Charakterisierung von Phycobiliprotein-Linkerkomplexen aus dem Phycobilisom von Mastigocladus laminosus: Vergleich nativer und überexprimierter Linker
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1997
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| adam_text | CHARAKTERISIERUNG VON PHYCOBILIPROTEIN-LINKERKOMPLEXEN AUS DEM
PHYCOBILISOM VON MASTIGOCLADUS LAMINOSUS VERGLEICH NATIVER UND
UEBEREXPRIMIERTER LINKER DISSERTATION DER FAKULTAET DER BIOLOGIE DER
LUDWIG- MAXIMILIANS-UNIVERSITAET MUENCHEN VORGELEGT VON AXEL PARBEL AUS
BOCHUM JULI 1997 VI INHALTSVERZEICHNIS 1 EINLEITUNG 1 1 1
PTIVCNHILIWFFLEN . ... ............ .. ... ...*..... *...........
............... 2 1 _ PHVFNHILINROTEINC .. * * . ** .....
.**.*..****** ***..**..***..** ***..** ******..**.** . 6 1.3 DIE
KRISTALLSTRUKTUR VON PC UND PEC 8 1.4 LINKER-POL) PEPTIDE, DAS GERIIST
DER PBS 11 1.5 ORGANISATION DER PHJCOBILISOMENGENE. . . 12 1.6
PROBLEMSTELLUNG 14 2 MATERIAL UND METHODEN 15 2.1
AIIGEIIWINES-__U_-U -~. ~ ~-~._»~~M. M
_. ..» ~~.-. ---.~ ~*~I ~~~ ~~ ~ ~-~~ ~~~~ ~ 15 2.2
GERJTE.............................................................................................*........-.....*.*..*.***.*-.****.-*
15 2.3 GENETISCHE TECHNIKEN 16 2.3.1 VEKTOREN FAETE.COLI 16 2.3.2
ISOLIERUNG VON PLASMID-DNA 16 2.3.3 MODIFIZIERUNGEN AN PLASNUED-DNA 16
2.3.4 LIGATION UND TRANSFORMATION VON PLASMID-DNA 18 2.3.5
AGAROSEGELELEKTROPHORESE 18 2.3.6 DNA ISOLIERUNG AUS AGAROSEGELEN 19
2.3.7 POLYMERASE CHAIN REACTION 19 2.3.8 HOMOLOGIE-VERGLEICHE 20 2.4
PROTEINCHEMISCHE TECHNIKEN
.................................*............................................
.................-...*..** 21 2.4.1 ASANDA ON MASUEGOCLADUS IAMINOSUS 21
2.4.2 ISOLIERUNG VON PHYCOBILISOMEN 21 2.4.3 AUFREINIGUNG NALIVER
LINKERPEPTIDE 22 2.4.4 EXPRESSION UND REINIGUNG VON MBP-FIISIONICRTEN
LINKERPEPTIDEN 23 2.4.5 ISOLIERUNG VON PHYCOBILIPROTEINEN 24 2.4.6
AUFREINIGUNG VON PEC UND ISOLIERUNG DER UNTEREINHEITEN 25 2.4.7
REKONSTITUTION UND AUFREINIGUNG VON BILIPROTEIN-LINKERKOMPLEXEN 26 2.4.8
GELELEKTROPHORETISCHE TECHNIKEN 26 2.5 SPEKTROSKOPISCHE METHODEN
...*....*...*............,...*.......»».....................».».......*..
.*...*.»*.*.....**..» 27 2.5.1 ABSORPTIONS-, CIRCULAR DICHROISMUS- UND
FLUORESZENZ-SPEKTROSKOPIE 27 2.5.2 LINEAR DICHROISMUS-SPEKTROSKOPIE 28
2.5.3 DIE BILIN -LINIENFUNKTION 28 3 ERGEBNISSE 30 3.1 MODELL FUER DIE
PHYCOBILISOMEN- RODS AUS LUASTIGODADUS LAMINOSUS.................
*........*..... 30 3.2 EXPRESSION VON LINKERPEPTIDEN ALS FUSIONSPROTEINE
.... . ..*..................*..... 38 3.2.1 EXPRESSION VON MBP-PECC UND
MBP-PECC* 38 3.2.2 EXPRESSION VON MBP-CPCC 41 3.2.3 EXPRESSION VON
MBP-CPCD 43 3.2.4 CHARAKTERISIERUNG UND ZUSAMMENFASSUNG 44 VN_ 3.3
EXPRESSION DER LINKERPEPTIDE ALS NATIVE PROTEINE. 45 3.4
CHARAKTERISIERUNG VON PHYCOBILIPROTEINEN UND PHYCOBILISOMEN 47 3.4.1
PHYCOBILISOMEN AUS MASTIGOCLADUS LAMINOSUS .. .... . . . . 47 3.4.2
AUFREINIGUNG UND CHARAKTERISIERUNG VON PHYCOBILIPROTEINEN 49 3.4.3
CHARAKTERISIERUNG VON PEC 53 3.4.4 CHROMOPHORZUORDNUNG IN PEC 57 3.4.5
DIE PHOTOCHEMIE DES PECS VON DER UNTEREINHEIT BIS ZUM PHYCOBILISOM
. . . .. . . . . . .. 74 3.5 NATIVE LINKER-KOMPLEXE AUS PHYCOBILISOMEN
. .. . *.** . 87 3.6 REKONSTITUIERTE KOMPLEXE MIT NATIVEN UND
EXPRIMIERTEN LINKERPEPTIDEN 90 3.6.1 ISOLIERUNG NALIVER LINKER AUS DEM
PHYCOBILISOM VONM LAMINOSUS 90 3.6.2 REKONSTITUTIONEN MIT NATIVEN
LINKEM 93 3.6.3 REKONSTITUTIONEN MIT EXPRIMIERTEN LINKEM 98 4 DISKUSSION
I O 3 4.1 MODELL FUER DIE RODS HEMIDISCOIDALER PHYCOBILISOMEN.. . .
....... .... 103 4.2 CHROMOPHORZUORDNUNG UND PHOTOCHEMIE IN PEC . . .. *
. 105 4.3 REKONSTITUTION VON LINKERPEPTIDEN MIT PHYCOBILIPROTEINEN 109 5
ZUSAMMENFASSUNG 1 14 6 LITERATURVERZEICHNIS 118 7 ANHANG 130
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