Physiologische Untersuchungen zur Interaktion von endophytischen Pilzen und Wirtspflanzen:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
Sprache: | German |
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
I
.
EINLEITUNG
.
1
1.
ENDOPHYTISCHE
PILZE
.
1
2.
PILZ-PFLANZE
INTERAKTIONEN
.
3
3.
ZIELE
DER
ARBEIT
.
5
II.
MATERIAL
UND
METHODEN
.
7
1.
VERSUCHSOBJEKTE
.
7
1.1
PILZSTAEMME
.
7
1.1.1
STAMMHALTUNG
.
7
1.2
WIRTSPFLANZEN
.
7
1.2.1
ANZUCHT
STERILER
PFLANZEN
.
7
1.2.2
INDUKTION
VON
KALLUSKULTUREN
.
8
1.2.3
OPTIMIERUNG
DES
KALLUSWACHSTUMS
.
9
1.2.4
INDUKTION
VON
SUSPENSIONSKULTUREN
.
10
1.2.5
OPTIMIERUNG
DES
WACHSTUMS
VON
SUSPENSIONSKULTUREN
.
10
2.
MEDIEN
.
11
2.1
PILZKULTURMEDIEN
.
11
2.2
SCRCENINGMEDIEN
.
12
2.3
PFLANZENZELLKULTURMEDIEN
.
12
3.
CHARAKTERISIERUNG
DER
ZELLKULTUREN
.
14
3.1
WACHSTUMSKURVEN
.
14
3.1.1
FRISCHGEWICHTSBESTIMMUNG
.
14
3.1.2
TROCKENGEWICHTSBESTIMMUNG
.
14
3.2
VITALFARBUNG
.
14
4.
BIOLOGISCHE
AKTIVITAET
VON
KULTUREXTRAKTEN
.
15
4.1
HERSTELLUNG
VON
PILZKULTUREXTRAKTEN
.
15
4.1.1
ANZUCHT
DER
PILZE
.
15
4.1.2
EXTRAKTION
VON
PILZKULTUREN
.
15
4.2
EXTRAKTION
VON
KALLUSKULTUREN
.
15
4.3
AGARDIFFUSIONSTEST
MIT
PILZKULTUREXTRAKTEN
.
16
4.4
DUENNSCHICHTCHROMATOGRAPHIE
.
17
4.4.1
BIOAUTOGRAMME
.
17
4.4.1.1
CHLORELLA
FUSCA
.
17
4.4.1.2
CLADOSPORIUM
CUCUMERINUM
.
18
4.4.2
SPRTIHREAGENZIEN
.
18
4.5
KEIMLINGSTESTS
.
19
4.5.1
LEPIDIUM
SATIVUM
.
19
4.5.2
LAMIUM
PURPUREUM
.
19
4.6
WACHSTUMSTEST
MIT
KALLUSKULTUREN
.
19
4.7
WACHSTUMSTEST
MIT
ZELLSUSPENSIONSKULTUREN
.
20
5.
NATURSTOFFE
.
20
5.1
PALMARUMYCIN
1
21
5.2
PALMARUMYCIN
4
21
INHALT
6.
PRAEPARATIVE
SCHICHTCHROMATOGRAPHIE
.
22
6.1
SUBSTANZAUFTRAG
UND
ENTWICLDUNG
.
22
6.2
LOKALISATION
DER
SUBSTANZBAENDER
.
22
6.3
ELUTION
.
22
6.4
UEBERPRUEFUNG
.
23
7.
EXOENZYMUNTERSUCHUNGEN
BEI
ENDOPHYTEN
.
23
7.1
PROTEASEN
.
23
7.2
LIPASEN
.
24
7.3
AMYLASEN
.
25
7.4
CELLULASEN
.
26
7.5
XYLANASCN
.
26
7.6
PEKTINASEN
.
27
7.6.1
POLYGALACTURONASE
.
27
7.6.2
PEKTINESTERASE
.
28
7.6.3
PEKTINLYASE
.
28
7.7
PHENOLOXIDASEN
.
29
8.
INFEKTIONSTEST
.
29
9.
WACHSTUMSMESSUNGEN
IN
DUALKULTUREN
MIT
PFLANZENKALLUS
.
30
9.1
VERSUCHSANSATZ
.
30
9.2
PILZWACHSTUM
.
31
9.3
KALLUSWACHSTUM
.
32
9.4
DIFFUSIONSTESTS
.
32
9.4.1
DUALKULTUR
MIT
DIFFUSIONSBARRIERE
.
32
9.4.2
DUALKULTUR
MIT
DIFFUSIONSFILTER
.
32
10.
TESTSYSTEME
FUER
DIE
UNTERSUCHUNG
DER
PFLANZLICHEN
ABWEHRREAKTION
.
32
10.1
DUALKULTUREN
MIT
L.
PURPUREUM-GANZEN
.
32
10.2
DUALKULTUREN
MIT
KALLUS
.
33
10.3
KINETIKEN
MIT
KALLUS-DUALKULTUREN
.
34
10.4
SUSPENSIONSKULTUREN
.
34
10.4.1
MESSUNGEN
MIT
PILZ-ELICITOREN
.
34
10.4.2
MESSUNGEN
MIT
SEKUNDAERMETABOLITEN
.
35
11.
ELICITORPRAEPARATION
.
35
12.
MESSUNG
DER
SPEZIFISCHEN
PAL-ENZYMAKTIVITAET
.
36
12.1
GEWINNUNG
DES
ENZYMROHEXTRAKTES
AUS
PFLANZEN
.
36
12.2
GEWINNUNG
DES
ENZYMROHEXTRAKTES
AUS
ZELLKULTUREN
.
36
12.3
TESTANSATZ
.
37
13.
PROTEINBESTIMMUNG
.
38
14.
BESTIMMUNG
DER
GESAMTKONZENTRATION
LOESLICHER
PHENOLE
.
39
14.1
PHENOLKONZENTRATION
IN
ROHEXTRAKTEN
.
39
14.2
KONZENTRATION
AUSGESCHIEDENER
PHENOLE
.
39
15.
MESSUNG
DER
WASSERSTOFFPEROXIDKONZENTRAUEON
.
39
15.1
PHENOLROT-METHODE
.
39
15.2
QUANTIFIZIERUNG
DES
GEBILDETEN
H2Q2
.
40
INHALT
16.
MIKROSKOPIE
.
41
17.
FOTOGRAFIE
.
41
III.
ERGEBNISSE
.
42
1.
CHARAKTERISIERUNG
DER
PILZE
.
42
1.1
MYCEL-UND
KOLONIEMORPHOLOGIE
.
42
1.2
BIOLOGISCHE
AKTIVITAET
.
43
1.3
SEKUNDAERMETABOLITC
.
44
1.3.1
C.PALMARUM
.
44
1.3.2
GENICULOSPORIUM
SP
.
45
1.3.3
PHOMOPSIS
SP.
.
46
1.4
EXOENZYMMUSTER
ENDOPHYTISCHER
PILZE
.
47
1.5
PATHOGENES
POTENTIAL
.
49
2.
CHARAKTERISIERUNG
DER
WIRTSPFLANZEN
.
50
2.1
DIE
FAMILIE
LAMIACEAE
.
50
2.2
KALLUSKULTUREN
.
50
2.2.1
L.
PURPUREUM
.
51
2.2.2
T.
SCORODONIA
.
51
2.3
SUSPENSIONSKULTUREN
.
53
2.3.1
L.
PURPUREUM
.
53
2.3.2
T.
SCORODONIA
.
54
2.4
SEKUNDAERMETABOLITE
.
55
3.
WACHSTUMSMESSUNGEN
IN
DUALKULTUREN
MIT
PFLANZENKALLUS
.
56
3.1
PILZWACHSTUM
.
56
3.1.1
C.PALMARUM
.
56
3.1.2
GENICULOSPORIUM
SP
.
58
3.1.3
PHOMOPSIS
SP.
.
60
3.2
KALLUSWACHSTUM
.
62
3.3
DIFFUSIONSTESTS
.
63
3.3.1
DUALKULTUREN
MIT
DIFFUSIONSBARRIERE
.
63
3.3.2
DUALKULTUREN
MIT
DIFFUSIONSFILTER
.
64
4.
WIRKUNG
ENDOPHYTISCHER
SEKUNDAERMETABOLITE
AUF
WIRTSPFLANZEN
.
65
4.1
KEIMLINGE
.
66
4.2
KALLUS
.
67
4.3
TEST
DER
GENICULOSPORIUM-PRAKTIONEN
MIT
SUSPENSIONSKULTUREN
.
69
4.3.1
T.
SCORODONIA
.
69
4.3.2
L.
PURPUREUM
.
71
4.4
WACHSTUMSTEST
MIT
PALMARUMYCINEN
.
72
5.
INDUKTION
DES
PHENYLPROPANSTOFFWECHSELS
.
72
5.1
PAL-ENZYMAKTIVITAET
IN
DUALKULTUREN
MIT
L.
PURPUREUM-PFLANZEN
.
73
5.2
PAL-ENZYMAKTIVITAET
IN
DUALKULTUREN
MIT
KALLUS
.
74
5.2.1
DUALKULTUREN
MIT
L.
PURPUREUM-KALLUS
.
74
5.2.2
DUALKULTUREN
MIT
T.
SCORODONIA
-KALLUS
.
77
5.3
KINETIK
DER
PAL-INDUKTION
IN
L.
PURPUREUM-KALLUS
DURCH
C.
PALMARUM
UND
A.
ALTEMATA
.
80
5.4
INDUKTION
DER
PAL-AKTIVITAET
IN
SUSPENSIONSKULTUREN
.
83
INHALT
5.4.1
ELICITOREN
.
83
5.4.2
GENICULOSPORIUM-FRAKTIONEN
.
84
5.4.3
PALMARUMYCINE
.
85
5.5
KONZENTRATION
LOESLICHER
PHENOLE
.
86
5.5.1
DUALKULTUR
MIT
C.
PABNARUM
.
86
5.5.2
DUALKULTUR
MIT
A.
ALTERNATA
.
87
5.5.3
SUSPENSIONSKULTUREN
.
88
6.
FREISETZUNG
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
.
89
6.1
INDUKTION
DURCH
MYCEL
.
89
6.2
INDUKTION
DURCH
ELICITOREN
.
90
IV.
DISKUSSION
.
92
1.
ENDOPHYTISCHE
PILZE
.
92
1.1
BIOLOGISCHE
AKTIVITAET
.
92
1.2
EXOENZYME
.
93
1.3
PATHOGENES
POTENTIAL
.
94
2.
FUNKTION
ENDOPHYTISCHER
SEKUNDAERMETABOLITE
FUER
DIE
ENDOPHYTEN
-WIRT
INTERAKTION
.
95
3.
WACHSTUM
IN
DUALKULTUREN
.
97
3.1
CHEMOTAKTISCHE
REAKTION
DER
ENDOPHYTEN
.
97
3.2
SENSITIVE
REAKTION
DES
KALLUS
.
98
4.
PFLANZLICHE
ABWEHRREAKTIONEN
.
99
4.1
PHENYLALANIN-AMMONIUM-LYASE(PAL)
.
100
4.2
AKKUMULATION
LOESLICHER
PHENOLE
.
102
4.3
FREISETZUNG
REAKTIVER
SAUERSTOFFSPEZIES
.
104
4.3.1
FUNKTION
UND
BEDEUTUNG
DES
OXIDATIVE
BURST
.
105
4.3.2
INDUKTION
DER
^OJ-PRODUKTION
IN
SUSPENSIONSKULTUREN
.
107
5.
VERGLEICH
DER
DURCH
ENDOPHYT
UND
PATHOGEN
INDUZIERTEN
ABWEHR
REAKTIONEN
.
107
6.
PFLANZLICHE
ABWEHRREAKTIONEN
IN
MUTUALISTISCHEN
UND
ANTAGONISTISCHEN
BEZIEHUNGEN
.
109
7.
DIE
ENDOPHYT-WIRT
INTERAKTION
.
112
V.
ZUSAMMENFASSUNG
.
115
VI.
LITERATURVERZEICHNIS
.
117
VII.
ANHANG
.
135 |
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