
85
4.1.1.3.1
KLINISCH
ZYTOGENETISCHE
DIAGNOSTIK
86
4.1.1.3.2
PHYSIKALISCHE
KARTIERUNG
VON
DNA
SONDEN
89
4.1.1.3.3
IDENTIFIZIERUNG
MENSCHLICHER
CHROMOSOMEN
IN
SOMATISCHEN
HYBRIDZELLINIEN
90
4.1
1.3.4
VERGLEICHENDE
KARYOTYPANALYSE
BEI
PRIMATEN
92
4.1.2
GENERIERUNG
VON
YYCHROMOSOME
BAR
CODES
"
MITTELS
CHROMOSOMEN
SPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUS
REARRANGIERTEN
ZELLINIEN
109
4.1.2.1
YYBAR
CODING
"
DER
CHROMOSOMEN
DES
MENSCHEN
UND
HOEHERER
PRIMATEN
109
4.1.2.1.1
ETABLIERUNG
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
VON
HYLOBATES
CONCOLOR
UND
HYLOBATES
SYNDACTYLUS
110
INHALTSVERZEICHNIS
_
LY
4.1.2.1.2
KARTIERUNG
GIBBON
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
MENSCHLICHE
METAPHASECHROMOSOMEN
112
4.1.2.1.3
KARTIERUNG
H.
CONCOLOR
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASECHROMOSOMEN
VON
H.
SYNDACTYLUS
116
4.1.2.1.4
DER
CONCOLOR
GIBBON
YYCHROMOSOME
BAR
CODE
"
119
4.1.2.1.4.1
ANWENDUNGEN
DER
KLINISCHEN
ZYTOGENETIK
120
4.1.2.1.4.2
VERGLEICHENDE
KARYOTYPANALYSE
BEI
PRIMATEN
120
4.1.2.1.5
DER
SIAMANG
YYCHROMOSOME
BAR
CODE
"
126
4.1.2.1.5.1
ANWENDUNGEN
DER
KLINISCHEN
ZYTOGENETIK
127
4.1.2.1.5.2
VERGLEICHENDE
KARYOTYPANALYSE
BEI
PRIMATEN
128
4.1.2.2
YYCHROMOSOME
BAR
CODING
"
VON
CRICETINAE
140
4.1.2.2.1
ETABLIERUNG
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
DER
ZELLINIEN
LIA
16L
UND
H-B6
140
4.1.2.2.2
ENTSTEHUNG
DER
YYCHROMOSOME
BAR
CODES
"
144
4.1.2.2.3
UEBERPRUEFUNG
DER
KARYOTYPSTABILITAET
EINER
CHINESE
HAMSTER
OVARY
ZELLINIE
147
4.2
WEITERFUEHRENDE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
KARYOTYPEVOLUTION
DER
PRIMATEN
149
4.2.1
UNTERSUCHUNGEN
BEI
MENSCHENAFFEN
MITTELS
YYREVERSE
PAINTING"
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
VON
PAN
TROGLODYTES,
GORILLA
GORILLA
UND
PONGO
PYGMAEUS
150
4.2.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
EVOLUTION
DER
KARYOTYPEN
BEI
LEMUREN
UND
SPITZHOERNCHEN
156
4.2.2.1
FISH
MENSCHLICHER
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASEN
VON
E.M.MACACO
UND
EJ.MAYOTTENSIS
156
4.2.2.2
FISH
LEMUR
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASEN
VON
E.M.MACACO
UND
E.F.MAYOTTENSIS
159
4.2.2.3
FISH
E.M.MACACO
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASEN
DES
MENSCHEN
164
4.2.2.4
FISH
MENSCHLICHER
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASEN
VON
T.
BELANGEN
166
INHALTSVERZEICHNIS
V
4.2.2.5
FISH
T.
BELANGEN
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASEN
DES
MENSCHEN
168
4.2.2.6
FISH
T.
BELANGEN
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
AUF
METAPHASEN
VON
E.M.MACACO
171
4.2.3
VERGLEICHENDE
FEINKARTIERUNG
DER
CHROMOSOM
3
HOMOLOGEN
BEI
PRIMATEN
174
4.2.3.1
VERWENDETE
SUBCHROMOSOMALE
DNA
SONDEN
174
4.2.3.2
ERGEBNISSE
DER
VERGLEICHENDEN
KARTIERUNG
175
4.3
PRAKTISCHE
ANWENDUNGEN
DER
PRIMATEN
CHROMOSOMENSPEZIFISCHEN
DNA
SONDEN
IN
DER
MOLEKULAREN
ZYTOGENETIK
183
4.3.1
DETEKTION
CHROMOSOMALER
ABERRATIONEN
BEIM
MENSCHEN
184
4.3.1.1
YYWHOLE
CHROMOSOME
PAINTING
"
SONDEN
184
4
3.1.2
.SUBREGIONAL
CHROMOSOME
PAINTING"
SONDEN
189
4.3.2
CHARAKTERISIERUNG
VON
ZELLINIEN
MITTELS
FISH
191
5
DISKUSSION
195
5.1
TECHNISCHE
ASPEKTE
DIESER
ARBEIT
195
5.1.1
YYCHROMOSOME
BAR
CODES
"
IM
VERGLEICH
195
51.1.1
YYCHROMOSOME
BAR
CODING
"
MIT
YYFRAGMENTED
HYBRIDS
"
199
5.1.1.2
YYCHROMOSOME
BAR
CODING
"
MITTELS
"
REVERSE
PAINTING"
GIBBON
CHROMOSOMENSPEZIFISCHER
DNA
SONDEN
206
5.1.1.3
YYCHROMOSOME
BAR
CODING"
MIT
HAMSTER
CHROMOSOMENSPEZIFISCHEN
DNA
SONDEN
210
5.1.1.4
ZUSAMMENFASSUNG
UND
PERSPEKTIVEN
213
5.1.2
YYRECIPROCAL
CHROMOSOME
PAINTING"
ALS
STRATEGIE
DER
VERGLEICHENDEN
KARYOTYPANALYSE
222
5.1.3
PRIMATEN
CHROMOSOMENSPEZIFISCHE
DNA
SONDEN
ALS
MOLEKULAR
ZYTOGENETISCHES
WERKZEUG
226
5.2
ERGEBNISSE
DER
VERGLEICHENDEN
KARYOTYPANALYSE
BEI
PRIMATEN
230
5.2.1
CHROMOSOMENUNTERSUCHUNGEN
ALS
BEITRAG
ZUM
VERSTAENDNIS
DER
EVOLUTION
DES
GENOMS
230
5
2.2
INTERPRETATION
DER
ERGEBNISSE
DES
YYRECIPROCAL
CHROMOSOME
INHALTSVERZEICHNIS
VI
PAINTING
"
BEI
LEMUREN
UND
DEM
TUPAIA
231
5.2.3
HINWEISE
AUF
CHROMOSOMALE
REARRANGEMENTS
BEI
PRIMATEN
DURCH
YYCHROMOSOME
BAR
CODING
"
243
5.2.4
EVOLUTION
DES
MENSCHLICHEN
CHROMOSOMS
3
BEI
PRIMATEN
258
6
LITERATUR
268
7
ANHANG
293
8
KOOPERATION
MIT
ANDEREN
WISSENSCHAFTLERN
297
9
DANKSAGUNG
298
10
LEBENSLAUF
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