Vergleichende Untersuchung der Regulation der TNFa-Sekretion an frischen Monozyten und kultivierten Makrophagen knochenmarktransplantierter Patienten und ihrer prospektiven Bedeutung für die Entwicklung von Komplikationen nach Knochenmarktransplantation:
Gespeichert in:
| 1. Verfasser: | |
|---|---|
| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
München
Diss.-Verl. NG-Kopierladen
1997
|
| Schlagworte: | |
| Online-Zugang: | Inhaltsverzeichnis |
| Beschreibung: | Zugl.: München, Univ., Med. Fak., Diss., 1997 |
| Beschreibung: | XXVI, 168 S. Ill., graph. Darst. |
| ISBN: | 3928536915 |
Internformat
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INHALTSVERZEICHNIS
INHALTSVERZEICHNIS
I
ABKUERZUNGSVERZEICHNIS
XI
A.
EINLEITUNG
.
1
1.
D
IE
K
NOCHENMARKTRANSPLANTATION
.
1
2.
D
ER
T
UMOR
-N
EKROSE
-F
AKTOR
ALPHA
.
7
3.
D
AS
M
ONOZYTEN
-M
AKROPHAGEN
-S
YSTEM
.
8
4.
F
RAGESTELLUNG
DER
D
ISSERTATION
.
10
B.
MATERIAL
UND
METHODEN
_
12
1.
M
ATERIAL
.
12
1.1.
ZELLKULTURMATERIALIEN
UND
CHEMIKALIEN
.
12
1.1.1.
ZELLKULTURMATERIALIEN
.
12
1.1.1.1.
VERWENDETE
SEREN
.
12
1.1.1.2.
MEDIENBESTANDTEILE
UND
STIMULANTIEN
.
12
1.1.1.2.1.
MEDIENBESTANDTEILE
.
12
1.1.1.2.2.
STIMULANTIEN
.
13
1.1.2.
CHEMIKALIEN
.
13
1.2.
ZELLKULTURMEDIEN
UND
PUFFER
.
14
1.2.1.
ZELLKULTURMEDIEN
.
14
1.2.2.
PUFFER
.
15
1.3.
ANTIKOERPER.
.
16
1.3.1.
ANTIKOERPER
FTIR
DIE
DURCHFLUSSZYTOMETRIE
(FACSCAN):
.
16
1.3.2.
ANTIKOERPER
FUER
DIE
DEPLETION
VON
LYMPHOZYTEN:
.
16
1.3.3.
ANTIKOERPER
FUER
DEN
TNFA-ELISA:
.
17
1.4.
VERBRAUCHSMATERIAL
.
17
1.5.
LABORGERAETE
.
18
2.
M
ETHODEN
.
19
2.1.
PATIENTEN
UND
KONTROLLEN
.
19
2.2.
ISOLIERUNG
VON
ZELLFRAKTIONEN
.
20
2.2.1.
SEPARATION
VON
PBMNC
.
20
SEITE
II
2.2.1.1.
THROMBOZYTENDEPLETION
.
20
2.2.1.2.
FICOLLGRADIENTENZENTRIFUGATION
.
21
2.2.2.
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
IN
ZELLSUSPENSIONCN
.
21
2.2.3.
BESTIMMUNG
DER
LEBENDZELLZAHL
IN
ZELLSUSPENSIONEN
.
21
2.2.4.
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
.
22
2.2.4.1,
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
AUS
DEM
TEFLONBEUTEL
.
22
2.2.4.2
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
UEBER
EINEN
PERCOLLGRADIENTEN
.
22
2.2.4.2.
1.
BESTIMMUNG
DER
GEEIGNETEN
PERCOLLDICHTE
.
23
2.2
.4.2.2.
MAKROPHAGENANREICHERUNG
.
23
2.2.4.3.
BESTIMMUNG
DES
MAKROPHAGENGEHALTS
EINER
ZELLFRAKTION
.
24
2.2.5.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
.
24
2.2.5.1.
DIE
ELUTRIATION
.
24
2.2.5.1.1.
PRINZIP
DER
ELUTRIATION
.
24
2.2.5.1.2.
VERSUCHSABLAUF
.
25
2.2.5.2.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
DURCH
NEGATIVE
SELEKTION
VON
LYMPHOZYTEN.
26
2.2.5.2.1.
DYNABEADS
.
26
2.2.5.2.1.1.
PRIMAERKOPPLUNG
.
26
2.2.5.2.
1.1.1.
PRINZIP
.
26
2.2.5.2.1.1.2.
VERSUCHSABLAUF
.
27
2.2.5.2.1.2.
SEKUNDAERKOPPLUNG
.
27
2.2.5.2.1.2.1,
PRINZIP
.
27
2.2.5.2.1.2.2,
VERSUCHSABLAUF
.
28
2.2.S.2.2.
DIE
MACS-SAEULE
.
28
2.2.5.2.2.1,
PRINZIP
.
28
2.2.5.2.2.2.
VERSUCHSABLAUF.
.
29
2.2.5.3.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
DURCH
PIASTIKADHAERENZ
.
29
2.2.5.3.I.
GEWEBEKULTURFLASCHEN
.
29
2.2.5.3.2.
SCHAELCHENADHAERENZ
.
30
2.2.5.3.2.I.
PETRIPERMSCHAELCHEN
(HYDROPHIL
UND
HYDROPHOB)
.
30
2.2.5.3.2.2.
GREINER-GEWEBEKULTURSCHALEN
.
31
2.2.6.
FACSCAN-ANALYSEN
.
31
2.2.6.1.
FACSCAN-PRINZIP:
.
31
2.2.6.2.
BESTIMMUNG
DES
REINHEITSGRADES
EINER
MONOZYTENFRAKTION
.
32
SEITE
III
2.2.6.3.
ERMITTLUNG
DES
REIFEGRADES
VON
MAKROPHAGEN
.
32
2.3.
KULTIVIERUNG
VON
ZELLEN.
.
33
2.3.1.
DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
.
33
2.3.1.1.
BESTIMMUNG
DER
GEEIGNETEN
AB-SERUMKONZENTRATION
.
33
2.3.1.2.
GENERIERUNG
VON
MAKROPHAGEN
.
33
2.3.2.
4H
-UND
24H-KULTUREN
.
34
2.3.3.
DIE
MONO-MAC
6-ZELLINIE
(MM6)
.
34
2.3.3.1.
ANZUCHT
DER
ZELLEN
.
34
2.3.3.2.
KRYOKONSERVIERUNG
.
35
2.3.3.3.
KULTIVIERUNG
VON
MM6-ZELLEN
IN
TEFLONBEUTELN
.
35
2.4.
STIMULIERUNGSEXPERIMENTE
.
35
2.4.1.
LPS-KINETIKEN
.
35
2.4.1.1.
PBMNC
.
36
2.4.1.2.
PBMNC/MAC
.
36
2.4.I.3.
MM6-ZELLEN
.
36
2.4.I.4.
ANGEREICHERTE
MONOZYTEN
.
37
2.4.1.5.
ANGEREICHERTE
MAKROPHAGEN
.
37
2.4.2.
MAFOSFAMID
.
37
2.4.2.1.
DOSISFINDUNG
.
37
2.4.2.2.
KOSTIMULATION
MIT
LPS
.
38
2.4.3.
BESTRAHLUNG
.
38
2.4.3.1.
DOSISFINDUNG
.
38
2.4.3.2.
KOSTIMULATION
MIT
LPS
.
38
2.4.4.
KULTUREN
MIT
DEM
MONOKLONALEN
ANTITNFA-ANTIKOERPER
MAK
195F
.
39
2.4.5.
INDOMETACIN
.
40
2.4.6.
PHA
.
40
2.4.7.
IFNY
.
41
2.5.
TNFA-NACHWEIS
IM
SERUM
UND
IN
KULTURUEBERSTAENDEN
.
41
2.5.1.
PROBENGEWINNUNG
UND
LAGERUNG
.
41
2.5.2.
ELISA-PRINZIP
.
42
2.5.3.
ELISA-DURCHFIIHRUNG
.
43
2.6.
BESTIMMUNG
VON
ILIO
IN
KULTURUEBERSTAENDEN
.
44
2.7.
STATISTISCHE
AUSWERTUNGEN
.
44
SEITE
IV
C.
ERGEBNISSE.
.
45
1.
O
PTIMIERUNG
DER
M
ETHODEN
.
45
1.1.
IN
VITRO-DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
.
45
1.1.1.
BESTIMMUNG
DER
GEEIGNETEN
AB-SERUMKONZENTRATION
FUER
DIE
DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
.
45
1.1.2.
GENERIERUNG
VON
MAKROPHAGEN
.
46
1.2.
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
.
48
1.2.1.
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
AUS
DEM
TEFLONBEUTEL
.
48
1.2.1.1.
NORMALPERSONEN
.
48
1.2.1.1.1.
ZELLAUSBEUTE
.
48
1.2.1.1.2.
MAKROPHAGENANREICHENING
.
50
1.2.1.1.3.
FACSCAN-ANALYSEN
.
51
1.2.1.1.3.1.
ANTIMAX-1-KONZENTRATIONSKINETIK
.
51
1.2.1.1.3.2.
ERMITTLUNG
DER
ANZAHL
MAX
1
-POSITIVER
MAKROPHAGEN
.
52
1.2.1.1.3.3.
VERGLEICH
DER
ANZAHL
CD14-POSITIVER
MAKROPHAGEN
MIT
DER
ANZAHL
MAX
1
-POSITIVER
MAKROPHAGEN
.
53
1.2.1.2.
PATIENTEN
.
53
1.2.1.2.1.
ZELLAUSBEUTE
.
53
1.2.1.2.2.
MAKROPHAGENANREICHERUNG
.
54
1.2.1.2.3.
FACSCAN-ANALYSE:
ERMITTLUNG
DER
ANZAHL
MAX
1
-POSITIVER
MAKROPHAGEN
.
56
1.2.2.
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
UEBER
EINEN
PERCOLLGRADIENTEN
.
56
1.2.2.1.
BESTIMMUNG
DER
GEEIGNETEN
PERCOLLDICHTE
.
56
1.2.2.2.
NORMALPERSONEN
.
59
1.2.2.2.1.
ZELLAUSBEUTE
.
59
I.2.2.2.2.
MAKROPHAGENANREICHENING
.
60
1.2.2.3.
PATIENTEN
.
61
1.2.2.3.1.
ZELLAUSBEUTE
.
61
I.2.2.3.2.
MAKROPHAGENANREICHENING
.
62
1.3.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
.
63
1.3.1.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
DURCH
DIE
ELUTRIATION
.
63
1.3.1.1.
ZELLAUSBEUTE
.
63
1.3.1.2.
MONOZYTENANREICHERUNG
.
64
SEITE
V
1.3.2.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
DURCH
NEGATIVE
SELEKTION
VON
LYMPHOZYTEN
.
65
1.3.2.1.
DYNABEADS
(PRIMAERKOPPLUNG)
.
65
1.3.2.1.1.
ZELLAUSBEUTE
UND
MONOZYTENANREICHERUNG
BEI
NORMALPERSONEN
.
65
1.3.2.1.2.
ZELLAUSBEUTE
UND
MONOZYTENANREICHERUNG
BEI
PATIENTEN
.
66
1.3.2.2.
VERGLEICH:
DYNABEADS-PRIMAERKOPPLUNG,
DYNABEADS-SEKUNDAERKOPPLUNG
MIT
EINER
MACS-SAEULE
.
67
1.3.3.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
UEBER
PLASTIKADHAERENZ
.
68
1.3.3.1.
GEWEBEKULTURFLASCHEN
.
68
I.3.3.2.
SCHAELCHENADHAERENZ
.
69
1.3.3.2.1.
PETIPERMSCHAELCHEN
.
69
1.3.3.2.1.1.
VERGLEICH:
HYDROPHILE
UND
HYDROPHOBE
PETRIPERMSCHAELCHEN
.
69
I.3.3.2.
1.2.
NORMALPERSONEN
.
70
1.3.3.2.1.3.
PATIENTEN
.
70
1.3.3.2.2.
GREINER-GEWEBEKULTURPLATTEN
.
71
I.3.3.2.2.
1.
NORMALPERSONEN
.
71
1.3.3.2.2.1.1.
ADHAERENZ
IN
ABWESENHEIT
VON
SERUM
.
71
1.3.3.2.2.1
.2.
ZELLAUSBEUTE
UND
MONOZYTENANREICHERUNG
.
73
I.3.3.2.2.2.
PATIENTEN
.
74
I.3.3.2.2.2.I.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
74
133.2.2.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
75
I.3.3.2.3.
DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
IN
ZELLFFAKTIONEN
MIT
HOHEM
MONOZYTENGEHALT
.
75
I.3.3.2.3.I.
NORMALPERSONEN
.
76
1.3.3.2
3.1.1.
ZELLAUSBEUTE
.
76
1.3.3.2.3.1.2.
MAKROPHAGENAUSBEUTE
.
76
I.3.3.2.3.2.
PATIENTEN
.
77
1.3.3.2.3.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
77
I.3.3.2.3.2.
1.1.
ZELLAUSBEUTE
.
77
I.3.3.2.3.2.I.2.
MAKROPHAGENAUSBEUTE
.
78
133.23.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
79
1.3.3.2.3.2.2.1,
ZELLAUSBEUTE
.
79
I.3.3.2.3.
2.2.2.
MAKROPHAGENAUSBEUTE
.
79
1.4.
DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
IN
MONONUKLEAEREN
ZELLFRAKTIONEN.
80
SEITE
VI
1.4.1.
NORMALPERSONEN
.
80
1.4.1.
1
.
ZELLAUSBEUTE
UND
MAKROPHAGENAUSBEUTE
.
80
1.4.1.2.
FACSCAN-ANALYSEN
.
81
1.4.1.2.1.
VERGLEICH
DER
LICHTMIKROSKOPISCH
ERFASSTEN
ANZAHL
MIT
DER
ANZAHL
AN
MAX-1
POSITIVEN
MAKROPHAGEN
.
81
1.4.1.2.2.
VERGLEICH
DER
CD14-POSITIVEN
ZELLEN
IN
DER
PBMNC-FRAKTION
VOR
TEFLONBEUTEL
MIT
DER
ANZAHL
CD14-POSITIVER
ZELLEN
IN
DER
PBMNC/
MAC-FRAKTION
NACH
TEFLONBEUTELKULTUR
.
81
1.4.2.
PATIENTEN
.
82
1.4.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
82
1.4.2.1.1.
ZELLAUSBEUTE
.
82
1.4.2.1.2.
FACSCAN-ANALYSEN
.
83
1.4.2.1.2.
1
.
VERGLEICH
DER
LICHTMIKROSKOPISCH
ERFASSTEN
ANZAHL
MIT
DER
ANZAHL
MAX-1-POSITIVER
MAKROPHAGEN
.
83
1.4.2.1.2.2.
VERGLEICH
DER
CD14-POSITIVEN
ZELLEN
IN
DER
PBMNC-FRAKTION
VOR
TEFLONBEUTEL
MIT
DER
ANZAHL
CD14-POSITIVER
ZELLEN
IN
DER
PBMNC/MAC-FRAKTION
NACH
TEFLONBEUTELKULTUR
.
84
1.4.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
85
I.4.2.2.I.
ZELLAUSBEUTE
.
85
I.4.2.2.2.
VERGLEICH
DER
LICHTMIKROSKOPISCH
ERFASSTEN
ANZAHL
MIT
DER
ANZAHL
AN
MAX
1
-POSITIVEN
MAKROPHAGEN
.
86
2.
S
TIMULATIONSEXPERIMENIE
.
87
2.1.
LPS-KINETIKEN
.
87
2.1.1.
PBMNC
.
87
2.1.1.1.
ERMITTLUNG
DER
ZUR
STIMULATION
GEEIGNETEN
LPS-KONZENTRATION
.
87
2.1.1.2.
BESTIMMUNG
DES
ZEITPUNKTS
DER
MAXIMALEN
TNFA-SEKRETION
BEI
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
89
2.1.2.
BESTIMMUNG
DER
GEEIGNETEN
LPS-KONZENTRATION
UND
DES
ZEITPUNKTS
DER
MAXIMALEN
TNFA-SEKRETION
IN
PBMNC/MAC
VON
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
90
2.1.3.
MM6-ZELLEN
.
91
2.1.3.1.
ERMITTLUNG
DER
ZUR
STIMULATION
GEEIGNETEN
LPS-KONZENTRATION
UND
DES
ZEITPUNKTS
DER
MAXIMALEN
TNFA-SEKRETION
.
91
SEITE
VII
2.1.3.2.
ERMITTLUNG
DER
ZUR
STIMULATION
GEEIGNETEN
LPS-KONZENTRATION
UND
DES
ZEITPUNKTS
DER
MAXIMALEN
TNFA-SEKRETION
NACH
TEFLONBEUTELKULTUR
.
92
2.1.4.
ANGEREICHERTE
MONOZYTEN
.
93
2.1.4.1.
ERMITTLUNG
DER
ZUR
STIMULATION
GEEIGNETEN
LPS-KONZENTRATION
.
93
2.1.4.2.
BESTIMMUNG
DES
ZEITPUNKTS
DER
MAXIMALEN
TNFA-SEKRETION
BEI
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
94
2.1.5.
ANGEREICHERTE
MAKROPHAGEN
.
95
2.1.5.1.
ERMITTLUNG
DER
ZUR
STIMULATION
GEEIGNETEN
LPS-KONZENTRATION
.
95
2.1.5.2.
BESTIMMUNG
DER
ZEITPUNKTS
DER
MAXIMALEN
TNFA-SEKRETION
BEI
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
96
2.2.
MAFOSFAMID-DOSISFTNDUNG
BEI
PBMNC
UND
PBMNC/MAC
VON
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN.
.
97
2.3.
BESTRAHLUNG
.
98
2.3.1.
DOSISFINDUNG
BEI
PBMNC
UND
PBMNC/MAC
VON
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
98
2.3.2.
DOSISFINDUNG
BEI
ANGEREICHERTEN
MONOZYTEN
BZW.
MAKROPHAGENFRAKTIONEN
VON
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
100
3.
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
TNFA-REGULATION
.
102
3.1.
LPS
.
102
3.1.1.
REGULATION
IN
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
VON
NORMALPERSONEN
.
102
3.1.2.
REGULATION
IN
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
VON
PATIENTEN
.
104
3.1.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
104
3.1.2.1.1.
PBMNC
UND
PBMNC/MAC
.
104
3.1.2.1.2.
ANGEREICHERTE
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
.
106
3.1.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
108
3.I.2.2.I.
PBMNC
UND
PBMNC/MAC
.
108
3.1.2.2.2.
ANGEREICHERTE
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
.
109
3.1.3.
VERGLEICH
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
109
3.2.
MODULATION
DER
LPS-ANTWORT
DURCH
DEN
MONOKLONALEN
ANTI-HUMAN-TNFA
ANTIKOERPER
MAK
195F
.
110
3.3.
TNFA-REGULATION
DURCH
PROSTAGLANDINE
.
112
3.3.1.
NORMALPERSONEN
.
112
3.3.2.
PATIENTEN
.
113
SEITE
VIII
3.3.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
113
3.3.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
115
3.3.3.
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
IM
VERGLEICH
.
115
3.3.4.
KOSTIMULATORISCHE
EXPERIMENTE
MIT
LPS
.
1
16
3.3.4.1.
NORMALPERSONEN
.
116
3.3.4.2.
PATIENTEN
.
117
3.3.4.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
117
3.3.4.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
119
3.3.4.3.
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
IM
VERGLEICH
.
119
3.4.
T-ZELLABHAENGIGE
MAKROPHAGENAKTIVIERUNG
.120
3.4.1.
PHA
.
120
3.4.2.
IFNY
.
121
3.4.2.I.
NORMALPERSONEN
.
121
3.4.2.2.
PATIENTEN
.
122
3.4.2.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
122
3.4.2.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
124
3.4.2.3.
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
IM
VERGLEICH
.
125
3.4.2.4.
KOSTIMULATORISCHE
EXPERIMENTE
MIT
LPS
.
126
3.4.2.4.1.
NORMALPERSONEN
.
126
3.4.2.4.2.
PATIENTEN
.
127
3.4.2.4.2.I.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
127
3.4.2.4.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
129
3.4.2.4.3.
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
IM
VERGLEICH
.
130
3.5.
EINFLUSS
DER
IM
RAHMEN
DER
KONDITIONIERUNG
EINGESETZTEN
ZYTOTOXISCHEN
PRINZIPIEN
AUF
DIE
ZELLULAERE
TNFA-PRODUKTION
.
131
3.5.1.
BESTRAHLUNG
.
131
3.5.1.1.
NORMALPERSONEN
.
131
3.5.1.2.
PATIENTEN
.
132
3.5.1.2.1.
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG
.
132
3.5.1.2.2.
PATIENTEN
NACH
ANWACHSEN
DES
SPENDERKNOCHENMARKS
.
133
3.5.1.3.
KOSTIMULATORISCHE
EXPERIMENTE
MIT
LPS
.
134
3.5.2.
ENDOXAN
(MAFOSFAMID)
.
135
3.5.2.1.
NORMALPERSONEN
.
135
SEITE
DI
3.5.2.2.
PATIENTEN
.
136
3.5.2.3.
VERGLEICH
NORMALPERSONEN
UND
PATIENTEN
.
136
3.5.2.4.
KOSTIMULATORISCHE
EXPERIMENTE
MIT
LPS
.
137
3.6.
VERGLEICH
DER
STIMULIERTEN
TNFA
UNDILIO-PRODUKTION
IN
PBMNC/MAC
KULTUREN
VON
PATIENTEN
VOR
KONDITIONIERUNG.
.138
4.
P
ROGNOSTISCHE
P
ARAMETER
.
139
4.1.
KORRELATION
DER
STIMULIERTEN
TNFA-SEKRETION
MIT
DEM
AUFTRETEN
VON
KOMPLIKATIONEN
NACH
KMT.
.139
4.2.
ZUSAMMENHANG
ZWISCHEN
DER
ILIO
UND
TNFA-SEKRETION
IN
PBMNC/MAC
FRAKTIONEN
UND
DEM
AUFTRETEN
VON
KOMPLIKATIONEN
NACH
KMT.
.
140
4.3.
CML
IN
CHRONISCHER
UND
IN
AKZELERIERTER
PHASE:
VERGLEICH
DER
LPS-INDUZIERTEN
TNFA-SEKRETION
.
141
4.4.
EINFLUSS
DER
CHEMOTHERAPEUTISCHEN
BEHANDLUNG
IN
DEN
LETZTEN
8
WOCHEN
VOR
KONDITIONIERUNG
AUF
DIE
LPS-INDUZIERTE
TNFA-SEKRETION
VON
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
.
143
D.
DISKUSSION
_
145
1.
O
PTIMIERUNG
DER
M
ETHODEN
.
145
1.1.
IN
VITRO-DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
.
145
1.2.
ANREICHERUNG
VON
MAKROPHAGEN
.
147
1.3.
ANREICHERUNG
VON
MONOZYTEN
.
149
1.4.
DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
IN
FRAKTIONEN
MIT
HOHEM
MONOZYTENGEHALT.
.
152
1.5.
DIFFERENZIERUNG
VON
MONOZYTEN
ZU
MAKROPHAGEN
IN
MONONUKLEAEREN
ZELLFRAKTIONEN.
153
1.6.
NACHWEIS
DES
MAKROPHAGENREIFEMARKERS
MAX-1
IN
MONONUKLEAEREN
ZELLFRAKTIONEN
.
154
1.7.
VERGLEICH
VON
CDI4-POSITIVEN
MAKROPHAGEN
MIT
DER
ANZAHL
AN
MAX-1-POSITIVEN
MAKROPHAGEN
.156
2.
U
NTERSUCHUNGEN
ZUR
TNF-R
EGULATION
.
156
2.1.
STIMULATION
VON
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
MIT
LPS
.156
2.2.
EINFLUSS
DER
PROSTAGLANDINE
AUF
DIE
TNFA-SEKRETION
VON
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
.
158
2.3.
STIMULATION
VON
MONONUKLEAEREN
ZELLFRAKTIONEN
MIT
PHA
.
159
SEITE
X
2.4.
STIMULATION
DER
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
MIT
IFNY
.160
2.5.
KOSTIMULATORISCHE
EXPERIMENTE
MIT
IFNYUNDLPS.
.
161
2.6.
EINFLUSS
DER
BESTRAHLUNG
AUF
DIE
TNFA-SEKRETION
.
161
2.7.
DIE
TNFA-SEKRETION
IN
VERBINDUNG
MIT
MAFOSFAMID.
.
162
3.
P
ROGNOSTISCHE
P
ARAMETER
.
162
3.1.
KORRELATION
DER
LPS-STIMULIERTEN
TNFA-UNDILIO-SEKRETION
MIT
DEM
AUFTRETEN
VON
KOMPLIKATIONEN
NACH
KMT.
.162
3.2.
VERGLEICH
DER
STIMULIERBARKEIT
VON
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
BEI
CML
IN
CHRONISCHER
UND
AKZELERIERTER
PHASE
.
163
3.3.
EINFLUSS
CHEMOTHERAPEUTISCHER
BEHANDLUNGEN
VOR
KONDITIONIERUNG
AUF
DIE
STIMULIERBARKEIT
VON
MONOZYTEN
UND
MAKROPHAGEN
DER
PATIENTEN.
.
164
4.
SCHLUSSFOLGERUNGEN
UND
AUSBLICK
.
164
E.
ZUSAMMENFASSUNG
.
166
LITERATURVERZEICHNIS
XIII |
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