Untersuchungen zur mikrochirurgischen Teilung in-vitro-produzierter Rinderembryonen:
Gespeichert in:
1. Verfasser: | |
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1997
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INHALTSVERZEICHNIS
1
EINLEITUNG
.
1
2
LITERATURUEBERSICHT
.
3
2.1
IN
VITRO
PRODUKTION
BOVINER
EMBRYONEN
.
3
2.1.1
ENTWICKLUNG
DER
TECHNIK
.
3
2.1.2
METHODEN
DER
IN
VITRO
PRODUKTION
BOVINER
EMBRYONEN
.
4
2.1.3
UNTERSCHIEDE
ZWISCHEN
IN
VITRO
UND
IN
VIVO
PRODUZIERTEN
EMBRYONEN.
5
2.2
METHODEN
ZUR
ERSTELLUNG
MONOZYGOTER
TIERE
.
6
2.2.1
ISOLIERUNG
EINZELNER
BLASTOMEREN
.
6
2.2.1.1
ENTWICKLUNG
DER
TECHNIK
.
6
2.2.1.2
GEWINNUNG
DER
EMBRYONEN
.
9
2.2.1.3
ENTFERNUNG
DER
ZONA
PELLUCIDA
.
9
2.2.1.4
TRENNUNG
DER
BLASTOMEREN
.
12
2.2.1.5
VERFAHREN
ZUR
BESTIMMUNG
DES
ENTWICKLUNGSPOTENTIALS
ISOLIERTER
.
BLASTOMEREN
.
13
2.2.1.5.1
DIREKTER
TRANSFER
IN
ZYKLUSSYNCHRONE
EMPFAENGER
OHNE
ZWISCHENKULTUR
.
13
2.2.1.5.2
TRANSFER
IN
ZYKLUSSYNCHRONE
EMPFAENGER
NACH
IN
VIVO
ZWISCHENKULTUR
.
15
2.2.1.5.3
TRANSFER
IN
ZYKLUSSYNCHRONE
EMPFAENGER
NACH
IN
VITRO
ZWISCHENKULTUR
.
17
2.2.1.5.4
IN
VITRO
KULTUR
OHNE
ANSCHLIESSENDEN
TRANSFER
.
22
2.2.1.6
ZELLZAHLEN
VON
AUS
ISOLIERTEN
BLASTOMEREN
GEWONNENEN
BLASTOZYSTEN
.
26
2.2.2
TEILUNG
VON
MORULAE
UND
BLASTOZYSTEN
.
28
2.2.2.1
ENTWICKLUNG
DER
TECHNIK
.
28
2.2.22
METHODEN
ZUR
TEILUNG
VON
MORULAE
UND
BLASTOZYSTEN
.
29
2.2.2.3
TEILUNG
VON
MAEUSEEMBRYONEN.
30
2.2.2.4
TEILUNG
VON
KANINCHENEMBRYONEN
.
33
2.2.2.5
TEILUNG
VON
SCHWEINEEMBRYONEN.
34
2.2.2.6
TEILUNG
VON
EMBRYONEN
BEIM
SCHAF
.
37
2.2.2.7
TEILUNG
VON
EMBRYONEN
DER
ZIEGE
.
41
2.2.2.8
TEILUNG
VON
EMBRYONEN
BEIM
PFERD
.
42
2.2.2.9
TEILUNG
VON
EMBRYONEN
BEIM
RIND
.
43
2.2.2.9.1
VERGLEICH
DER
GRAVIDITAETSRATEN
NACH
TRANSFER
GETEILTER
UND
UNGETEILTER EMBRYONEN
.
44
2.2.2.92
EINFLUSS
DES
EMBRYONENALTERS
.
45
2.2.2.9.3
EINFLUSS
DES
ENTWICKLUNGSSTADIUMS
.
46
2.2.2.9.4
EINFLUSS
DER
EMBRYONENQUALITAET
.
48
2.2.2.9.5
EINFLUSS
DER
QUALITAET
DER
HAELFTEN
.
48
2.2.2.9
6
EINFLUSS
DER
ZONA
PELLUCIDA
.
49
2.2.2.9.7
EINFLUSS
DER
TEILUNGSMETHODE
.
50
2.2.2.9.8
EINFLUSS
DER
ZWISCHENKULTURDAUER
.
51
2.2.2.99
EINFLUSS
DER
ANZAHL
TRANSFERIERTER
HAELFTEN
PRO
EMPFAENGER
.
52
2.2.2.9.10
EINFLUSS
DER
TRANSFERMETHODE
.
54
2.2.2.10
TEILUNG
VON
MORULAE
UND
BLASTOZYSTEN
IN
MEHR
ALS
ZWEI
TEILE
.
54
2.2.2.11
TEILUNG
IN
VITRO
PRODUZIERTER
EMBRYONEN
.
55
II
3
MATERIAL
UND
METHODEN
.
57
3.1
IN
VITRO
PRODUKTION
BOVINER
EMBRYONEN
.
57
3.1.1
GEWINNUNG
DER
EIZELLEN
.
57
3.1.2
REIFUNG
DER
EIZELLEN
.
58
3.1.3
SPERMAAUFBEREITUNG
UND
BEFRUCHTUNG.
58
3.1.4
KULTUR
DER
ZYGOTEN
.
59
3.2
KLASSIFIZIERUNG
DER
EMBRYONEN
.
60
3.2.1
BEURTEILUNG
DER
ZUR
MIKROCHIRURGISCHEN
TEILUNG
VERWENDETEN
EMBRYONEN:
.
60
3.2.1.1
ALTER:
.
60
3.2.1.2
ENTWICKLUNGSSTADIUM
.
60
3.2.1.3
QUALITAET
.
61
3.2.2
BEURTEILUNG
DER
ZUR
BLASTOMERENISOLIERUNG
VERWENDETEN
EMBRYONEN.
62
3.3
TEILUNG
VON
BLASTOZYSTEN.
63
3.3.1
INSTRUMENTARIUM
.
63
3.3.2
POSITIONIERUNG
DER
MIKROINSTRUMENTE
.
64
3.3.3
ABLAUF
.
64
3.4
GEWINNUNG
EINZELNER
BLASTOMEREN
.
66
3.5
IN
VITRO
KULTUR
DER
DEMI-EMBRYONEN
.
67
3.5.1
GETEILTE
BLASTOZYSTEN.
67
3.5.2
ISOLIERTE
BLASTOMEREN.
68
3.6
MORPHOLOGISCHE
BEURTEILUNG
DER
DEMI-EMBRYONEN
.
68
3.7
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHL
.
69
3.8
DURCHFUEHRUNG
DES
EMBRYOTRANSFERS
.
71
3.9
STATISTISCHE
AUSWERTUNG
.
72
3.10
VERWENDETE
MEDIEN
UND
STOCKLOESUNGEN
.
73
4
ERGEBNISSE
.
78
4.1
IN
VITRO
PRODUKTION
BOVINER
EMBRYONEN.
78
4.1.1
ENTWICKLUNGSRATEN
NACH
IN
VITRO
REIFUNG,
BEFRUCHTUNG
UND
KULTUR
.
78
4.1.2
WEITERENTWICKLUNGSKAPAZITAET
UNGETEILTER
BLASTOZYSTEN
.
80
4.2
TEILUNG
VON
BLASTOZYSTEN.
82
4.2.1
EINFLUSSFAKTOREN
AUF
DIE
WEITERENTWICKLUNG
UND
TRANSFERTAUGLICHKEIT
DER
HAELFTEN
.
82
4.2.1.1
EMBRYONENALTER
.
82
4.2.1.2
ENTWICKLUNGSSTADIUM
.
84
4.2.1.3
EMBRYONENQUALITAET
.
86
4.2.1.4
IN
VITRO
KULTUR
DER
HAELFTEN
.
86
4.2.1.4.1
KULTURMEDIUM
.
88
4.2.1.4.2
VOLUMEN
DES
KULTURMEDIUMS.
88
4.2.1.4.3
KOKULTUR
.
88
4.2.1.4.4
IVF-TERMIN
.
90
III
4.2.2
TEILUNG
VON
DEMI-BLASTOZYSTEN
.
91
4.2.3
MITTLERE
ZELLZAHL
DER
HAELFTEN
.
92
4.2.3.1
MITTLERE
ZELLZAHL
DER
HAELFTEN
AM
TAG
7
.
92
4.2
3.2
MITTLERE
ZELLZAHL
DER
HAELFTEN
AM
TAG
8
.
94
4.2.4
TRAECHTIGKEITSRATEN
NACH
TRANSFER
.
96
4.3
ISOLIERUNG
VON
BLASTOMEREN
.
97
4.3.1
EINFLUSS
DER
METHODE
ZUR
ENTFERNUNG
DER
Z.P
.
97
4.3.2
IN
VITRO
KULTUR
ISOLIERTER
BLASTOMEREN
.
98
4.3.2.1
KULTUR
IN
GRUPPEN
OHNE
Z.P.
/
EINZELKULTUR
OHNE
Z.P
.
98
4.3.2.2
KULTUR
IN
GRUPPEN
MIT
Z.P
.
98
4.3.3
ZELLZAHLEN
VON
BLASTOZYSTEN
AUS
ISOLIERTEN
BLASTOMEREN
.
101
5
DISKUSSION
.
102
5.1
IN
VITRO
PRODUKTION
BOVINER
EMBRYONEN
.
102
5.1.1
KLASSIFIZIERUNG
DER
EMBRYONEN.
103
5.1.2
VERGLEICH
DER
WEITERENTWICKLUNG
GETEILTER
UND
UNGETEILTER
BLASTOZYSTEN
.
104
5.2.
GRENZEN
DER
KLONIERUNG
DURCH
BLASTOMERENSEPARATION
UND
TEILUNG
VON
.
MORULAE
UND
BLASTOZYSTEN
.
106
5.3
TEILUNG
VON
BLASTOZYSTEN
.
108
5.4
TEILUNG
VON
DEMI-BLASTOZYSTEN
.
111
5.5
BESTIMMUNG
DER
ZELLZAHLEN.
112
5.6
TRAECHTIGKEITSERGEBNIS
.
113
5.7
ISOLIERUNG
EINZELNER
BLASTOMEREN
.
115
5.8
BEWERTUNG
DER
TECHNIK
UND
DER
ERGEBNISSE
.
117
6
ZUSAMMENFASSUNG
.
102
7
SUMMARY
.
123
8
LITERATURVERZEICHNIS
.
125 |
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