Genetische Aspekte der humoralen Autoimmunantwort gegen die zellulären Ro-SSA- und La-SSB-Antigene:
Gespeichert in:
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| Format: | Buch |
| Sprache: | German |
| Veröffentlicht: |
1997
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| Beschreibung: | München, Univ., Med. Fak., Diss., 1997 |
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INHALTSVEREICHNIS
I
INHALTSVERZEICHNIS
VERZEICHNIS
DER
ABKUERZUNGEN
1
EINLEITUNG
.
.1
1.1
IMMUNPATHOLOGIE
BEI
AUTOIMMUNERKRANKUNGEN
.
1
1.2
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIKOERPER
.
3
1.3
HUMANE
LEUKOZYTENANTIGENE
UND
AUTOANTIKOERPERBILDUNG
.
6
1.4
TUMORNEKROSEFAKTORGENE
.
.7
1.5
ZIELSETZUNG
DER
ARBEIT
.
11
2
KRANKHEITSKLASSIFIKATIONEN
UND
PATIENTEN
.
12
2.1
KRANKHEITSKLASSIFIKATIONEN
.
12
2.1.1
SYSTEMISCHER
LUPUS
ERYTHEMATODES
(SLE)
.
12
2.1.2
SUBAKUTER
KUTANER
LUPUS
ERYTHEMATODES
(SCLE)
.
13
2.1.3
CHRONISCH-DISKOIDER
LUPUS
ERYTHEMATODES
(CDLE)
.
14
2.1.4
LUPUS
ERYTHEMATODES
TUMIDUS
(LET)
.
14
2.1.5
SJOEGREN
SYNDROM
.
15
2.2
BEFUNDERHEBUNG
UND
DIAGNOSESTELLUNG
.
16
2.3
KLINISCHE
CHARAKTERISIERUNG
DER
PATIENTEN
.
16
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
18
3.1
MATERIALIEN
.
18
3.1.1
REAGENZIEN
UND
GERAETE
.
18
3.1.2
PUFFER
UND
STANDARDLOESUNGEN
.
20
3.1.3
ENZYME
UND
OLIGONUKLEOTIDE
.
22
3.2
PROTEINBIOCHEMISCHE
METHODEN
.
23
3.2.1
ANTIGENGEWINNUNG
.
23
3.2.1.1
KULTUR
VON
M0LT4-ZELLEN
.
23
3.2.1.2
GEWINNUNG
DES
ZYTOPLASMATISCHEN
M0LT4-ZELLEXTRAKTES
.
23
3.2.1.3
BESTIMMUNG
DES
PROTEINGEHALTS
DER
ZELLEXTRAKTE
NACH
BRADFORD
.
24
3.2.2
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
(SDS-PAGE)
VON
PROTEINEN.
.24
3.2.3
MOLEKULARE
CHARAKTERISIERUNG
VON
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTI
KOERPERN
IM
IMMUNOBLOT
(WESTERNBLOT)
.
25
3.2.3.1
SEMI-DRY-BLOT
.
25
II
INHALTSVERZEICHNIS
3.2.3.2
DETEKTION
DER
ANTIGEN-ANTIKOERPER-KOMPLEXE
MIT
DEM
HORSERADISH-PEROXIDASE
(HRP)-SYSTEM
.
26
3.2.4
NACHWEIS
VON
ANTIKOERPERN
GEGEN
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIGEN
MIT
DER
IMMUNDOPPELDIFFUSION
(SCREENING)
.
28
3.2.5
BESTIMMUNG
VON
ANTIKOERPERN
GEGEN
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIGEN
MIT
EINEM
ENZYMIMMUNOASSAY
(ELISA)
.
28
3.3
MOLEKULARBIOLOGISCHE
METHODEN
.
30
3.3.1
EXTRAKTION
GENOMISCHER
DNS
AUS
EUKARYONTISCHEN
ZELLEN
.
30
3.3.2
EXTRAKTION
GENOMISCHER
DNS
AUS
PARAFFINSCHNITTEN
.
30
3.3.3
KONZENTRATIONSBESTIMMUNG
VON
NUKLEINSAEUREN
.
31
3.3.4
ENZYMATISCHE
AMPLIFIKATION
SPEZIFISCHER
DNS-ABSCHNITTE
.
31
3.3.5
ENZYMATISCHE
SPALTUNG
DER
PCR-AMPLIFIKATE
DURCH
RESTRIKTIONSENDONUKLEASEN
.
33
3.3.6
GELELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
DSDNS-FRAGMENTEN
IN
AGAROSEGELEN
.
33
3.3.7
GELELEKTROPHORETISCHE
AUFTRENNUNG
VON
SSDNS-FRAGMENTEN
MIT
DER
EINZELSTRANGKONFORMATIONSPOLYMORPHISMUS
(SSCP)-ANALYSE.
34
3.4
STATISTISCHE
METHODEN
.
35
4
ERGEBNISSE
.
36
4.1
OPTIMIERUNG
DER
SDS-POLYACRYLAMID-GELELEKTROPHORESE
.
36
4.2
OPTIMIERUNG
DER
IMMUNOBLOTTECHNIK
.
36
4.3
CHARAKTERISIERUNG
VON
ANTIKOERPERSPEZIFITAETEN
GEGEN
60
KD,
52
KD
RO/SSA
UND
48
KD
LA/SSB-ANTIGENE
.
38
4.3.1
ERGEBNISSE
AUS
IMMUNDIFFUSION
UND
IMMUNOBLOT
.
38
4.3.2
ERGEBNISSE
DES
ENZYMIMMUNOASSAY
(ELISA)
.
41
4.3.3
PRAEVALENZ
DER
ANTIKOERPER
GEGEN
60
KD,
52
KD
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIGENE
BEI
PATIENTEN
MIT
KUTANEN
AUTOIMMUN
ERKRANKUNGEN
.
42
4.3.4
VERGLEICH
VON
RO-POSITIVEN
UND
RO/LA-POSITIVEN
PATIENTEN
MIT
AUTOIMMUNERKRANKUNGEN
HINSICHTLICH
KLINISCHER
KRITERIEN
.
46
4.4
TYPISIERUNG
DES
NCOL-POLYMORPHISMUS
DES
TNF-SS-GENS
BEI
PATIENTEN
MIT
ANTIKOERPERN
GEGEN
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIGENE.
48
4.5
TYPISIERUNG
DES
PROMOTOR/ENHANCER-POLYMORPHISMUS
DES
TNF-O-GENS
BEI
PATIENTEN
MIT
ANTIKOERPERN
GEGEN
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIGENE
.
52
INHALTSVEREICHNIS
III
5
5.1
DISKUSSION
.
56
PROTEINBIOCHEMISCHE
METHODEN
ZUM
MOLEKULAREN
NACHWEIS
VON
ANTIKOERPERN
GEGEN
60
KD,
52
KD
RO/SSA
UND
48
KD
LA/SSB
ANTIGENE
.
56
5.2
PRAEVALENZ
UND
BEDEUTUNG
DER
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIKOERPER
IN
DER
DIAGNOSTIK
VON
AUTOIMMUNERKRANKUNGEN
.
59
5.3
ASSOZIATION
DER
AUTOIMMUNANTWORT
GEGEN
RO/SSA
UND
LA/SSB
ANTIGENE
MIT
KLINISCHEN
VERLAUFSPARAMETERN
.
61
5.4
ASSOZIATION
DER
RO/SSA
UND
LA/SSB-ANTIKOERPERSPEZIFITAETEN
ZU
GENPOLYMORPHISMEN
DER
TNF-GENE
.
62
5.4.1
5.4.2
ANTI-RO/LA-AUTOIMMUNANTWORT
UND
TNF-SS-GENPOLYMORPHISMUS.
63
ANTI-RO/LA-AUTOIMMUNANTWORT
UND
TNF-TR-GENPOLYMORPHISMUS.
65
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
68
7
LITERATUR
.
.70 |
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