Untersuchungen zur Adhäsion von Nierenkarzinomzellen an Endothelzellen:
Gespeichert in:
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Veröffentlicht: |
1996
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Beschreibung: | Magdeburg, Univ., Habil.-Schr., 1996 |
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INHALTSVERZEICHNIS
1. EINLEITUNG.1
1.1 NIERENZELLKARZINOM: INZIDENZ, AETIOLOGIE, PATHOLOGIE, KLINIK UND
THERAPIE.1
1.2. METASTASIERUNG DES NIERENZELLKARZINOMS.3
1.3. MECHANISMEN DER TUMORZELLMETASTASIERUNG.6
1.4. ADHAESION VON TUMORZELLEN AN ENDOTHELZELLEN.9
2. ZIELE DER ARBEIT.16
3. MATERIAL UND METHODIK.18
3.1. NIERENZELLKARZINOMLINIEN.18
3.1.1. CCF-RC1 UND CCF-RC2.18
3.1.2. CHARAKTERISIERUNG DER NIERENZELLKARZINOMLINIE CCF-RC7.19
3.1
.
2
.
1. ANAMNESE UND VERLAUF.19
3.1.2.2. HISTOPATHOLOGIE.20
3.1.2.3. ANLAGE DER PRIMAERKULTUR.20
3.1.2.4. WACHSTUMSVERHALTEN VON CCF-RC7 IN VITRO.20
3.1.2.5. WACHSTUM VON CCF-RC7 IN SOFTAGAR.21
3.1.2.6. WACHSTUM VON CCF-RC7 IN VIVO.21
3.1.2.7. ELEKTRONENMIKROSKOPIE VON CCF-RC7.22
3.1.2.8. DNS-ZYTOMETRISCHE ANALYSE VON CCF-RC7.22
3.1.2.9. KARYOTYPANALYSE VON CCF-RC7.22
3.1.2.10. IMMUNHISTOCHEMISCHE ANALYSE VON CCF-RC7.23
3.1.3. NIERENZELLKARZINOMKULTUR.24
3.2. ENDOTHELZELLEN.24
3.2.1. HUMANE VENOESE NABELSCHNURENDOTHELZELLEN (HUVEC).24
3.2.1.1. ISOLATION DER HUVEC.24
3.2.1.2. ZELLKULTUR DER HUVEC.25
3.2.2. HUMANE MIKROVASKULAERE PRAEPUTIALE ENDOTHELZELLEN (HMPE).26
3.2.2.1 ISOLATION DER HMPE.26
3.2.2.2. ISOLATION VON HMPE BEI VORLIEGEN EINER
FIBROBLASTENKONTAMINATION IN DER PRIMAERKULTUR.27
3.2.2.2.1. ENDOTHELZELLISOLATION MIT KLONIERUNGSRINGEN.27
3.2.2.2.2. ENDOTHELZELLISOLATION MIT ULEX EUROPAEUS-I-
BESCHICHTETEN DYNABEADS.28
3.2.2.3. ZELLKULTUR DER HMPE.28
3.2.3. HUMANE MIKROVASKULAERE LUNGENENDOTHELZELLEN (HMLE).29
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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3.2.3.1. ISOLATION DER HMLE.29
3.2.3.2. ISOLATION DER HMLE AUS DER PRIMAERKUITUR MIT KLONIERUNGSRINGEN
ODER ULEX EUROPAEUS-I-BESCHICHTETEN DYNABEADS.30
3.2.3.3. ZELLKULTUR DER HMLE.30
3 .2.4. CHARAKTERISIERUNG DER ENDOTHELZELLEN.30
3.2.4.1. MORPHOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN.30
3.2.4.2. VON WILLEBRAND FAKTOR, VWF.31
3.2.4.3. NACHWEIS VON PECAM-1 (CD31).32
3.2.4.4. ELAM-1-EXPRESSION NACH RTNF-A-STIMULATION.32
3.3. NACHWEIS VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN.33
3.3.1. IMMUNFLUORESZENZ-NACHWEIS VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN
AUF ENDOTHELZELLEN.33
3.3.2. IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN AUF DEN
NIERENZELLKARZINOMLINIEN.34
3.3.3. BESTIMMUNG DER EXPRESSION VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN AUF
ENDOTHEL- UND
NIERENKARZINOMZELLEN MIT DER DURCHFLUSSZYTOMETRIE.34
3.4. TUMORZELL-ENDOTHELZELL-ADHAESIONSEXPERIMENTE.35
3.5. IMMUNHISTOCHEMISCHER NACHWEIS VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN IN VIVO
NACH RIL-LSS-STIMULATION.37
3.6. ORGANVERTEIIUNG VON CCF-RC1 IN VIVO NACH RIL-1 SS-STIMULATION.39
3 7. STATISTIK.40
3.7.1. STATISTISCHE BEURTEILUNG DER EXPRESSIONS- UND
ADHAESIONSVERSUCHE.40
3.7.2. STATISTISCHE AUSWERTUNG ZU 3.6.41
4. ERGEBNISSE.42
4.1. CHARAKTERISIERUNG DER NIERENZELLKARZINOMLINIE CCF-RC7.42
4.1.1. WACHSTUMSVERHALTEN VON CCF-RC7 IN VITRO.42
4.1.2. WACHSTUMSVERHALTEN VON CCF-RC7 IN SOFTAGAR UND IN VIVO.43
4.1.3. MORPHOLOGIE VON CCF-RC7.43
4.1.4. DNS-HISTOGRAMM VON CCF-RC7.45
4.1.5. KARYOGRAMM VON CCF-RC7.46
4.1.6. IMMUNHISTOCHEMISCHE ANALYSE VON CCF-RC7.47
4.2. EXPRESSION VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN AUF DEN
NIERENZELLKARZINOMLINIEN
CCF-RC1, 2 UND 7.49
4.2.1. EXPRESSION VON IC AM-1.49
4.2.2. EXPRESSION VON VLA-4.51
4.2.3. EXPRESSION VON SIALYL LEWIS X.52
4.2.4. EXPRESSION VON LFA-1.54
4.3. EXPRESSION VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN AUF UNSTIMULIERTEN UND MIT
RIL-LSS-, RTNF-A- ODER PMA-STIMULIERTEN ENDOTHELZELLEN.55
4.3.1. HUMANE NABELSCHNURENDOTHELZELLEN (HUVEC).55
4.3.1.1. EXPRESSION VON IC AM-1.55
4.3.1.2. EXPRESSION VON EL AM-1.58
4.3.1.3. EXPRESSION VON VC AM-1.61
4.3.1.4. EXPRESSION VON PECAM-1.64
4.3.2. HUMANE MIKROVASKULATUR DES PRAEPI,FIUMS.65
4.3.2.1 EXPRESSION VON ELAM-1.65
4.3.2.2. EXPRESSION VON VCAM-1.68
4.3.2.3. EXPRESSION VON PECAM-1.71
4.4. EXPRESSION VON ZELLADHAESIONSMOLEKUELEN AUF UNSTIMULIERTEN UND MIT
RLL-LSS-
STIMULIERTEN HUMANEN MIKROVASKULAEREN LUNGENENDOTHELZELLEN.74
4.4.1. EXPRESSION VON ELAM-1.74
4.4.2. EXPRESSION VON VCAM-1.74
4.4.3. EXPRESSION VON PECAM-1.75
4.5. ADHAESION DER NIERENZELLKARZINOMLINIEN AN ENDOTHELZELLEN.78
4.5.1. ADHAESION AN UNSTIMULIERTEN UND STIMULIERTEN HUMANEN
NABELSCHNURENDOTHELZELLEN.78
4.5.1.1. CCF-RC1.78
4.5.1.2. CCF-RC2.81
4.5.1.3. CCF-RC7.85
4.5.2. ADHAESION AN UNSTIMULIERTEN UND STIMULIERTEN HUMANEN
MIKROVASKULAEREN
PRAEPUTIALENDOTHELZELLEN.88
4.5.2.1. CCF-RC1.88
4.5.2.2. CCF-RC2.91
4.5.2.3. CCF-RC7.95
4.5.3. ADHAESION AN UNSTIMULIERTEN UND STIMULIERTEN HUMANEN
MIKROVASKULAEREN
LUNGENENDOTHELZELLEN.99
4.5.3.1. CCF-RC1.99
4.5.3.2. CCF-RC2.99
4.5.3.3. CCF-RC7.100
4.6. IN VITRO INHIBITION DER ADHAESION VON NIERENKARZINOMZELLEN AN DAS
ENDOTHEL.102
4.6.1. INHIBITION VON ZAM AUF NIERENKARZINOMZELLEN / STIMULIERTEN
HUMANEN
NABELSCHNURENDOTHELZELLEN.102
4.6.2. INHIBITION VON ZAM AUF NIERENKARZINOMZELLEN / STIMULIERTEN
HUMANEN
MIKROVASKULAEREN PRAEPUTIALENDOTHELZELLEN.103
4.6.3. INHIBITION VON ZAM AUF NIERENKARZINOMZELLEN / STIMULIERTEN
HUMANEN
MIKROVASKULAEREN LUNGENENDOTHELZELLEN.104
4.7. EFFEKT VON RMIL-LSS AUF DIE EXPRESSION VON VCAM-1
IN DER LUNGE VON NACKTMAEUSEN.105
4.8. ADHAESION DER NIERENZELLKARZINOMLINIE CCF-RC1 IN VIVO NACH
STIMULATION
MIT RMIL-1 SS.106
5.
DISKUSSION.
107
6.
ZUSAMMENFASSUNG.
126
7. LITERATUR.128
8.
ANHANG: WERTETABELLEN DER VERSUCHSERGEBNISSE,
TNM-SYSTEM UND HISTOPATHOLOGISCHES GRADING.
156 |
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