Untersuchungen zur Regulation und Sekretion des Epidermalen Wachstumsfaktors (EGF) und des Insulinartigen Wachstumsfaktors I (IGF-I) in der Milchdrüse der Ziege:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1998
|
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| Beschreibung: | Hohenheim, Univ., Diss., 1997 |
| Beschreibung: | VI, 187 S. graph. Darst. |
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I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
2
LITERATURUEBERSICHT
.
2
2.1
LAKTATION
ALS
BESTANDTEIL
DER
REPRODUKTION
BEI
SAEUGETIEREN
.
2
2.2
DIE
MILCHDRUESE
:
AUFBAU,
ENTWICKLUNG
UND
FUNKTION
.
3
2.2.1
ANATOMIE
DER
MILCHDRUESE
.
3
2.2.1.1
BLUTVERSORGUNG
DER
MILCHDRUESE
BEIM
WIEDERKAEUER
.
3
2.2.1.2
MORPHOLOGISCH-HISTOLOGISCHER
AUFBAU
.
5
2.2.1.3
FEINSTRUKTUR
DER
DRUESENEPITHELZELLE
.
6
2.2.1.3.1
BASALMEMBRAN
.
6
2.2.1.3.2
SEKRETORISCHER
APPARAT
.
7
2.2.1.3.3
ZELL-ZELL-VERBINDUNGEN
.
8
2.2.2
DIE
MAMMOGENESE
:
BEREITSTELLUNG
EINER
FUNKTIONSFAEHIGEN
MILCHDRUESE
.
9
2.2.2.1
STADIEN
DER
MAMMOGENESE
.
9
2.2.2.2
MAMMOGENESE
WAEHREND
DER
TRAECHTIGKEIT
.
11
2.2.2.2.
1
MORPHOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
IN
DER
MILCHDRUESE
BEIM
WIEDERKAEUER
.
11
2.2.2.2.2
HORMONALE
REGULATION
.
12
2.2.2.2.3
ZELLZYKLUS
UND
WIRKUNG
VON
WACHSTUMSFAKTOREN
.
15
2.2.22.4
WACHSTUMSFAKTOREN
MIT
BEDEUTUNG
FUER
DIE
MAMMOGENESE
.
17
22.2.2.4.
1
EPIDERMALER
WACHSTUMSFAKTOR
(EGF)
.
17
2222.4.2
INSULINARTIGER
WACHSTUMSFAKTOR
I
(IGF-I)
.
22
2.2.2.2.4.3
SYNERGISMUS
VON
EGF
UND
IGF-I
.
26
2222.4.4
SONSTIGE
WACHSTUMSFAKTOREN
.
26
2.2.3
PERIPARTALE
VERAENDERUNGEN
IN
DER
MILCHDRUESE
(LAKTOGENESE)
.
30
2.2.3.1
MORPHOLOGISCHE
VERAENDERUNGEN
IN
DEN
DRUESENZELLEN
.
30
2.2.3.2
FUNKTIONELLE
VERAENDERUNGEN
IN
DER
MILCHDRUESE
.
30
2.2.3.3
ANPASSUNG
EXTRAMAMMAERER
GEWEBE
UND
ORGANE
AN
DIE
LAKTOGENESE
.
32
2.2.4
HORMONALE
REGULATION
DER
PERIPARTALEN
VERAENDERUNGEN
.
34
2.2.4.1
STRUKTURELLE
UND
FUNKTIONELLE
ZELLDIFFERENZIERUNG
.
34
2.2.4.2
SCHLIESSEN
DER
TIGHT
JUNCTIONS
.
35
2.2.4.3
REGULATION
DES
INTRAMAMMAEREN
BLUTFLUSSES
.
35
22.4.4
REGULATION
DER
NAEHRSTOFFUMVERTEILUNG
(NUTRIENT
PARTITIONING)
.
36
2.2.4.5
LAKTOGENESE
IM
RAHMEN
DER
GEBURT
.
37
2.2.4.6
EXPERIMENTELLE
INDUKTION
DER
LAKTATION
.
38
II
2.2.5
GALAKTOPOESE
.
39
2.2.5.1
MILCHENTZUG
.
39
2.2.5.2
ERSATZ
VON
DRUESENZELLEN
.
40
2.3
BIOCHEMISCHE
CHARAKTERISIERUNG
WICHTIGER
WACHSTUMSFAKTOREN
.
42
2.3.1
EPIDERMALER
WACHSTUMSFAKTOR
(EGF)
.
42
2.3.2
INSULINARTIGER
WACHSTUMSFAKTOR
I
(IGF-I)
.
44
3
ZIELSETZUNG
.
45
4
MATERIAL
UND
METHODEN
.
46
4.1
TIERVERSUCHE
.
46
4.1.1
HERKUNFT,
HALTUNG
UND
FUETTERUNG
DER
VERSUCHSTIERE
.
46
4.1.2
DURCHFUEHRUNG
DER
EINZELNEN
VERSUCHE
.
47
4.1.2.1
UNTERSUCHUNGEN
IM
PERIPARTALEN
ZEITRAUM
.
47
4.1.2.1.1
VERSUCHSTIERE
UND
VERSUCHSABLAUF
.
47
4.1.2.1.2
PROBENENTNAHME
UND
MESSPARAMETER
.
47
4.1.2.2
APPLIKATIONSVERSUCH
(GH
/
OESTRADIOL
UND
DEXAMETHASONBEHANDLUNG)
.
48
4.1.2.2.1
VORVERSUCH
ZUR
OESTRADIOLBEHANDLUNG
.
49
4.1.2.2.2
VERSUCHSTIERE
UND
VERSUCHSABLAUF
.
50
4.1.2.2.3
PROBEN
UND
MESSPARAMETER
.
51
4.2
ANALYTIK
.
53
4.2.1
ENTWICKLUNGSARBEITEN
ZUR
BESTIMMUNG
DER
EGF-ARTIGEN
IMMUNREAKTIVITAET
.
53
4.2.1.1
GRUNDSAETZLICHE
UEBERLEGUNGEN
ZUR
METHODENWAHL
.
53
4.2.1.2
ALLGEMEINES
PRINZIP
DER
RADIOIMMUNOLOGISCHEN
BESTIMMUNG
.
55
4.2.1.3
STANDARDS,
ANTISEREN
UND
TRACER
.
55
4.2.1.4
KALIBRIERUNG
DES
HEGF-MESSSYSTEMS
.
57
4.2.1.5
MESSUNG
VON
EGF
IN
BLUTPLASMA
.
58
4.2.1.6
MESSUNG
VON
EGF
IN
EUTERSEKRETEN
.
58
4.2.1.6.1
ENTFETTUNG
.
59
4.2.1.6.2
DIREKTMESSUNG
.
59
4.2.1.6.3
PROTEINFAELLUNG
.
59
4.2.1.6.4
AUFARBEITUNG
UND
KALIBRIERUNG
NACH
PROTEINFAELLUNG
MIT
ACETON
.
61
4.2.1.7
OPTIMIERUNG
VON
IMMUNREAKTION
UND
BOUND-FREE-TRENNUNG
.
62
4.2.1.8
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
PARALLELITAET
DES
MESSVERFAHRENS
.
64
4.2.1.9
KREUZREAKTIONEN
.
65
4.2.1.10
BIOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
66
4.2.1.10.1
GELCHROMATOGRAPHIE
(BIO-SIL-HPLC)
.
66
4.2.1.10.2
WEITERE
BIOCHEMISCHE
UNTERSUCHUNGEN
.
68
IN
4.2.2
MESSVERFAHREN
FUER
IGF-1
.
70
4.2.2.1
METHODIK
.
70
4.2.2.2
DURCHFUEHRUNG
.
70
4.2.3
WEITERE
MESSVERFAHREN
.
71
4.2.3.1
UNKONJUGIERTE
OESTROGENE
.
71
4.2.3.2
PROGESTERON
.
71
4.2.3.3
CORTISOL
.
72
4.2.3.4
LANGKETTIGE
FREIE
FETTSAEUREN
(FFA)
.
72
4.2.3.4.1
METHODENUEBERSICHT
UND
PRINZIP
DER
BESTIMMUNG
.
72
4.2.3.4.2
DURCHFUEHRUNG
.
73
4.2.3.4.3
TESTKRITERIEN
.
74
4.2.3.5
GLUCOSE
.
74
4.2.3.OE
CITRAT
.
75
4.2.3.7
LACTOSE
.
75
4.2.3.8
MILCHFETT
UND
MILCHPROTEIN
.
75
4.3
STATISTIK
.
76
5
ERGEBNISSE
.
77
5.1
MESSUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
EGF
IN
CAPRINEN
PROBEN
.
77
5.1.1
AUSBEUTE
UND
QUALITAET
DES
TRACERS
.
77
5.1.2
EGF-STANDARDKALIBRIERUNG
UND
EINFLUSS
VON
PROTEINZUSAETZEN
.
79
5.1.3
MESSVERFAHREN
FUER
BLUTPLASMA
.
80
5.1.4
AUFBAU
DES
MESSVERFAHRENS
FUER
EUTERSEKRETE
.
81
5.1.4.1
ENTFETTUNG
.
81
5.1.4.2
DIREKTMESSUNG
.
81
5.1.4.3
DEPROTEINISIERUNG
.
81
5.1.4.4
WEITERE
AUFARBEITUNG
.
83
5.1.4.5
KALIBRIERUNG
.
84
5.1.4.6
ANTIGEN-ANTIKOERPERREAKTION
UND
BOUND-FREE-TRENNUNG
.
85
5.1.4.6.1
INKUBATIONSBEDINGUNGEN
.
85
5.1.4.6.2
ZUGABE
VON
CAPRINEN
GAMMAGLOBULINEN
.
87
5.1.4.6.3
WEITERE
OPTIMIERUNGSVERSUCHE
.
88
5.1.4.7
KALIBRIERUNGEN
UND
KREUZREAKTIVITAETEN
VON
EGF
ANDERER
SPEZIES
.
89
5.1.5
BESCHREIBUNG
DES
ENDGUELTIGEN
MESSVERFAHRENS
FUER
MILCHDRUESENSEKRETE
.
90
5.1.5.1
DURCHFUEHRUNG
.
90
5.1.5.2
KALIBRIERKURVE
.
93
5.1.5.3
QUALITAETSKRITERIEN
.
94
5.1.5.3.1
PARALLELITAET
.
94
IV
5.1.5.3.2
TESTSENSITIVITAET
.
96
5.1.5.3.3
METHODENPRAEZISION
UND
WIEDERFMDUNG
.
96
5.1.5.3.4
SPEZIFITAET
.
98
5.1.6
ERGEBNISSE
DER
BIOCHEMISCHEN
UNTERSUCHUNGEN
DES
CAPRINEN
EOF
.
98
5.1.6.1
GELCHROMATOGRAPHIE
(BIOSIL-HPLC)
.
98
5.1.6.1.1
KALIBRIERUNG
.
98
5.1.6.1.2
EGF-MOLEKULARGEWICHTSFORMEN
IN
CAPRINEN
EUTERSEKRETEN
.
99
5.1.6.1.3
BEEINFLUSSUNG
DER
MOLEKULARGEWICHTSVERTEILUNG
.
101
5.1.6.1.4
CHARAKTERISIERUNG
DER
EGF-MESSUNG
NACH
DEM
STANDARDVERFAHREN
103
5.1.6.2
WEITERE
ERGEBNISSE
BIOCHEMISCHER
UNTERSUCHUNGEN
.
103
5.2
MESSUNG
VON
IGF-I
IN
CAPRINEN
PROBEN
.
104
5.3
SYSTEMATISCHE
MESSUNGEN
IM
PERIPARTALEN
ZEITRAUM
.
106
5.3.1
CHARAKTERISIERUNG
DER
PERIPARTALEN
EUTERSEKRETE
ANHAND
DER
PROTEINGEHALTE
.
106
5.3.2
MAMMAERE
SEKRETION
VON
EGF
UND
IGF-I
IM
PERIPARTALEN
ZEITRAUM
.
107
5.3.2.1
TRAECHTIGE
TIERE
.
107
5.3.2.2
KONTROLLTIERE
.
110
5.3.3
PERIPARTALE
KONZENTRATIONEN
VON
CITRAT
UND
LACTOSE
.
111
5.3.4
WACHSTUMSFAKTOREN
IM
BLUTPLASMA
.
113
5.3.5
MAMMOGENE
UND
LACTOGENE
HORMONE
DES
PERIPHEREN
BLUTPLASMAS
.
115
5.3.5.1
PROGESTERON
UND
OESTROGENE
.
115
5.3.5.2
GLUCOCORTICOIDE
.
117
5.3.6
GEGENUEBERSTELLUNG
VON
PERIPHEREN
HORMONEN
UND
MAMMAEREM
IGF-I
.
118
5.3.7
GEGENUEBERSTELLUNG
VON
PERIPHEREN
HORMONEN
UND
MAMMAEREM
EGF
.
118
5.4
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
REGULATION
DER
MAMMAEREN
EGF
UND
IGF-I-SEKRETION
.
119
5.4.1
ERGEBNISSE
DES
GH
(BST-)
APPLIKATIONSVERSUCHS
.
119
5.4.1.1
SEKRETION
DER
WACHSTUMSFAKTOREN
.
120
5.4.1.2
EINFLUSS
DER
BST-BEHANDLUNG
AUF
MILCHLEISTUNG
UND
MILCHPARAMETER
.
121
5.4.1.3
EINFLUSS
DER
BST-APPLIKATION
AUF
DEN
ENERGIESTOFFWECHSEL
.
122
5.4.1.4
UEBERSICHT
DER
RESULTATE
DER
BST-APPLIKATION
.
124
5.4.2
ERGEBNISSE
DER
OESTRADIOL
APPLIKATIONSVERSUCHE
.
124
5.4.2.1
VORVERSUCH
.
124
5.4.2.2
HAUPTVERSUCH
.
125
5.4.2.2.1
EINFLUSS
DER
BEHANDLUNG
AUF
DEN
ENERGIESTOFFWECHSEL
.
126
5.4.2.2.2
SEKRETION
VON
WACHSTUMSFAKTOREN
NACH
OESTRADIOLBEHANDLUNG
.
128
5.4.2.2.3
EINFLUSS
DER
BEHANDLUNG
AUF
MILCHSEKRETION
UND
-INHALTSSTOFFE
.
130
5.4.2.2.4
ZUSAMMENFASSUNG
DER
WOCHENMITTELWERTE
.
134
V
6
DISKUSSION
.
135
6.1
DISKUSSION
DER
ANALYTISCHEN
MESSVERFAHREN
.
135
6.1.1
MESSUNG
UND
CHARAKTERISIERUNG
VON
EGF
.
135
6.1.2
MESSUNG
VON
IGF-1
.
137
6.1.3
ANDERE
PARAMETER
.
137
6.2
DISKUSSION
DER
PHYSIOLOGISCHEN
ERGEBNISSE
.
138
6.2.1
PERIPARTALE
UNTERSUCHUNGEN
.
138
6.2.2
APPLIKATIONSVERSUCHE
.
142
6.2.2.1
GH-APPLIKATION
.
142
6.2.2.2
OESTRADIOLAPPLIKATION
.
143
7
ZUSAMMENFASSUNG
_
146
8
LITERATURVERZEICHNIS
_
149
9
ANHANG
.
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