Untersuchungen zur restaurativen Potenz des Chinazolinderivates MECH an immunsupprimierten Mäusen:
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1. EINLEITUNG
1
2. MATERIAL UND METHODEN 13
2.1. VERSUCHSTIERE
13
2.2. SUBSTANZEN UND METHODEN ZUR BEEINFLUSSUNG DES MURINEN
13
IMMUNSYSTEMS
2.2.1. SUBSTANZEN 13
2.2.2. APPLIKATION DES CYCLOPHOSPHAMIDS 13
2.2.3. APPLIKATION VON MECH 13
2.3. ISOLIERUNG UND IN-VITRO-KULTUR MURINER MILZ- UND KNOCHEN- 15
MARKZELLEN "
2.3.1. MEDIEN UND REAGENZIEN 15
2.3.2. STIMULATOREN 15
2.3.3. ALLGEMEINE ZELLKULTURBEDINGUNGEN 15
2.3.4. ISOLIERUNG UND KULTIVIERUNG DER MILZZELLEN 15
2.3.5. ISOLIERUNG UND KULTIVIERUNG DER KNOCHENMARKZELLEN 16
2.4. STAMMZELLKULTUR-KOLONIEBILDUNGSTEST 17
2.4.1. MEDIEN UND REAGENZIEN 17
2.4.2. KOLONIESTIMULIERENDE FAKTOREN 17
2.4.3. KLONALER ASSAY ZUR BESTIMMUNG HAEMATOPOETISCHER ZELLEN 17
2.5. KNOCHENMARK-LANGZEITKULTUREN 18
2.5.1. MEDIEN UND REAGENZIEN 18
2.5.2. DIE KNOCHENMARK-LANGZEITKULTUR NACH DEXTER 19
2.6. DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNGEN DER KNOCHENMARK- 19
UND MILZZELLEN
2.6.1. PUFFER UND REAGENZIEN 19
2.6.2. IMMUNFLUORESZENZMARKIERUNG 20
2.7. BESTIMMUNG VON ZYTOKINEN IN KULTURUEBERSTAENDEN 22
2.7.1. MEDIEN UND REAGENZIEN 22
2.7.2. ZELLINIEN 22
2.7.3. ZYTOKIN-BIOASSAY 23
2.8.
BESTIMMUNG VON STICKOXIDEN IN KULTURUEBERSTAENDEN 24
2.8.1. REAGENZIEN 24
2.8.2. NACHWEIS VON NITRIT MITTELS GRIESS-REAGENS 24
2.9.
BESTIMMUNG VON PROSTAGLANDIN E2 IN KULTURUEBERSTAENDEN 25
2.9.1. REAGENZIEN UND PUFFER 25
2.9.2. KOMPETITIVER ELISA ZUM NACHWEIS VON PROSTAGLANDIN E
2 25
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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SEITE
2.10. CHEMOLUMINESZENZUNTERSUCHUNGEN 26
2.10.1. REAGENZIEN UND PUFFER 26
2.10.2. BESTIMMUNG VON REAKTIVEN SAUERSTOFFVERBINDUNGEN MITTELS 27
CHEMOLUMINESZENZ
2.11. STATISTISCHE AUSWERTUNG , 28
3. ERGEBNISSE 29
3.1. VORBEMERKUNGEN ZUM EXPERIMENTELLEN MODELL EINER CY- 29
IMMUNSUPPRIMIERTEN MAUS UND DEREN PHARMAKOLOGISCHEN
BEEINFLUSSUNG DURCH MECH
3.2. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ZAHL DER-KNOCHENMARK- UND 29
MILZZELLEN CY-BEHANDELTER TIERE
3.2.1. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ANZAHL DER KERNHALTIGEN ZELLEN IM 30
KNOCHENMARK
3.2.2. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ANZAHL DER KERNHALTIGEN ZELLEN IN DER 31
MILZ
3.2.3. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ANZAHL DER ERYTHROZYTEN IM 33
KNOCHENMARK
3.3. DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE ANALYSEN ZUR ZELLVERTEILUNG IM 36
KNOCHENMARK UND IN DER MILZ VON CY- SOWIE CY+MECH-
BEHANDELTEN TIEREN
3.3.1. CHARAKTERISIERUNG VON KNOCHENMARKZELLEN HINSICHTLICH DER GROESSE 36
UND EIGENFLUORESZENZ
3.3.2. PHAENOTYPISCHE CHARAKTERISIERUNG VON KNOCHENMARKZELLEN 41
3.3.3. PHAENOTYPISCHE CHARAKTERISIERUNG VON MILZZELLEN 52
3.4. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ANZAHL KOLONIEBILDENDER ZELLEN DES 61
KNOCHENMARKS UND DER MILZ CY-BEHANDELTER TIERE
3.4.1. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ANZAHL KOLONIEBILDENDER ZELLEN IM 61
KNOCHENMARK
3.4.2. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ANZAHL KOLONIEBILDENDER ZELLEN IN DER 70
MILZ
3.5. CHARAKTERISIERUNG DES KNOCHENMARKSTROMAS VON CY- SOWIE 77
CY+MECH-BEHANDELTEN TIEREN MITTELS LANGZEITKULTUREN
3.6. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE 86
ZYTOKINPRODUKTION MURINER KNOCHENMARK- UND MILZZELLEN CY-
BEHANDELTER TIERE
3.6.1. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE EL-3/GM-CSF- 86
FREISETZUNG VON KNOCHENMARKZELLEN
SEITE
3.6.2. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE IL-3/GM-CSF- 86
SEKRETION VON MILZZELLEN
3.6.3. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE IL-1 -SEKRETION VON 92
KNOCHENMARKZELLEN
3.6.4. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE IL-1 -SEKRETION VON 95
MILZZELLEN
3.6.5. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE IL-6-SEKRETION VON 100
KNOCHENMARKZELLEN
3.7. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE PGE
2
-SYNTHESE 104
MURINER KNOCHENMARKZELLEN
3.8. EINFLUSS VON MECH AUF DIE EFFEKTORFUNKTIONEN VON PHAGOZYTEN 108
AUS CY-BEHANDELTEN TIEREN
3.8.1. EINFLUSS VON MECH AUF DIE MITOGENINDUZIERTE STICKOXID-SYNTHESE 108
VON KNOCHENMARKZELLEN
3.8.2. EINFLUSS VON MECH AUF DIE BILDUNG REAKTIVER SAUERSTOFFMETABOLITE
111
DURCH KNOCHENMARK- UND MILZZELLEN CY-BEHANDELTER MAEUSE
3.8.2.1. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ROI-BILDUNG VON KNOCHENMARKZELLEN 112
NACH CY-VORBEHANDLUNG DER TIERE
3.8.2.2. EINFLUSS VON MECH AUF DIE ROI-BILDUNG VON MILZZELLEN NACH CY-
116
VORBEHANDLUNG DER TIERE
4. DISKUSSION
119
5. ZUSAMMENFASSUNG 149
6. LITERATURVERZEICHNIS 151 |
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