Gezielte Mutagenese von Eisen-Schwefel-Zentren in der NADH:Ubichinon Oxidoreduktase aus Neurospora crassa:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
ZUSAMMENFASSUNG
1
2.
EINLEITUNG
3
2.1
DAS
SYSTEM
DER
MITOCHONDRIALEN
OXIDATIVEN
PHOSPHORYLIERUNG
3
2.2
DIE
NADH:UBICHINON
OXIDOREDUKTASE
(KOMPLEX
I)
5
2.3
DIE
FUNKTIONSWEISE
DES
KOMPLEX
I
9
2.4
DER
ASCOMYCET
NEUROSPORA
CRASSA
ALS
EUKARYONTISCHER
12
MODELLORGANISMUS
2.5
BESONDERHEITEN
DER
GENINAKTIVIERUNG
IN
N.
CRASSA
15
2.6
THEMA
DER
ARBEIT
18
3.
MATERIAL
UND
METHODEN
20
3.1
MEDIEN
UND
LOESUNGEN
20
3.2
MIKROORGANISMEN,
VEKTOREN
UND
OLIGONUKLEOTIDE
21
3.3
MIKROBIOLOGISCHE
METHODEN
22
3.4
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
25
3.5
ERZEUGUNG
VON
PUNKTMUTANTEN
28
3.6
MITOCHONDRIENPRAEPARATION
AUS
N.
CRASSA
UND
ISOLIERUNG
29
VON
MITOCHONDRIENMEMBRANEN
3.7
ISOLIERUNG
VON
KOMPLEX
I
30
3.8
REKONSTITUTION
DES
ISOLIERTEN
KOMPLEX
I
IN
31
PHOSPHOLIPIDMEMBRANEN
3.9
RADIOAKTIVE
MARKIERUNG
VON
PROTEINEN
31
3.10
ESR-SPEKTROSKOPIE
32
3.11
VERSCHIEDENE
ANALYTISCHE
METHODEN
33
37
4.
ERGEBNISSE
4.1
HERSTELLUNG
DER
DELETIONSMUTANTE
NUO
78
37
4.2
EIGENSCHAFTEN
DER
DELETIONSMUTANTE
NUO78
40
4.2.1
WACHSTUM
UND
MITOCHONDRIALE
CYTOCHROMGEHALTE
40
4.2.2
UNVOLLSTAENDIGE
ASSEMBLIERUNG
DES
KOMPLEX
I
41
4.2.3
ESR-SPEKTROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
45
MITOCHONDRIENMEMBRANEN
4.3
KOMPLEMENTATION
DER
DELETIONSMUTANTE
NUO78
45
4.4
HERSTELLUNG
DER
PUNKTMUTANTEN
NUO78/ALA
57,
47
NUO78/ALA
132,
NUO78/ALA
141,
NUO78/ALA
185
4.5
NACHWEIS
DER
78
KDA-UNTEREINHEIT
IN
EINIGEN
PUNKTMUTANTEN
49
4.6
ISOLIERUNG
UND
EINIGE
EIGENSCHAFTEN
DES
KOMPLEX
I
AUS
53
DEN
MUTANTEN
NUO78/ALA
57
UND
NUO78/ALA
185
4.6.1
ISOLIERUNG
DES
KOMPLEX
I
53
4.6.2
ESR-SPEKTROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
DES
KOMPLEX
I
57
AUS
DEN
MUTANTEN
NUO78/ALA
57
UND
NUO78/ALA
185
4.6.3
KINETISCHE
EIGENSCHAFTEN
DES
KOMPLEX
I
DER
MUTANTEN
60
NUO78/ALA
57
UND
NUO78/ALA
185
5.
DISKUSSION
62
5.1
DIE
DELETIONSMUTANTE
NUO78
62
5.2
GEZIELTE
MUTAGENESE
DES
GENS
NUO7B
64
5.3
GENINAKTIVIERUNG
IN
N.
CRASSA
67
5.4
ANALYSE
DES
KOMPLEX
I
DURCH
BASENSPEZIFISCHE
MUTATIONEN
68
6.
LITERATUR
70 |
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