Untersuchungen zum molekularen Wirkmechanismus von Hormonen und Antihormonen am Androgenrezeptor:
Gespeichert in:
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| Format: | Abschlussarbeit Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
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| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | 120 S. Ill., graph. Darst. |
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|---|---|
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INHALTSVERZEICHNIS
1.
EINLEITUNG
-----------------------------------------------------------------------
1
1.1
DER
ANDROGENREZEPTOR
(AR)
------------------------------------------------------------------
1
1.2
ANDROGENE
---------------------------------------------------------------------------------------
6
1.3
MOLEKULARE
WIRKMECHANISMEN
DES
AR
-----------------------------------------------------
7
1.3.1
MOLEKULARE
WIRKMECHANISMEN
VON
ANDROGENEN
-----------------------------------------
8
1.3.2
MOLEKULARE
WIRKMECHANISMEN
VON
ANTIHORMONEN
-------------------------------------
12
1.3.3
DIE
FUNKTION
DES
AR
BEIM
PROSTATAKARZINOM
-------------------------------------------
16
1.4
AUFGABENSTELLUNG
------------------------------------------------------------------------------
18
2.
MATERIAL
UND
METHODEN
-----------------------------------------------------
19
2.1
ZELLKULTUR
--------------------------------------------------------------------------------------
22
2.1.1
ZELLINIE
-----------------------------------------------------------------------------------------
22
2.1.2
KULTIVIERUNG
DER
ZELLEN
---------------------------------------------------------------------
22
2.2
TRANSFEKTION
-----------------------------------------------------------------------------------
24
2.3
UEBERPRUEFUNG
DER
TRANSFEKTIONSEFFIZIENZ
MIT
SS-GAL
-------------------------------------
25
2.4
HORMONBEHANDLUNG
DER
ZELLEN
-------------------------------------------------------------
26
2.5
PROTEINBESTIMMUNG
--------------------------------------------------------------------------
27
2.6
REZEPTORTEST
-----------------------------------------------------------------------------------
27
2.6.1
PROTEINEXTRAKTION
FUER
DEN
REZEPTORTEST
AUS
COS-7
ZELLEN
-----------------------------
28
2.6.2
VORBEREITUNG
DES
RADIOAKTIVEN
LIGANDEN
-------------------------------------------------
30
2.6.3
BESTIMMUNG
DER
BINDUNGSAFFINITAET
VON
TESTSUBSTANZEN
ZUM
AR
--------------------
32
2.7
IMMUNOCYTOCHEMISCHER
NACHWEIS
DES
AR
IN
COS-7
ZELLEN
--------------------------
33
2.8
DNA-BINDUNGSTEST
---------------------------------------------------------------------------
35
2.8.1
CYTOSOLPRAEPERATION
AUS
COS-7
ZELLEN
FUER
DEN
DNA-BINDUNGSTEST
-------------------
35
2.8.2
VORBEREITUNG
DES
OLIGONUKLEOTIDS
---------------------------------------------------------
36
2.8.3
DURCHFUEHRUNG
DES
DNA-BINDUNGSTEST
----------------------------------------------------
38
2.9
TRANSAKTIVIERUNGSASSAY
MIT
LUCIFERASE
ALS
REPORTERGEN
--------------------------------
40
2.9.1
DURCHFUEHRUNG
DES
TRANSAKTIVIERUNGSASSAY
----------------------------------------------
40
2.10
NORTHEM-BLOT
---------------------------------------------------------------------------------
42
2.10.1
ISOLIERUNG
VON
MRNA
AUS
COS-7
ZELLEN
------------------------------------------------
42
2.10.2
AUFTRENNUNG
VON
MRNA
DURCH
AGAROSE-GELELEKTROPHORESE
--------------------------
43
2.10.3
RNA-BLOTTING
---------------------------------------------------------------------------------
44
2.10.4
HYBRIDISIERUNG
--------------------------------------------------------------------------------
44
2.10.5
STRIPPEN
----------------------------------------------------------------------------------------
45
2.11
WESTEM-BLOT
----------------------------------------------------------------------------------
46
2.11.1
PRAEPARATION
DES
ZELLCYTOSOL
AUS
COS-7
ZELLEN
------------------------------------------
46
2.11.2
GELELEKTROPHORESE
----------------------------------------------------------------------------
46
2.11.3
SEMI-DRY
BLOTTING
------------------------------------------------------------------------------
47
2.11.4
BLOCKEN
----------------------------------------------------------------------------------------
48
2.11.5
ANTIKOERPERINKUBATION
------------------------------------------------------------------------
48
2.11.6
DETEKTION
--------------------------------------------------------------------------------------
49
2.11.7
LAGERUNG
UND
WEITERVERARBEITUNG
---------------------------------------------------------
49
2.12
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
-----------------------------------------------------------
50
2.12.1
TRANSFORMATION
VON
KOMPETENTEN
E.COLI
BAKTERIEN
-------------------------------------
50
2.12.2
PLASMIDISOLIERUNG
AUS
TRANSFORMIERTEN
E.COLI
BAKTERIEN
--------------------------------
50
2.12.3
DNA-FAELLUNG
----------------------------------------------------------------------------------
52
2.12.4
DNA-KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
----------------------------------------------------------
52
3.
ERGEBNISSE
----------------------------------------------------------------
----
53
3.1
OPTIMIERUNG
DER
UEBEREXPRESSION
DES
AR
DURCH
ELEKTROPORATION
--------------
----
53
3.2
UEBERPRUEFUNG
DER
BIOLOGISCHEN
AKTIVITAET
DES
UEBEREXPRIMIERTEN
AR
AUS
-------
----
59
TRANSFIZIERTEN
COS-7
ZELLEN
DURCH
EINEN
REZEPTORAFFINITAETSTEST
UND
EINEN
TRANSAKTIVIERUNGSTEST
3.2.1
REZEPTORAFFINITAETSTEST
DES
UEBEREXPRIMIERTEN
AR
AUS
TRANSFIZIERTEN
------------
----
59
COS-7
ZELLEN
MIT
VERSCHIEDENEN
TESTSUBSTANZEN
3.2.2
TRANSAKTIVIERUNGSTEST
MIT
LUCIFERASE
ALS
REPORTERGEN
---------------------------
----
61
3.3
CHARAKTERISIERUNG
DER
TESTSUBSTANZEN
DURCH
EINEN
TRANSAKTIVIERUNGSTEST
----
----
64
3.3.1
EINFLUSS
DER
ANTIANDROGENE
CPA,
OH
FLUTAMID
UND
CASODEX
AUF
DIE
--------
----
69
TRANSAKTIVIERUNG
3.3.2
EINFLUSS
DER
ANTIGESTAGENE
RU
486,
ONAPRISTON,
SOWIE
DEM
GESTAGEN
-------
----
71
DROSPIRENON
AUF
DIE
TRANSAKTIVIERUNG
3.4
DNA-BINDUNGSEIGENSCHAFTEN
DES
AR
AUS
TRANSFIZIERTEN
COS-7
ZELLEN
------
----
73
3.4.1
DIE
DNA-BINDUNG
DES
AR
IST
ABHAENGIG
VON
DER
AR-KONZENTRATION
---------
----
74
3.4.2
NACHWEIS
DER
SPEZIFITAET
DER
DNA-BINDUNG
---------------------------------------
----
74
3.4.3
ABHAENGIGKEIT
DER
DNA-BINDUNG
DES
AR
VON
DER
HORMONKONZENTRATION
----
----
78
3.5
DNA-BINDUNG
DES
AR
NACH
BEHANDLUNG
MIT
VERSCHIEDENEN
TESTSUBSTANZEN
----
80
3.6
EINFLUSS
DER
ANTIANDROGENE
CPA,
OH
FLUTAMID
UND
CASODEX
AUF
DIE
--------
----
82
DNA-BINDUNG
DES
AR
3.6.1
EINFLUSS
DER
ANTIGESTAGENE
RU
486,
ONAPRISTON,
SOWIE
DEM
GESTAGEN
-------
-----
85
DROSPIRENON
AUF
DIE
DNA-BINDUNG
DES
AR
3.6.2
DOSISWIRKUNG
VON
ZK
114
043
IM
DNA-BINDUNGSTEST
-------------------------
-----
88
3.7
UNTERSUCHUNG
DER
AR-PROTEINSTABILITAET
--------------------------------------------
-----
89
3.7.1
EINFLUSS
VON
ANTIANDROGENEN
AUF
DIE
AR-PROTEINSTABILITAET
----------------------------
90
3.7.2
EINFLUSS
DER
ANTIGESTAGENE
RU
486,
ONAPRISTON,
SOWIE
DEM
GESTAGEN
-------
-----
93
DROSPIRENON
AUF
DIE
AR-PROTEINSTABILITAET
3.8
KEMTRANSPORT
DES
AR
IN
COS-7
ZELLEN
--------------------------------------------
-----
95
3.9
WIRKUNG
VON
HORMONEN
UND
ANTIHORMONEN
AUF
DIE
EXPRESSION
DES
AR
-----
-----
98
4.
DISKUSSION
---------------------------------------------------------------------
100
4.1
ETABLIERUNG
DES
DNA-BINDUNGSTEST
MIT
DEM
AR
AUS
SAEUGERZELLEN
----------------
100
4.2
EINFLUSS
VON
ANTIANDROGENEN
UND
ANDROGENEN
SUBSTANZEN
AUF
DIE
-------------------
102
DNA-BINDUNG
DES
AR
4.3
EINFLUSS
VON
ANTIANDROGENEN
UND
ANDROGENEN
SUBSTANZEN
AUF
DIE
-------------------
104
TRANSAKTIVIERUNG
DES
AR
4.4
EINFLUSS
VON
ANTIANDROGENEN
UND
ANDROGENEN
SUBSTANZEN
AUF
DEN
------------------
105
KEMTRANSPORT
DES
AR
4.5
EINFLUSS
VON
ANTIANDROGENEN
UND
ANDROGENEN
SUBSTANZEN
AUF
DIE
------------------
107
PROTEINSTABILITAET
DES
AR
4.6
EINFLUSS
VON
ANTIANDROGENEN
UND
ANDROGENEN
SUBSTANZEN
AUF
DIE
-------------------
108
MRNA
DES
AR
4.7
AUSBLICK
---------------------------------------------------------------------------------------
110
5.
ZUSAMMENFASSUNG
-----------------------------------------------------------
111
6.
LITERATUR
-----------------------------------------------------------------------
113 |
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| author | Müller-Schöttle, Frank |
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| spelling | Müller-Schöttle, Frank Verfasser aut Untersuchungen zum molekularen Wirkmechanismus von Hormonen und Antihormonen am Androgenrezeptor vorgelegt von Frank Müller-Schöttle 1997 120 S. Ill., graph. Darst. txt rdacontent n rdamedia nc rdacarrier Berlin, Freie Univ., Diss., 1997 Androgene (DE-588)4137600-6 gnd rswk-swf Zellkultur (DE-588)4067547-6 gnd rswk-swf Säugetiere (DE-588)4051253-8 gnd rswk-swf Antiandrogene (DE-588)4137601-8 gnd rswk-swf Rezeptor (DE-588)4049722-7 gnd rswk-swf (DE-588)4113937-9 Hochschulschrift gnd-content Säugetiere (DE-588)4051253-8 s Zellkultur (DE-588)4067547-6 s Androgene (DE-588)4137600-6 s Rezeptor (DE-588)4049722-7 s Antiandrogene (DE-588)4137601-8 s DE-604 DNB Datenaustausch application/pdf http://bvbr.bib-bvb.de:8991/F?func=service&doc_library=BVB01&local_base=BVB01&doc_number=007979389&sequence=000001&line_number=0001&func_code=DB_RECORDS&service_type=MEDIA Inhaltsverzeichnis |
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