Zur Analytik von Steroidhormonen mit Hilfe der Isotopenverdünnungs-Gaschromatographie-Massenspektrometrie: Synthese der internen Standards [2,2,4,4,21,21-H1tn7] 17a-Hydroxypregnenolon und [1,2-H1tn2] 11-Desoxycortisol und Entwicklung eines Assays zur Bestimmung von 17a-Hydroxypregnenolon in menschlichem Plasma
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| Format: | Buch |
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1997
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I
INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
1.1
BIOSYNTHESE
DER
STEROIDHORMONE
.
1
1.2
STOERUNGEN
DER
BIOSYNTHESE
DES
CORTISOLS:
ADRENOGENITALES
SYNDROM
.
5
1.2.1
FORMEN
DES
ADRENOGENITALEN
SYNDROMS
.
5
1.2.2
DIAGNOSE
VON
ENZYMDEFEKTEN
DER
STEROIDBIOSYNTHESE
.
8
1.3
ISOTOPENVERDUENNUNGS/GASCHROMATOGRAPHIE-MASSENSPEKTROMETRIE
.
11
1.3.1
BEDEUTUNG
UND
ANWENDUNG
DER
ID/GC-MS
.
11
1.3.2
SYNTHESE
DEUTERIERTER
C21-STEROIDE
.
13
2
AUFGABENSTELLUNG
.
20
3
EXPERIMENTELLER
TEIL
.
21
3.1
LOESUNGSMITTEL,
CHEMIKALIEN,
METHODEN
UND
GERAETE
.
21
3.2
VORVERSUCHE:
DERIVATISIERUNG
VON
STEROIDHORMONEN
.
27
3.3
SYNTHESE
VON
[24,4,4414141
-
2
H7[
17A
-
HYDROXYPREGNENOKM
.
32
3.3.1
SYNTHESEPLAN
.
32
3.3.2
DURCHFUEHRUNG
.
34
3.3.3
BESTIMMUNG
DER
ISOTOPENVERTEILUNG
.
39
3.3.4
STRUKTURAUFKLAERUNG
MIT
HILFE
DER
NMR-SPEKTROSKOPIE
.
40
3.4
SYNTHESE
VON
[14
-
2
H
I
]
11
-
DESOXYCORTISOL
.
41
3.4.1
SYNTHESEPLAN
.
41
3.4.2
EHIRCHFTIHRUNG
.
43
3.5
PLASMASTEROIDBESTIMMUNG
.
47
3.5.1
PROBANDENGUT
.
47
3.5.2
PROBENVORBEREITUNG
/
DERIVATISIERUNG
.
48
3.5.3
SIM
GC/MS
.
50
3.5.4
KALIBRIERSTANDARD
.
50
3.5.5
ERMITTLUNG
DER
STABILITAET
DES
INTERNEN
STANDARDS
.
51
3.5.6
KALIBRIERUNG
.
51
3.5.7
BESTIMMUNG
DER
SENSITIVITAET
DER
METHODE
.
53
3.5.8
BESTIMMUNG
DER
RICHTIGKEIT
UND
PRAEZISION
DER
METHODE
.
54
4
ERGEBNISSE
.
55
4.1
ERGEBNISSE
DER
VORVERSUCHE
.
55
4.2
SYNTHESE
VON
[2,2,4,4,21,21,21
-
2
H?]
17A
-
HYDROXYPREGNENOLON
.
77
4.2.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
SYNTHESESTUFEN
.
77
4.2.2
UEBERPRUEFUNG
DER
REINHEIT
.
82
4.2.3
BESTIMMUNG
DER
ISOTOPENVERTEILUNG
.
86
4.2.4
ERMITTLUNG
DER
STABILITAET
DES
DEUTERIERTEN
STANDARDS
.
87
4.2.5
STRUKTURA
"
KLAERUNG
MIT
HILFE
DER
NMR-SPEKTROSKOPIE
.
89
4.3
SYNTHESE
VON
[1,2
-
2
H
I
[
11
-
DESOXYCORTISOL
.
96
4.3.1
IDENTIFIZIERUNG
DER
SYNTHESESTUFEN
.
96
4.3.2
UEBERPRUEFUNG
DER
REINHEIT
.
102
4.3.3
BESTIMMUNG
DER
ISOTOPENVERTEILUNG
.
104
4.4
PLASMASTEROIDBESTIMMUNG
.
106
4.4.1
KALIBRIERUNG
.
106
4.4.2
17A-HYDROXYPREGNENOLON
IN
PLASMA
.
108
4.4.2.1
SENSITIVITAET
.
108
4.4.2.2
RICHTIGKEIT
UND
PRAEZISION
.
109
4.4.2.3
REALPROBEN
.
110
5
DISKUSSION
.
117
5.1
DISKUSSION
DER
VORVERSUCHE
.
117
5.2
SYNTHESE
DER
INTERNEN
STANDARDS
.
124
5.2.1
[2,2,4,4,21,21,21
-
2
H7]
17A
-
HYDROXYPREGNENOLON
.
124
5.2.2
[1,2
-
2
H
I
]
11
-
DESOXYCORTISOL
.
131
5.3
ENTWICKLUNG
EINES
ASSAYS
ZUR
QUANTIFIZIERUNG
VON
17A-HYDROXYPREGNENOLON
134
5.4
QUANTIFIZIERUNG
VON
17A-HYDROXYPREGNENOION
IN
PLASMA
MITTELS
ID/GC-MS
136
5.5
SCHLUSSFOLGERUNG
.
141
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
142
7
LITERATURVERZEICHNIS
.
144 |
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