Eine neue Screening-Strategie für hydrophile Naturstoffe sowie der Einsatz des Transkriptionsassays Myc-Max in der automatisierten Wirkstoffsuche:
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Format: | Buch |
Sprache: | German |
Veröffentlicht: |
1997
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Beschreibung: | Jena, Univ., Diss., 1997 |
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INHALTSVERZEICHNIS
THEORETISCHER TEIL
I EINLEITUNG
1
II AUFGABENSTELLUNG
7
III METHODISCHE WEITERENTWICKLUNG DES CHEMISCHEN SCREENINGS
10
1 EINE NEUE SCREENINGSTRATEGIE FUER DIE TRENNUNG UND DETEKTION
HYDROPHILER NATURSTOFFE 10
1.1 DAS STANDARDISIERTE CHEMISCHE SCREENING 10
1.2 METHODISCHE ARBEITEN ZUR ENTWICKLUNG EINES HYDROPHILEN CHEMISCHEN
SCREENINGS ~ 11
1.2.1 STATIONAERE UND MOBILE TRENNPHASEN 11
1.2.2 SPRUEHREAGENZIEN 13
1.3 UEBERTRAGUNG AUF MIKROBIELLE KULTURLOESUNGEN 14
1.3.1 PROBENVORBEREITUNG 15
1.3.1.1 ADSORPTION 15
1.3.1.2 IONENAUSTAUSCHER 15
1.4 FAZIT 16
1.5 STATISTISCHE ANALYSE DER UNTERSUCHTEN MIKROBIELLEN KULTURLOESUNGEN 17
1.5.1 HYDROPHILES SCREENING BEI STREPTOMYCETEN 18
1.5.2 HYDROPHILES SCREENING BEI SELTENEN ACTINOMYCETEN 19
2 NATURSTOFFE AUS DEM HYDROPHILEN CHEMISCHEN SCREENING 21
2.1 CHEMISCHES SCREENING MIT STREPTOMYCETEN 21
2.1.1 SOJASAPONIN I QL) UND II(12) AUS
STREPTOMYCES SP. GT 41263 21
2.1.1.1 FERMENTATION UND ISOLIERUNG 21
2.1.1.2 CHARAKTERISIERUNG UND STRUKTURAUFKLAERUNG 22
2.1.2 RIBOFURANOSYL-(3- 1 )-A-RIBOFURANOSYL-(2- 1 )-A-RIBOFURANOSE
(14)
EIN NEUES TRISACCHARID AUS
STREPTOMYCES SP. GT 51006 23
2.1.2.1 FERMENTATION UND ISOLIERUNG 23
2.1.2.2 CHARAKTERISIERUNG UND STRUKTURAUFKLAERUNG 23
2.1.3 0-A-GLUCOSYL-(L,2)-GLYCERINSAEURE (16) AUS STREPTOMYCES SP. GT
51186 29
2.1.3.1 FERMENTATION UNS ISOLIERUNG 29
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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2.1.3.2 CHARAKTERISIERUNG UND STRUKTURAUFKLAERUNG 29
2.1.4 EIN NEUES OLIGOSACCHARID (22) AUS
STREPTOMYCES SP. GT 51086 31
2.1.4.1 FERMENTATION UND ISOLIERUNG 31
2.1.4.1 CHARAKTERISIERUNG UND STRUKTURAUFKLAERUNG 32
2.2 CHEMISCHES SCREENING MIT SELTENEN ACTINOMYETEN 44
2.2.1 A-GALACTOSYL-( 1 - 6)-A-GALACTOSYL-( 1 - 6)-A-GLUCOSYL-( 1 -1
)-SS-FRUCTO-
FURANOSE
(28) AUS OERSKOVIA XANTHINEOLYTIKA GT 42004 45
2.2.1.1 TAXONOMISCHE CHARAKTERISIERUNG 45
2.2.1.2 FERMENTATION UND ISOLIERUNG 45
2.2.1.3 CHARAKTERISIERUNG UND STRUKTURAUFKLAERUNG 46
2.2.2 EIN NEUES NONASACCHARID
(36) AUS OERSKOVIA TURBATA GT 52003 49
2.2.2.1 TAXONOMISCHE CHARAKTERISIERUNG 49
2.22.2
FERMENTATION UND ISOLIERUNG R 50
2.2.2.3 CHARAKTERISIERUNG UND STRUKTURAUFKLAERUNG 52
2.2.3 TREHALOSE
(37) EIN SPEICHERSTOFF AUS OERSKOVIA TURBATA GT 52003 67
2.2.3.1 ISOLIERUNG UND CHARAKTERISIERUNG 67
2.2.3.2 STRUKTURBEWEIS 67
2.2.4 EIN WEITERES OLIGOSACCHARID
(A52002) AUS OERSKOVIA TURBATA GT 52002 67
2.2.4.1 FERMENTATION UND ISOLIERUNG 68
2.2.4.2 CHARAKTERISIERUNG UND GC-ANALYSE 68
2.3 DISKUSSION UND AUSBLICK 70
2.3.1 DIE ROLLE VON OLIGOSACCHARIDSTRUKTUREN IN DER NATUR 70
2.3.1 BEURTEILUNG DES ENTWICKELTEN CHROMATOGRAPHIESYSTEMS FUER EIN
SCREENING IM HYDROPHILEN POLARITAETSBEREICH 72
IV EINSATZ DES TRANSKRIPTIONSASSYS MYC-MAX IN SACCHAROMYCES CEREVISIAE
ZUR AUTOMATISIERTEN WIRKSTOFFSUCHE BEI ACTINOMYCETEN 74
1 ALLGEMEINES 74
1.1 TRANSKRIPTIONSFAKTOREN MYC UND MAX 74
1.2 DAS ZWEIHYBRID-SYSTEM AM BEISPIEL DER MYC-MAX-INTERAKTION 75
2 WEITERENTWICKLUNG DES TESTSYSTEMS ZU EINEM AUTOMATISIERTEN ROUTINE*
SCREENING IM MIKROPLATTENFORMAT 77
2.1 VORARBEITEN 77
2.2 LOESUNGSMITTELTOLERANZ 78
3 TESTUNG MIT DEM LABOR-ROBOTER 79
3.1 AUTOMATISIERTES SCREENING MIT DEM MYC-MAX-ASSAY 81
4 TESTUNG VON NATURSTOFFEN 82
4.1 REINSUBSTANZEN 82
4.2 MIKROBIELLE KULTURLOESUNGEN 84
5 DISKUSSION UND AUSBLICK 85
V ZUSAMMENFASSUNG
87
1 METHODISCHE WEITERENTWICKLUNG DES CHEMISCHEN SCREENINGS 87
2 TRANSKRIPTIONSASSAY MYC-MAX 90
ANHANG A
EXPERIMENTELLER TEIL
I ALLGEMEINES A-L
1 DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHISCHE ANALYSERMIKROBIELLER KULTURLOESUNGEN A-4
1.1 PROBEN VORBEREITUNG A-4
1.2. CHEMISCHES SCREENING A-4
2 ERWEITERUNG DES CHEMISCHEN SCREENINGS AUF DEN STARK HYDROPHILEN
BEREICH A-4
II BESCHREIBUNG DER VERSUCHE
A-5
1 SUBSTANZEN AUS DEM CHEMISCHEN SCREENING MIT STREPTOMYCETEN A-5
1.1 STAMM GT 41264 (
STREPTOMYCES SP.) A-5
1.2 STAMM GT 51006 (
STREPTOMYCES SP.) A-6
1.3 STAMM GT 51186 (
STREPTOMYCES SP.) A-8
1.4 STAMM GT 51086 (
STREPTOMYCES SP.) A-9
2 SUBSTANZEN AUS DEM CHEMISCHEN SCREENING VON SELTENEN ACTINOMYCETEN
A-LL
2.1 STAMM GT 42004 (
OERSKOVIA XANTHINEOLYTIKA) A-11
2.2 STAMM GT 52003 (
OERSKOVIA TURBATA) A-L4
2.3 STAMM GT 52002 (
OERSKOVIA TURBATA) A-L7
3 DER ZWEIHYBRID-TRANSKRIPTIONSASSAYS MYC-MAX A-18
3.1 VERWENDETE CHEMIKALIEN UND HILFSMITTEL A-18
3.2 VERSUCHSABLAUF A-20
ANHANG B
LITERATURVERZEICHNIS
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