Untersuchungen zu programmiertem Zelltod als Mechanismus der Immunregulation im intestinalen Immunsystem:
Gespeichert in:
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1997
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I
INHALTSVERZEICHNIS
1 EINLEITUNG
1.1 APOPTOSE ODER PROGRAMMIERTER ZELLTOD - 1
SCHLUESSELMECHANISMUS ZUR ERHALTUNG VON
ZELLULAERER HOMOEOSTASE IM ORGANISMUS
1.1.1 MORPHOLOGISCHE ASPEKTE VON ZELLTOD - 1
GEGENUEBERSTELLUNG VON NEKROSE UND APOPTOSE
1.1.2 DIE FUNKTIONELLE BEDEUTUNG VON APOPTOSE 3
1.1.3 REGULATION VON APOPTOSE 5
1.1.3.1 INTRAZELLULAERE MECHANISMEN VON APOPTOSE - 5
DIE GEMEINSAME ENDSTRECKE
1.1.3.2 FAS/APO-1 (CD95) UND SEIN LIGAND 7
1.1.3.3 BCL-2, EIN PROTOONKOGEN ALS APOPTOSEINHIBITOR 9
1.2 APOPTOSE IM IMMUNSYSTEM
10
1.2.1 T-ZELL REIFUNG IM THYMUS - PROGRAMMIERTER ZELLTOD 11
ALS SELEKTIONSMECHANISMUS FUER ZENTRALE TOLERANZ
1.2.2 REGULATION VON IMMUNANTWORT UND IMMUNGEDAECHTNIS - 13
PROGRAMMIERTER ZELLTOD ALS STEUERUNGSMECHANISMUS
1.2.3 AKTIVIERUNGSINDUZIERTER ZELLTOD IN REIFEN T-LYMPHOZYTEN - 14
MECHANISMUS ZUR INDUKTION PERIPHERER TOLERANZ?
1.3 DAS LOKALE IMMUNSYSTEM DES DARMES IS
1.3.1 STRUKTUR UND FUNKTION DES GALT 15
1.3.2 IEL - SCHLUESSEL ZUR INTESTINALEN IMMUNHOMOEOSTASE ? 17
1.4 PROBLEMSTELLUNG
19
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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II
2 MATERIAL UND METHODEN
2.1 PATIENTENGUT
2.2 ISOLATION VON MONONUKLEAEREN ZELLEN AUS INTESTINALEM EPITHEL,
INTESTINALER LAMINA PROPRIA UND PERIPHEREM BLUT
2.2.1 EINGESETZTE MATERIALIEN
2.2.2 PROTOKOLL DER ISOLATION
2.2.3 PHAENOTYP DER ISOLIERTEN LYMPHOZYTEN
2.3 ZELLKULTUR
2.4 MOLEKULARBIOLOGISCHER NACHWEIS VON DNA-FRAGMENTATION
MITTELS GEL-ELEKTROPHORESE
2.5 NACHWEIS VON DNA-STRANGBRUECHEN MIT HILFE
DER TUNEL-REAKTION
2.6 DURCHFLUSSZYTOMETRIE
34
2.6.1 TECHNISCHER HINTERGRUND
2.6.2 DURCHFLUSSZYTOMETRISCHE UNTERSUCHUNG ISOLIERTER ZELLEN
2.6.2.1 MARKIERUNG VON OBERFLAECHENREZEPTOREN
2.6.2 2 MARKIERUNG VON INTRAZELLULAEREN MARKERN
2.7 STATISTISCHE METHODEN
42
3 ERGEBNISSE
PROGRAMMIERTER ZELLTOD IN INTESTINALEN LYMPHOZYTEN
IM VERGLEICH ZU LYMPHOZYTEN DES PERIPHEREN BLUTS
QUALITATIVER NACHWEIS VON APOPTOSE MIT HILFE
VON DNA-ELEKTROPHORESE
QUANTITATIVE ANALYSE VON DNA-STRANGBRUECHEN MIT HILFE
DER TUNEL-REAKTION
DER PHAENOTYP VON INTESTINALEN LYMPHOZYTEN UND
BLUTLYMPHOZYTEN IN BEZUG AUF APOPTOSERELEVANTE MARKER
EXPRESSION VON FAS/APO-1
EXPRESSION VON FAS-LIGAND
EXPRESSION VON BCL-2
KORRELATION ZWISCHEN FAS-L EXPRESSION
UND TUNEP LYMPHOZYTEN
IV
4 DISKUSSION
4.1 PROGRAMMIERTER ZELLTOD - 65
DIE DRITTE SAEULE DER ZELLKOMMUNIKATION
4.1.1 SPONTANE APOPTOSE - EINE NEUE
IN VITRO EIGENSCHAFT 66
VON INTRAEPITHELIALEN LYMPHOZYTEN
4.1.2 AKTIVIERUNGSINDUZIERTER ZELLTOD - SELEKTIONSMECHANISMUS 66
FUER PERIPHERE TOLERANZBILDUNG IN IEL ?
4.2 FAS/FAS-LINTERAKTION -EIN VIELSEITIGER 68
STEUERUNGSMECHANISMUS DER INTESTINALEN IMMUNHOMOEOSTASE
4.2.1 EXPRESSION VON FAS/APO-1 ALS AUSDRUCK EINER STAENDIGEN 68
AKTIVIERUNG VON INTESTINALEN LYMPHOZYTEN
4.2.2 DIE NEOEXPRESSION VON FAS-L ALS FUNKTIONELLER STEUERUNGSFAKTOR 69
4.2.3 EINFLUSS DER EXPRESSION VON BCL-2
IN VITRO AUF FAS/FAS-L - 71
VERMITTELTE APOPTOSE
4.2.4 ZYTOTOXIZITAET UND IMMUNTOLERANZ - IEL IN FUNKTIONELLER 71
SCHLUESSELPOSITION IM GALT
4.3 ZUSAMMENFASSUNG 75
V
5 ANHANG
5.1 STATISTISCHE TABELLEN 77
5.2 LITERATURVERZEICHNIS 83
5.3 ABBILDUNGS- UND TABELLENVERZEICHNIS 93
5.3.1 ABBILDUNGEN 93
5.3.2 TABELLEN 94
5.4 DANKSAGUNG 94 |
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