Verfügbarkeit: Der Kompetitive LDL-Rezeptor-ELISA

Der Kompetitive LDL-Rezeptor-ELISA: Entwicklung und einige Anwendungen

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Bibliographische Detailangaben
1. Verfasser:	Jeck, Nikola 1967- (VerfasserIn)
Format:	Buch
Sprache:	German
Veröffentlicht:	1997
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adam_text	I. INHALT I. INHALT SEITE [. INHALT 3 II. ABKUERZUNGEN 6 III. EINLEITUNG 8 III.A. DER LDL-REZEPTOR - SCHLUESSELPROTEIN DER CHOLESTERINHOMOEOSTASE 9 III.A. 1. ENTDECKUNG DES LDL-REZEPTORS 9 III.A.2. STRUKTUR DES LDL-REZEPTORS 9 III.A.3. FUNKTION DES LDL-REZEPTORS 12 III.B. FAMILIAERE HYPERCHOLESTERINAEMIE 17 III.B. 1. DIFFERENTIALDIAGNOSE: FAMILIAERER APOLIPOPROTEIN B-100 DEFEKT 19 III.B .2. THERAPIE DER HYPERCHOLESTERINAEMIE 19 III.C. PROBLEMSTELLUNG 24 IV. MATERIAL UND METHODEN 27 IV.A. MATERIAL 27 IV.A.L. BIOCHEMIKA 27 IV.A.2. ANTIKOERPER 28 FV.A.3. INSTRUMENTE UND APPARATUREN 28 IV.A.4. SONSTIGE MATERIALIEN 29 IV.A.5. SOFTWARE 29 IV.B. ISOLIERUNG DES LDL-REZEPTORS AUS DER RINDEMEBENNIERE 30 IV.B.L. PROTEASE-INHIBITOREN 30 IV.B.2. PROTEINBESTIMMUNG 30 IV.B.2. 1. PROTEINBESTIMMUNG NACH LOWRY 30 IV.B.2.2. MODIFIKATION DER LOWRY-METHODE NACH BENSADOUN 3 1 IV.B.3. HERSTELLUNG VON BOVINEN NEBENNIERENRINDEN-HOMOGENATEN 32 IV.B.4. DIFFERENTIALZENTRIFUGATION 33 IV.B.5. SOLUBILISATION DER MEMBRANPROTEINE 34 IV.B.6. DEAE-ANIONENAUSTAUSCHCHROMATOGRAPHIE 36 IV.B.7. SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKKTROPHORESE 37 I. INHALT IV.B.8. PROBENVORBEREITUNG 40 IV.B.9. GELFAERBUNG NACH COOMASSIE 41 IV.B. 10. ELEKTROPHORETISCHER PROTEINTRANSFER: WESTERN BLOT 42 IV.C. LDL-REZEPTOR-NACHWEIS 44 IV.C. 1. IMMUNOCHEMISCHE DETEKTION DES LDL-REZEPTORS 44 IV.C. 1.1. BIOTINYLIERUNG VON IMMUNGLOBULINEN 46 IV.C.2. LDL-LIGANDEN BLOT 47 IV.C.2. 1. PRAEPARATION VON LOW DENSITY LIPOPROTEINEN (LDL) 47 IV.C.2. 1.1. DOPPELDIFIFUSION NACH OUCHTERLONY 49 IV.C.2.2. PRAEPARATION VON LIPOPROTEIN DEFLCIENT SERUM (LPDS) 50 IV.C.2.3. L25 JOD-MARKIERUNG VON LDL UND BESTIMMUNG DER MARKIERUNGSEFTIZIENZ 50 IV.C.2.4. LIGANDEN BLOT MIT RADIOAKTIV MARKIERTEN LOW DENSITY LIPOPROTEINEN 51 IV.C.3. 45 CALCIUM-BLOT 52 IV.D. ZELLKULTUR 53 IV.D. 1. AFONO/AYER-KULTUREN MENSCHLICHER FIBROBLASTEN UND HEP G2-ZELLEN 53 IV.D.2. INKUBATIONSEXPERIMENTE MIT MEDIKAMENTEN 54 IV.D.3. ISOLIERUNG DES LDL-REZEPTORS AUS FIBROBLASTEN UND HEPG2-ZELLEN 55 IV.D.4. KONZENTRATIONSABHAENGIGE, REZEPTOR-VERMITTELTE BINDUNG DER L25 J-LDL AN FIBROBLASTEN-A/ONO/AYER 56 IV.E. ENZYME-LINKED IMMUNOSORBENT ASSAY (ELISA) 58 IV.E. 1. EXKURS: ELISA 58 IV.E.2. VORBEDINGUNGEN DES KOMPETITIVEN-LDL-REZEPTOR-ELISA ' S 61 IV.E.3. KOVALENTES COATING 62 IV.E.4. KOMPETITION UND DETEKTION 66 IV.E. 5. ELISA-AUSWERTUNG 68 V. ERGEBNISSE UND DISKUSSION 70 V.A. ENTWICKLUNG 70 V.A. 1. ISOLIERUNG DES BOVINEN NEBENNIEREN-LDL-REZEPTORS 70 V.A.2. DETEKTION MIT DEM MC7-ANTIKOERPER 71 V.A.2. 1. MINIMIERUNG DER UNSPEZIFITAET 74 V.A.3. LIGANDEN UND 45 CALCIUM-BLOT 77 V.A.4. DER ELISA IN DER EXPERIMENTALPHASE 81 V.A.4. 1. KONVENTIONELLES COATING IN GEGENWART VON OCTYLGLYKOSID 81 4 I. INHALT V.A.4.2. EINFLUSS DES DETERGENZ IM KOMPETITIVEN ELISA 84 V.A.4.3. DETERGENZIEN IM VERGLEICH 87 V.A.5. GLUTARALDEHYD-AKTIVIERTE POLYSTYROLOBERFLAECHE 90 V.A.6. KOVALENTE ANTIGENFIXIERUNG: COVALINK 94 V.A.6.1. FUNKTIONALITAET DES KOVALENT GEBUNDENEN LDL-REZEPTORS: LDL-BINDUNGSASSAY 98 V.A.6.2. KOMPETITIONSEXPERIMENTE 100 V.A.6.3. REPRODUZIERBARKEIT UND SENSITIVITAET 104 V.B. ANWENDUNGEN 108 V.B.L. ISOLIERUNG DES FIBROBLASTEN-LDL-REZEPTORS 108 V.B.2. LDL-REZEPTORINDUKTION DURCH LPDS 109 V.B.3. KONSTRUKTION DER STANDARDKURVE UND ELISA-AUSWERTUNG 111 V.B.4. DER KOMPETITIVE LDL-REZEPTOR-ELISA ALS DIAGNOSTISCHES INSTRUMENT 116 V.B.5. PHARMAKOLOGISCHE BEEINFLUSSUNG DER LDL-REZEPTOREXPRESSION 119 V.B.5. 1. HMG-COA-REDUKTASE-INHIBITOREN: WIRKSAMKEIT UND WIRKUNGSMECHANISMEN 120 V.B. 5.2. LIFIBROL UND HOE 402: LIPIDSENKER DER NEUSTEN GENERATION 121 V.B.5.3. WIRKUNGSSTAERKE-BESTIMMUNG MIT DEM KOMPETITIVEN LDL-REZEPTOR-ELISA 123 V.B.5.4. DOSIS-WIRKUNGS-BEZIEHUNG VON HOE 402 AN FIBROBLASTEN 126 V.B.6. HEP G2-ZELLEN ALS IN VIRRO-MODELL HEPATISCHER STOFFWECHSEL UND REGULATIONSVORGAENGE 129 V.B.6.1. KOMPETITIVER ASSAY MIT SOLUBILISIERTEN HEP G2-LDL-REZEPTOREN 130 V.B.6.2. PHARMAKOLOGISCHE BEEINFLUSSUNG DER HEP G2-LDL-REZEPTOREN 132 V.B. 7. STEROLABHAENGIGE REGULATION DER LDL-REZEPTORGEN-TRANSKRIPTION 135 V.B. 8. POSTTRANSKRIPTIONALE REGULATION DER LDL-REZEPTOREXPRESSION 136 V.B. 8.1. DAS MODELL 3-HYDROXY-3-METHYLGLUTARYL-COENZYM A-REDUKTASE 137 V.B.9. STEROLUNABHAENGIGE TRANSKRIPTION DES LDL-REZEPTORGENS 139 VI. ZUSAMMENFASSUNG 142 VII. LITERATURVERZEICHNIS 145 VIII. ANHANG I UND II 173 5
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