Molekulare Untersuchungen zur Interaktion von Gerste und Gerstenmehltau Hordeum vulgare L./Erysiphe graminis f.sp. hordei: vergleichende Analyse der durch biotische und abiotische Induktoren erworbenen Resistenz mit der Mlg-vermittelten Resistenz
Gespeichert in:
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Format: | Abschlussarbeit Buch |
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
1
1.1
DIE
WIRTSCHAFTLICHE
ROLLE
DER
GERSTE
1
1.2
DIE
WIRT/PARASIT-INTERAKTION
GERSTE/GERSTENMEHLTAU
1
13
DER
BEGRIFF
DER
RESISTENZ
2
1.4
WIRT/PARASIT-ERKENNUNG
3
1.5
DER
INTEGRIERTE
PFLANZENSCHUTZ
3
1.6
CHEMISCHE
RESISTENZINDUKTOREN
5
1.7
THEORETISCHE
GRUNDLAGEN
DER
SYSTEMISCH
ERWORBENEN
RESISTENZ
(SAR)
8
1.8
DAS
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
10
1.9
SIGNALTRANSLOKATION
IN
GERSTE
10
1.10
PR-PROTEINE
11
1.11
PROBLEMSTELLUNG
14
2
MATERIAL
UND
METHODEN
15
2.1
PFLANZEN
UND
PATHOGENMATERIAL
15
2.1.1
GERSTENKULTIVARE
15
2.1.2
ANZUCHTBEDINGUNGEN
DER
GERSTENPFLANZEN
16
2.1.3
PATHOGENMATERIAL
16
2.1.4
INOKULATIONSMETHODIK
17
2.2
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
17
2.3
RESISTENZINDUKTION
IN
SUSZEPTIBLEN
GERSTENKULTIVAREN
19
2.3.1
VORINOKULATION
MIT
EINEM
PILZLICHEN
APATHOGEN
19
2.3.2
VORINOKULATION
MIT
BAKTERIELLEN
APATHOGENEN
20
2.3.3
VORINOKULATION
MIT
EINER
AVIRULENTEN
MEHLTAURASSE
(INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM)
22
2.3.4
APPLIKATION
CHEMISCHER
RESISTENZINDUKTOREN
23
2.4
HISTOLOGISCHE
METHODEN
26
2.4.1
ENTFAERBUNG
DES
BLATTMATERIALS
26
2.4.2
FAERBUNG
VON
PILZLICHEM
GEWEBE
MIT
COOMASSIE
26
2.4.3
MIKROSKOPIE
UND
FOTOGRAFIE
27
2.4.4
MIKROSKOPISCHE
AUSWERTUNG
27
2.5
BIOCHEMISCHE
METHODEN
28
2.5.1
HERSTELLUNG
VON
BLATTEXTRAKTEN
28
2.5.2
PROTEINBESTIMMUNG
29
2.5.3
SDS-POLYACRYLAMIDGELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
30
2.5.4
ELEKTROBLOT
31
2.5.5
DOT-BLOT
32
2.5.6
IMMUNODETEKTION
33
2.6
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
35
2.6.1
PLASMIDPROBEN
35
2.6.2
HERSTELLUNG
KOMPETENTER
ZELLEN
38
2.6.3
TRANSFORMATION
39
2.6.4
MINIPREP
40
2.6.5
MAXIPREP
41
2.6.6
VERDAU
DER
PLASMIDPROBEN
MIT
RESTRIKTIONSENZYMEN
44
2.6.7
AGAROSEGELELEKTROPHORESE
45
2.6.8
DIG-MARKIENMGSREAKTION
46
2.6.9
RNASE
FREIES
ARBEITEN
48
2.6.10
RNA-EXTRAKTION
49
2.6.11
PHOTOMETRISCHE
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
50
2.6.12
FORMALDEHYD-AGAROSEGELELEKTROPHORESE
50
2
6
13
NORTHEMBLOT
51
2.6.14
HYBRIDISIERUNG
53
2.6
15
CHEMILUMINESZENZ-NACHWEIS
54
2.6.16
ROENTGENFILMENTWICKLUNG
55
2.7
CHEMIKALIEN 56
3
ERGEBNISSE
57
3.1
SONDENHERSTELLUNG
57
3.1.1
HERSTELLUNG
DIG-MARKIERTER
RNA-SONDEN
57
3.1.2
HERSTELLUNG
DIG-MARKIERTER
DNA-SONDEN
58
3.2
NORTHERN
ANALYSEN
59
3.2.1
RNA-ISOLATION
59
3.2.2
RNA-BLOTTING
60
3.2.3
RNA/RNA-HYBRIDISIERUNG 60
3.2.4
GROESSENBESTIMMUNG
DER
ZU
DEN
SONDEN
HOMOLOGEN
GENE
IM
GERSTENGENOM
61
3.2.5
DNA/RNA-HYBRIDISIERUNG
63
3.3
MAKROSKOPISCHE
AUSWERTUNG
DER
RESISTENZINDUKTION
DURCH
APATHOGENE
63
3.3.1
VORINOKULATION
MIT
EINEM
PILZLICHEN
APATHOGEN
63
3.3.2
VORINOKULATION
MIT
BAKTERIELLEN
APATHOGENEN
64
3.4
EXPRESSION
VON
PR-GENEN
NACH
BEHANDLUNG
MIT
INDUKTOREN
(NORTHERN
ANALYSE)
68
3.4.1
DER
RESISTENZINDUKTOR
2.6-DICHLORISONICOTINSAEURE
(DC-INA)
68
3.4,1.1
PPOX381
NACH
DC-INA
BODENBEHANDLUNG
68
3.4.1.2
PR-LB
NACH
DC-INA
BODENBEHANDLUNG
69
3.4.1.3
PRHV-1
NACH
DC-INA
BODENBEHANDLUNG
70
3.4.2
DER
RESISTENZINDUKTOR
3.5-DICHLORSALICYLSAEURE
(DC-SA)
70
3.4.2.1
PR-LB
NACH
DC-SA
BODENBEHANDLUNG
72
3.4.2.2
PRHV-1
NACH
DC-SA
BODENBEHANDLUNG
72
3.4.3
DER
RESISTENZINDUKTOR
BENZOTHIADIAZOL
(BTH)
73
3.4.3.1
PR-LB
NACH
BTH
BODENBEHANDLUNG
73
3.4.3.2
PRHV-1
NACH
BTH
BODENBEHANDLUNG
74
3.5
KINETIK
DER
PR-GENEXPRESSION
IN
DER
GERSTE/GERSTENMEHLTAU-INTERAKTION
(NORTHERN
ANALYSE)
75
3.5.1
SPEZIFISCHE
MRNA-AKKUMULATION
IN
DER
KOMPATIBLEN
INTERAKTION
75
3
5
2
SPEZIFISCHE
MRNA-AKKUMULATION
IN
DER
INKOMPATIBLEN
INTERAKTION
76
3.6
DAS
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
77
3
6.1
MAKROSKOPISCHE
UNTERSUCHUNG
DES
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEMS
78
3.6.2
CYTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
DES
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEMS
80
3.6.3
NORTHERN
ANALYSE
DES
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEMS
86
3.6.3.1
AKKUMULATION
VON
MRNAMIT
HOMOLOGIE
ZUR
SONDE
PPOX381
86
3.6.3.2
AKKUMULATION
VON
MRNA
MIT
HOMOLOGIE
ZUR
SONDE
PR-LB
87
3.6.3.3
AKKUMULATION
VON
MRNA
MIT
HOMOLOGIE
ZUR
SONDE
C
3
1.6
88
3.6.3.4
AKKUMULATION
VON
MRNA
MIT
HOMOLOGIE
ZUR
SONDE
PPRM3
88
3.6.3.5
AKKUMULATION
VON
MRNA
MIT
HOMOLOGIE
ZUR
SONDE
PRHV-1
89
3.6.4
WESTERN
ANALYSE
DES
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEMS
100
3.6.4.1
CHITINASE
KLASSE
II-PROTEINAKKUMULATION
100
3.6.4.2
PR-LA-PROTEINAKKUMULATION
103
3.6.4.3
AKKUMULATION
EINES
THAUMATIN-AEHNLICHEN
PROTEINS
105
4
DISKUSSION
108
4.1
DIE
M/G-VERMITTELTE
RESISTENZ
IN
DER
GERSTE/GERSTENMEHLTAU-INTERAKTION
108
4.1.1
CYTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
A/ZG-VERMITTELTEN
RESISTENZ
108
4.1.2
VERGLEICHENDE
ANALYSE
DER
PR-GENEXPRESSION
IN
AFZG-RESISTENTEN
UND
SUSZEPTIBLEN
GERSTENPFLANZEN
NACH
INFEKTION
MIT
E
G
H
109
4.1.3
DIE
RELEVANZ
DER
PR-GENE
PRHV
1
UND
CHITINASE
KLASSE
L/II
FUER
DIE
GERSTE/GERSTENMEHLTAU-
INTERAKTION
110
N
4.1.4
VERGLEICH
DER
PR-GENEXPRESSION
IN
MA-RESISTENTEN
GERSTENPFLANZEN
111
4.1.5
VERGLEICH
DER
PR-GENEXPRESSION
IN
WIRT/PARASIT-INTERAKTIONEN
DIKOTYLER
PFLANZEN
112
4.2
RESISTENZINDUKTION
DURCH
ABIOTISCHE
INDUKTOREN
112
4.2.1
DER
RESISTENZINDUKTOR
DC-INA
113
4.2.1.1
CYTOLOGISCHE
ANALYSE
DER
DC-INA
VERMITTELTEN
RESISTENZ
113
4.2.1.2
DIE
PR-GENEXPRESSION
NACH
DC-INA
BEHANDLUNG
114
4.2.2
DER
RESISTENZINDUKTOR
DC-SA
115
4.2.2.1
DIE
RESISTENZINDUZIERENDE
WIRKUNG
DER
DC-SA
115
4.2.2.2
CYTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
DC-SA
BEHANDELTER
GERSTENPFLANZEN
116
4.2.2.3
DIE
PR-GENEXPRESSION
NACH
DC-SA
BEHANDLUNG
116
4.2.2.4
DIE
ROLLE
DER
SALICYLSAEURE
IN
DER
SIGNALTRANSDUKTION
117
4.2.3
DER
RESISTENZINDUKTOR
BTH
117
4.2
3.1
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
WEIZEN/WEIZENMEHLTAU-INTERAKTION
NACH
BTH-BEHANDLUNG
117
4.2.3.2
UNTERSUCHUNGEN
ZUR
GERSTE/GERSTENMEHLTAU-INTERAKTION
NACH
BTH-BEHANDLUNG
118
4.2.4
VERGLEICHENDE
GEGENUEBERSTELLUNG
DER
WIRKUNGSWEISE
VON
RESISTENZINDUKTOREN
119
4.3
RESISTENZINDUKTION
DURCH
BIOTISCHE
INDUKTOREN
119
4.4
DAS
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
120
4.4.1
DIE
RESISTENZINDUKTION
IM
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
121
4.4.2
CYTOLOGISCHE
ANALYSE
DES
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEMS
122
4.4
2
1
CYTOLOGISCHE
UNTERSUCHUNG
DER
INDUCERINOKULATION
122
4.4.2.2
ZELLTYPSPEZIFISCHE
AUSWERTUNG
DER
SAR
NACH
CHALLENGERINFEKTION
123
4
4.3
DIE
RELEVANZ
VON
PR-GENEN
IM
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
124
4.4.3.1
DIE
PR-GENEXPRESSION
NACH
DER
INDUCERINOKULATION
124
4.4.3.2
DIE
PR-GENEXPRESSION
NACH
DER
CHALLENGERINFEKTION
125
4.4.3
3
DIE
PR-GENEXPRESSION
IN
RESISTENZINDUZIERTEN
PFLANZEN
125
4.4.3.4
DIE
BEDEUTUNG
DER
PEROXIDASEGENEXPRESSION
IM
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
126
4.4.3.5
DIE
BEDEUTUNG
DER
PR-LB-GENEXPRESSION
IM
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
127
4.4.3.6
DIE
BEDEUTUNG
DER
PRHV-1-GENEXPRESSION
IM
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
128
4.4.4
NACHWEIS
EINER
PR-PROTEINAKKUMULATION
IM
INDUCER/CHALLENGER-SYSTEM
128
4.4.4.1
CHITINASE
KLASSE
II
129
4.4.4.2
PR-LA-PROTEIN
129
4.4.4
3
THAUMATIN-AEHNLICHES
PROTEIN
129
4.5
PR-PROTEINE
IN
MONOKOTYLEN
PFLANZEN
130
4.6
VERGLEICH
DER
RASSENSPEZIFISCHEN
AF/G-RESISTENZ
UND
DER
SAR
131
4.7
VERGLEICH
EINER
DURCH
BIOTISCHE
UND
ABIOTISCHE
INDUKTOREN
INDUZIERTEN
SAR
132
4.8
MOEGLICHE
KOMPONENTEN
DER
AKTIVEN
PATHOGENABWEHR
IN
GERSTE
133
4.9
SIGNALTRANSDUKTION
135
4.10
DIE
BEDEUTUNG
DER
MOLEKULAREN
ANALYSE
DER
SAR
FUER
DEN
PFLANZENSCHUTZ
138
5
ZUSAMMENFASSUNG
140
6
LITERATUR
142
M |
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