Phylogenie, Struktur und Funktion von Hydroxynitril-Lyasen höherer Pflanzen:
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Veröffentlicht: |
1997
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Beschreibung: | Stuttgart, Univ., Habil.-Schr., 1997 |
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INHALTSVERZEICHNIS
SEITE
1 EINLEITUNG 5
1.1 HYDROXYNITRIL-LYASEN: CYANHYDRIN SPALTENDE ENZYME 5
1.1.1 VORKOMMEN 6
1.1.2 BIOCHEMISCHE EIGENSCHAFTEN 6
1.2 FUNKTION VON HYDROXYNITRIL-LYASEN IN CYANOGENEN PFLANZEN 10
1.2.1 CYANOGENESE ALS FRABSCHUTZ 10
1.2.2 BESCHLEUNIGTE HCN-FREISETZUNG DURCH HYDROXYNITRIL-LYASEN WAHREND
DER CYANOGENESE 14
1.2.3 MOBILISIERUNG VON STICKSTOFF AUS CYANOGENEN GLYKOSIDEN 14
1.3 STEREOSELEKTIVE SYNTHESE VON CYANHYDRINEN MIT HILFE VON
HYDROXYNITRIL-LYASEN 16
1.3.1 (R)- UND (S)-A-HYDROXYNITRILE: WICHTIGE ZWISCHENVERBINDUNGEN IN
DER
ORGANISCHEN SYNTHESE
; 16
1.3.2 STEREOSELEKTIVE DARSTELLUNG VON A-HYDROXYNITRILEN MITTELS NICHT
ENZYMATISCHER METHODEN 16
1.3.2.1 PEPTIDKATALYSIERTE DARSTELLUNG VON A-HYDROXYNITRILEN 16
1.3.2.2 ENANTIOSELEKTIVE SYNTHESE VON A-HYDROXYNITRILEN MIT HILFE
CHIRALER
KATALYSATOREN 18
1.3.2.3 DIASTEREOSELEKTIVE SYNTHESE VON A-HYDROXYNITRILEN 18
1.3.2.4 INVERSION VON OPTISCH AKTIVEN CYANHYDRINEN 19
1.3.3 STEREOSELEKTIVE DARSTELLUNG VON A-HYDROXYNITRILEN MITTELS
ENZYMATISCHER VERFAHREN 20
1.3.3.1 LIPASENKATALYSIERTE DARSTELLUNG VON CYANHYDRINEN 20
1.3.3.2 HNL-KATALYSIERTE DARSTELLUNG VON A-HYDROXYNITRILEN 22
1.4 WISSENSCHAFTLICHE FRAGESTELLUNGEN DER VORLIEGENDEN
HABILITATIONSSCHRIFT 26
2 EIGENE FORSCHUNGSARBEITEN 27
2.1 REINIGUNG UND CHARAKTERISIERUNG VON HYDROXYNITRIL-LYASEN 27
2.1.1 ISOLATION DER HYDROXYNITRIL-LYASEN AUS
MANIHOT ESCULENTA (MEHNL) UND
HEVEA BRASILIENSIS
(HBHNL) 27
2.1.2 REINIGUNG UND CHARAKTERISIERUNG DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
PHLEBODIUM AUREUM
(PHAHNL) 31
2.1.3 IMMUNOLOGISCHE UNTERSUCHUNGEN ZUR PHYLOGENIE DER HYDROXYNITRIL
LYASEN HOHERER PFLANZEN 36
2.2 MOLEKULARE KLONIERUNG VON HYDROXYNITRIL-LYASEN 38
2.2.1 KLONIERUNG DES N-TERMINALEN ENDES DER CDNA DER HYDROXYNITRIL LYASE
AUS
SORGHUM BICOLOR (SBHNL) UND EXPRESSION DER KOMPLETTEN CDNA 38
BIBLIOGRAFISCHE INFORMATIONEN
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HYDROXYNITRIL-LYASEN HOHERER PFLANZEN
2
2.2.1.1 SEQUENZANALYSE DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
SORGHUM BICOLOR 38
2.2.2 KLONIERUNG DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
MANIHOT ESCULENTS 42
2.2.2.1 SEQUENZANALYSE DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
MANIHOT ESCULENTA 42
2.2.2.2 FUNKTIONELLE EXPRESSION DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
MANIHOT ESCULENTA 45
2.2.3 KLONIERUNG DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
LINUM USITATISSIMUM 46
2.2.3.1 SEQUENZANALYSE DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
LINUM USITATISSIMUM 46
2.2.3.2 FUNKTIONELLE EXPRESSION DER HYDROXYNITRIL LYASE AUS
LINUM USITATISSIMUM
51
2.3 IDENTIFIKATION VON FUNKTIONELL BEDEUTSAMEN AMINOSAURERESTEN IN
HYDROXYNITRIL-LYASEN 53
2.3.1 STUDIEN MIT SEITENKETTEN-MODIFIZIERENDEN AGENZIEN 53
2.3.2 IDENTIFIKATION EINER MOGLICHEN KATALYTISCHEN TRIADE IN DER
HYDROXYNITRIL
LYASE AUS
MANIHOT ESCULENTA 54
2.3.3 IDENTIFIKATION FUNKTIONELL WICHTIGER RESTE IRR DER HYDROXYNITRIL
LYASE AUS
LINUM USITATISSIMUM
57
2.4 DIE HYDROXYNITRIL-LYASEN AUS
MANIHOT ESCULENTA, PHLEBODIUM AUREUM
UND
LINUM USITATISSIMUM IN DER STEREOSELEKTIVEN SYNTHESE VON CYAN-
HYDRINEN 60
2.4.1 UNTERSUCHUNGEN ZUR STEREOSELEKTIVITAT UND SUBSTRATSPEZIFITAT VON
MEHNL UND PHAHNL 60
2.4.2 REKOMBINANTE LUHNL IN DER STEREOSELEKTIVEN SYNTHESE VON
(R)-CYANHYDRINEN 61
3 DISKUSSION 63
3.1 DIE PHYLOGENIE DER HYDROXYNITRIL-LYASEN HOHERER PFLANZEN 63
3.2 STRUKTUR VON HYDROXYNITRIL-LYASEN UND MECHANISMUS DER
HNL-KATALYSIERTEN CYANHYDRINSPALTUNG 67
3.2.1 DIE HNL AUS
SORGHUM BICOLOR, HEVEA BRASILIENSIS UND MANIHOT
ESCULENTA
- MITGLIEDER DER SUPERFAMILIE DER
"A/6
HYDROLASE FOLD"-
ENZYME 67
3.2.2 MOLEKULARE MECHANISMEN DER MEHNL/HBHNL-KATALYSIERTEN
CYANHYDRINSPALTUNG 70
3.3 DIE MEHNL ALS INDUSTRIELLER KATALYSATOR ZUR STEREOSELEKTIVEN
SYNTHESE
VON (S)-CYANHYDRINEN 70
4 ZUSAMMENFASSUNG UND AUSBLICK 74
5 LITERATUR 78 |
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