Ph-abhängige Regulation der Photosystem-II-Aktivität in der einzelligen Grünalge Scenedesmus obliquus:
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Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
Marburg
Görich und Weiershäuser
1998
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311 |
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PH-ABHAENGIGE REGULATION DER
PHOTOSYSTEM II-AKTIVITAET IN DER EINZELLIGEN GRUENALGE SCENEDESMUS
OBLIQUUS
VON
ILONA HEINZE
1998
VERLAG GOERICH & WEIERSHAEUSER GMBH, MARBURG
IMAGE 2
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG 1
1.1 LANGZEIT- UND KURZZEIT-ADAPTATION DES PHOTOSYNTHESEAPPARATES AN DIE
LICHTINTENSITAET 1
1.2 DAS PHOTOSYSTEM II 2
1.3 DER XANTHOPHYLLZYKLUS 6
1.4 DIE FLUORESZENZAUSBEUTE ALS MASS FUER PS IL-REGULATIONSPROZESSE 8
1.4.1 DIE FLUORESZENZAUSBEUTE ALS INDIKATOR FUER ZUSTAND UND EFFEKTIVITAET
DER PS IL-ZENTREN 8
1.4.2 NICHT-PHOTOCHEMISCHES QUENCHING 11
1.5 DAS ENERGY QUENCHING (QE) 14
1.5.1 ALLGEMEINE EIGENSCHAFTEN 14
1.5.2 MODELLE FUER DEN QE-MECHANISMUS: QUENCHING DURCH CA 2+ -FREISETZUNG
AUS DEM MANGANKOMPLEX 15
1.5.3 MODELLE FUER DEN QE-MECHANISMUS: QUENCHING IN DEN LHCII-KOMPLEXEN
16
2 ZIELSETZUNG 20
3 MATERIAL UND METHODEN 21
3.1 ALGEN 21
3.1.1 CHARAKTERISIERUNG 21
3.1.2 ANZUCHTBEDINGUNGEN 21
3.2 BESTIMMUNG DER BEZUGSGROESSEN 22
3.2.1 PCV 22
3.2.2 CHLOROPHYLLGEHALT 23
3.2.3 PROTEINGEHALT 24
3.3 LANGZEITADAPTATION AN UNTERSCHIEDLICHE LICHTINTENSITAETEN 24 3.3.1
VORBESTRAHLUNG IN DER THRESHOLD-BOX 24
3.3.2 VORBELICHTUNG MIT DEM DIAPROJEKTOR 26
3.4 THYLAKOIDPRAEPARATION 26
3.5 SPEKTROSKOPISCHE METHODEN 27
3.5.1 MESSUNG DER CHL A-FLUORESZENZAUSBEUTE MIT DEM PAM-FLUOROMETER 27
3.5.1.1 ALLGEMEINE BESCHREIBUNG 27
3.5.1.2 DURCHFUEHRUNG DER FLUORESZENZMESSUNG 29
3.5.2 MESSUNG VON LICHTSTREUAENDERUNGEN 30
3.5.3 DCMU-FLUORESZENZINDUKTIONSKURVEN 31
3.5.4 ABSORPTIONS- UND FLUORESZENZSPEKTROSKOPIE 32
3.6 PIGMENTANALYSE DURCH HPLC 33
IMAGE 3
3.7 PROTEINCHEMISCHE UNTERSUCHUNGEN
3.7.1 MILD-DENATURIERENDE GELELEKTROPHORESE ( GRUENE GELE ) 3.7.2
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE (SDS-PAGE) 3.7.3 WESTERN BLOT
3.8 FEHLERSUMME
4 ERGEBNISSE UND DISKUSSION
36 36 37 38
39
40
4.1 CHARAKTERISIERUNG DER LHCII-KOMPLEXE DES WILDTYPS, DER CHL 6-FREIEN
MUTANTE WTD3-LHC, UND DER A-CAROTINOID-FREIEN MUTANTE C-2A -34 40 4.1.1
CHARAKTERISIERUNG DES MILD-DENATURIERENDEN GELSYSTEMS ( GRUENES GEL ) AM
BEISPIEL DES WILDTYPS 41
4.1.2 MILD-DENATURIERENDE GELELEKTROPHORESE MIT DEN MUTANTEN WTD3-LHC1
UND C-2A -34 44
4.1.3 CHARAKTERISIERUNG DER MINOR -LHCII-KOMPLEXE DER MUTANTE C-2A -34
48
4.2 DISKUSSION ZU KAPITEL 4.1 51
4.2.1 VERGLEICH DER MUTANTE C-2A -34 MIT DEM WILDTYP 51
4.2.2 MUTANTE WTD3-LHC1 56
4.3 ZUSAMMENHANG ZWISCHEN ENERGY QUENCHING (QE) UND ZEAXANTHINGEHALT IM
WILDTYP 57
4.3.1 DER QE M AX-PARAMETER 57
4.3.2 15STUENDIGE VORBELICHTUNG 60
4.3.3 ZEITVERLAEUFE NACH VERAENDERUNG DER LICHTINTENSITAET 63
4.4 ZUSAMMENHANG ZWISCHEN ENERGY QUENCHING UND ZEAXANTHINGEHALT IN DEN
MUTANTEN C-2A -34 UND WTD3-LHC1 70
4.4.1 EINSCHUB: ABHAENGIGKEIT DES PARAMETERS F V /F M BEIM WILDTYP UND
DEN MUTANTEN VON DER DETEKTIONSWELLENLAENGE 70
4.4.2 MUTANTE C-2A -34: ENERGY QUENCHING UND ZEAXANTHINGEHALT 73 4.4.3
MUTANTE WTD3-LHC1: ENERGY QUENCHING UND ZEAXANTHINGEHALT 76
4.5 VERGLEICH ZWISCHEN ABSORPTIONS- UND FLUORESZENZ-ANREGUNGSSPEKTREN
VON ZELLEN MIT HOHEM BZW. NIEDRIGEM ZEAXANTHIN-GEHALT 88
4.6 DISKUSSION ZU DEN KAPITELN 4.3-4.5 94
4.6.1 VORTEILE DES QE MAX -PARAMETERS UND DES VERSUCHSOBJEKTS S.
OBLIQUUS FUER DIE UNTERSUCHUNG DES ENERGY QUENCHINGS 95
4.6.2 AUFGABE UND MECHANISMEN DER ZEAXANTHIN-BILDUNG 95 4.6.3
NICHT-DEEPOXIDIERBARES ANTHERAXANTHIN UND VIOLAXANTHIN 97 4.6.4 MUTANTE
C-2A -34: ENERGY QUENCHING OHNE MAJOR LHCII 98 4.6.5 BESETZT
ZEAXANTHIN DIE SPEZIFISCHEN XANTHOPHYLL-BINDUNGSSTELLEN IN DEN
MINOR LHCII? 99
4.6.6 MUTANTE WTD3-LHC1: ENERGY QUENCHING OHNE MAJOR UND MINOR
LHCI1102 4.6.7 ENERGETISCHE KOPPLUNG DER XANTHOPHYLLZYKLUS-PIGMENTE AN
DIE PS II- CHLOROPHYLLE 105
4.7 ZUSAMMENHANG ZWISCHEN PH-ABHAENGIGEN LICHTSTREU-AENDERUNGEN UND QE 106
II
4.8 DISKUSSION ZU KAPITEL 4.7 111
4.9 DCMU-FLUORESZENZINDUKTIONSKURVEN 114
4.9.1 SIMULATION DER DCMU-INDUKTIONSKURVEN BEIM WILDTYP 114 4.9.2
VERGLEICH DES WILDTYPS MIT DEN MUTANTEN 118
4.9.3 PH-ABHAENGIGKEIT DER DCMU-INDUKTIONSKURVEN 121
4.9.3.1 PH-ABHAENGIGKEIT VON FM, FO UND DER HALBWERTSZEIT UN 121 4.9.3.2
SIMULATION DER DCMU-INDUKTIONSKURVEN BEI UNTERSCHIEDLICHEM PH-WERT 126
4.10 DISKUSSION ZU KAPITEL 4.9 136
4.10.1 ET- UND SS-PHASE DER DCMU-INDUKTIONSKURVEN 137
4.10.2 PH-ABHAENGIGKEIT DER DCMU-INDUKTIONSKURVEN 139
4.10.3 EXCITONEN-EQUILIBRIERUNG 140
4.11 PH-ABHAENGIGKEIT DER FLUORESZENZPARAMETER FM UND FO: PK-WERTE UND
KOOPERATIVITAET 142
4.12 DISKUSSION ZU KAPITEL 4.11 152
4.12.1 ZWEIPHASIGE PH-ABHAENGIGKEIT 153
4.12.2 FLUORESZENZQUENCHING MIT PK 4,1-4,5 153
4.12.3 ENERGY QUENCHING 155
4.13 DONORSEITEN-INHIBITION BEI PH 5,5 156
4.14 DISKUSSION ZU KAPITEL 4.13 161
4.15 PH-ABHAENGIGE ABSORPTIONSAENDERUNGEN 162
4.16 DISKUSSION ZU KAPITEL 4.15 167
4.17 ABSCHLUSSDISKUSSION: PH-ABHAENGIGE REGULATION DER PS IL-AKTIVITAET 169
4.17.1 MECHANISMUS DES ENERGY QUENCHINGS 169
4.17.1.1 PK-WERT 169
4.17.1.2 LOKALISATION UND KOOPERATIVITAET 170
4.17.1.3 ROLLE DES ZEAXANTHINS 172
4.17.1.4 HYPOTHESE 173
4.17.2 MECHANISMEN DER PS I L-LNAKTIVIERUNG 176
4.17.3 PHYSIOLOGISCHE ROLLE DER PH-ABHAENGIGEN REGULATION DER PS
IL-AKTIVITAET 177
5 ZUSAMMENFASSUNG
6 LITERATURVERZEICHNIS
179
183
III
|
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